Questões de Concurso Comentadas sobre técnicas em laboratório
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I. os ensaios de fluxo lateral (LFA) fornecem resultados qualitativos ou medições semiquantitativas de proteínas, entretanto essa técnica apresenta limitações quando há elevada concentração da proteína alvo na amostra, de forma que saturam os canais de ligação do anticorpo.
II. a técnica de Western blot é empregada na separação de proteína de uma amostra que utiliza dados de tamanho associados ao uso da técnica de eletroforese em gel. A membrana de nitrocelulose é utilizada para fixar bandas de proteínas, separá-las e por fim reagir com o anticorpo específico marcado que visa detectar a proteína alvo.
III. a espectrometria de massa é uma ferramenta de análise proteômica que permite analisar misturas complexas de substância, fornecendo um perfil completo da com- posição proteica.
IV. os ensaios de fluxo lateral (LFA) são comumente usados para fins clínicos, diagnóstico e detecção de proteínas.
Sobre as afirmativas acima, pode-se dizer que:
I. o método SPR é baseado na imobilização de um reagente de afinidade em um metal.
II. é um método avançado que independe do ângulo de incidência da luz, comprimento de onda da luz ou ao índice de refração da amostra.
III. o reagente de afinidade liga-se especificamente ao alvo de interesse provocando uma mudança mensurável no índice de refração.
IV. a intensidade do método depende das propriedades dielétricas do meio, dentre os quais o tamanho, a composição e a forma da estrutura metálica.
Sobre as afirmativas acima, pode-se dizer que:
Os FACs permitem a purificação de células marcadas com fluorescência dentre uma concentração de células mistas. Sobre o seu funcionamento considere que:
I. no componente fluídico de um citômetro permite a coleta e transporte amostral, enquanto que o componente óptico proporciona a excitação da partícula/célula, que é conectada a uma rede eletrônica de detectoresligada a um computador.
II. a rede eletrônica detecta o sinal emitido e converte em dados digitais não proporcionais à intensidade da luz que estão conectadas ao software computacional que executa a análise de dados.
III. o processo é baseado na radiação laser direcionada, que excita substâncias fluorescentes presentes nas células, que podem ser compreendidas por interpolação das informações biológicas, moleculares e/ou químicas das células em suspensão.
IV. a citometria de fluxo pode ser empregada em diversas aplicações, seja na detecção de células inteiras, e componentes celulares tais como organelas, núcleos ou moléculas de DNA, RNA.
Sobre as afirmativas acima, pode-se dizer que:
I. Quanto maior é o valor do Ct, menor é carga viral. II. Quanto maior é o valor do Ct, maior é a carga viral III. Quanto menor é o valor do Ct, maior é a carga viral.
Sobre as afirmativas acima, pode-se dizer que:
I. As sondas são marcadas com uma molécula que emite fluorescência (quencher) numa extremidade e com uma molécula que absorve a fluorescência (reporter) na outra extremidade.
II. Em um protocolo para alvos múltiplos (multiplex) numa mesma reação, as sondas específi cas para cada sequência genômica poderão ser marcadas com a mesma molécula repórter, necessitando somente de moléculas quencher distintas.
III. Durante o desenho dos oligonucleotídeos, a região de hibridização da sonda deve estar localizada à montante da região de hibridização do primer sense (forward).
As afirmativas I, II e III são, respectivamente: