Tema central: interferências em métodos sorológicos para detecção de anticorpos (ELISA e Luminex SAB). Essas interferências podem causar falsos negativos (ex.: efeito prozona/gancho) ou falsos positivos (ligações inespecíficas por anticorpos heterófilos).

Alternativa correta: B
Os anticorpos anticardiolipina (aCL) são usados na investigação de síndrome antifosfolípide e outras doenças autoimunes e podem interferir em ELISA de anticorpos anti-HLA por ligações inespecíficas a superfícies de poliestireno, fosfolipídeos residuais ou proteínas de bloqueio, elevando o sinal de fundo. Isso está descrito em manuais de imunensaios (The Immunoassay Handbook) e diretrizes de validação de interferentes (CLSI EP07), além de revisões em transplante e imunologia (UpToDate; ASHI Standards). Estratégias laboratoriais incluem controles de fundo, bloqueadores, repetição com diluição ou plataforma alternativa.

Por que as demais estão incorretas?

A. Afirmar que IgM anti-HLA não provoca prozona é incorreto. O efeito prozona ocorre em títulos muito altos de anticorpos (IgG ou IgM), ou por ativação de complemento, levando a sinal reduzido no ELISA/Luminex SAB. Diluição seriada, uso de EDTA/heat inactivation ou DTT (para reduzir IgM) são medidas clássicas. Referências: ASHI/UpToDate.

C. Falso dizer que aCL não são empregados em autoimunes. Eles são marcadores diagnósticos da síndrome antifosfolípide (critérios internacionais). Além disso, podem causar ligações inespecíficas em ELISA, precisamente o oposto do enunciado. Diretrizes: UpToDate; revisões em APS (SBC/BSH).

D. A ideia de que IgM não compete com IgG na fase sólida é equivocada. IgM pode ocupar epítopos e/ou ativar complemento, dificultando a detecção de IgG alorreativos (estéricos e por deposição de C1q/C3). Por isso, muitos laboratórios tratam amostras com DTT ou usam detecção específica para IgG para minimizar interferência. Referências: ASHI Standards; UpToDate.

E. Dizer que o “empacotamento” nas porções Fc não interfere é errado. Em imunensaios, há efeitos de crowding/estereoscopia e interferência por anticorpos que reconhecem Fc (p. ex., rheumatoid factor, HAMA), gerando falsos positivos ou mascarando epítopos. A densidade de antígeno/anticorpo na matriz pode reduzir a acessibilidade do conjugado detector. Referências: The Immunoassay Handbook; CLSI EP07.

Dicas para a prova:
- Palavras-gatilho: prozona, IgM, complemento, aCL, ligações inespecíficas.
- Frases com “não ocorre” exigem cautela: em imunensaios, quase sempre há exceções e interferentes.
- Se suspeitar de prozona, pense em diluir a amostra e usar EDTA/DTT.

Referências de apoio: UpToDate (HLA antibody testing; antiphospholipid antibodies), ASHI Standards, CLSI EP07, The Immunoassay Handbook, Harrison’s (Immunology overview).

Gabarito: B

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