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Os FACs permitem a purificação de células marcadas com fluorescência dentre uma concentração de células mistas. Sobre o seu funcionamento considere que:
I. no componente fluídico de um citômetro permite a coleta e transporte amostral, enquanto que o componente óptico proporciona a excitação da partícula/célula, que é conectada a uma rede eletrônica de detectoresligada a um computador.
II. a rede eletrônica detecta o sinal emitido e converte em dados digitais não proporcionais à intensidade da luz que estão conectadas ao software computacional que executa a análise de dados.
III. o processo é baseado na radiação laser direcionada, que excita substâncias fluorescentes presentes nas células, que podem ser compreendidas por interpolação das informações biológicas, moleculares e/ou químicas das células em suspensão.
IV. a citometria de fluxo pode ser empregada em diversas aplicações, seja na detecção de células inteiras, e componentes celulares tais como organelas, núcleos ou moléculas de DNA, RNA.
Sobre as afirmativas acima, pode-se dizer que:
I. Quanto maior é o valor do Ct, menor é carga viral. II. Quanto maior é o valor do Ct, maior é a carga viral III. Quanto menor é o valor do Ct, maior é a carga viral.
Sobre as afirmativas acima, pode-se dizer que:
I. As sondas são marcadas com uma molécula que emite fluorescência (quencher) numa extremidade e com uma molécula que absorve a fluorescência (reporter) na outra extremidade.
II. Em um protocolo para alvos múltiplos (multiplex) numa mesma reação, as sondas específi cas para cada sequência genômica poderão ser marcadas com a mesma molécula repórter, necessitando somente de moléculas quencher distintas.
III. Durante o desenho dos oligonucleotídeos, a região de hibridização da sonda deve estar localizada à montante da região de hibridização do primer sense (forward).
As afirmativas I, II e III são, respectivamente:
I. A porcentagem recomendada do conteúdo GC é de 40% a 60%.
II. A terminação 3’ deve ser rica em AT.
III. Repetições de bases invertidas ou sequências auto complementares são recomendadas.
As afirmativas I, II e III são, respectivamente:
I. O isolamento viral só pode ser realizado em sistemas de culturas celulares in vitro.
II. Para o isolamento viral em culturas celulares in vitro, deve-se sempre utilizar células provenientes de tecido considerado alvo principal da infecção viral no hospedeiro natural.
III. A observação da presença de replicação viral após a inoculação da amostra clínica na cultura celular se dá inicialmente pela observação do aparecimento do efeito citopático, seguido da confirmação por outras técnicas específicas, como imunofluorescência e detecção de ácido nucleico por RT-PCR (biologia molecular).
É correto afirmar que apenas: