Gabarito: B

Tema central: O ELISPOT é um ensaio imunológico enzimático que quantifica células individuais secretoras (p.ex., citocinas ou anticorpos). Cada “spot” representa uma célula que secretou a molécula-alvo após estímulo in vitro. É muito usado em imunomonitoramento (vacinas, infecções, oncologia) e em testes diagnósticos específicos.

Por que a alternativa B é a INCORRETA? Porque o ELISPOT é, sim, aplicado à detecção de interferon-gama (IFN-γ) para diagnóstico de tuberculose, notadamente no teste T‑SPOT.TB, um IGRA baseado em ELISPOT que enumera linfócitos T que produzem IFN‑γ após estímulo com antígenos do Mycobacterium tuberculosis. Diretrizes da OMS e do CDC reconhecem os IGRAs (incluindo T‑SPOT.TB) para investigação de infecção tuberculosa latente, especialmente em quem recebeu BCG. Logo, afirmar que “ELISPOT não é aplicado…” é falso. (WHO Consolidated Guidelines on TB, 2020/2021; CDC IGRA Guidance; UpToDate)

Análise das demais alternativas:

A. Verdadeira. ELISPOT é conceitualmente semelhante ao ELISA por ser um imunoensaio enzimático com anticorpos de captura e detecção. Diferença-chave: ELISA mede concentração total do analito; ELISPOT mede a frequência de células secretoras (spots por poço).

C. Verdadeira. Em ambos, anticorpos podem ser imobilizados à superfície de microplacas (no ELISPOT, placas com membrana PVDF/nitrocelulose) para capturar o alvo secretado.

D. Verdadeira. Uso clássico do ELISPOT é detectar células secretoras de citocinas (p.ex., IFN‑γ, IL‑2, IL‑4), permitindo avaliar respostas Th1/Th2, imunidade vacinal e infecções.

E. Verdadeira. O método detecta proteínas secretadas in vitro por células cultivadas (linfócitos T, B, NK, etc.), como citocinas ou anticorpos (B‑cell ELISPOT).

Dica de prova: Ao ver “IFN‑γ + tuberculose”, lembre dos IGRAs. QuantiFERON (ELISA) e T‑SPOT.TB (ELISPOT) medem resposta de IFN‑γ a antígenos específicos de TB. Se a alternativa negar o uso com IFN‑γ/TB, é a incorreta. Atenção à pegadinha: IGRAs são indicados sobretudo para infecção latente, não para confirmar doença ativa isoladamente.

Referências essenciais: WHO Consolidated Guidelines on TB (2020/2021); CDC – Interferon Gamma Release Assays (IGRAs) for TB (2024); UpToDate – Use of IGRAs for diagnosis of TB; Janeway’s Immunobiology; Nature Protocols – ELISPOT.

Resumo em uma frase: O ELISPOT é um imunoensaio que conta células secretoras; é amplamente usado para detectar IFN‑γ em IGRAs como o T‑SPOT.TB, logo a alternativa B é a incorreta.

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