Questões de Concurso Sobre técnicas bioquímicas indicadas no diagnóstico de diversas patologias humanas em técnicas em laboratório

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Q3335452 Técnicas em Laboratório

A reação da polimerase em cadeia (PCR) é uma técnica que permite amplificar segmentos dos genomas de microrganismos investigados. O PCR inclui etapas como:


1. Desnaturação do DNA de fita dupla.

2. A DNApolimerase se liga ao híbrido formado pelo DNA molde e iniciadores.

3. Anelamento dos iniciadores com sequências que correspondem às sequências do DNA molde.


A sequência correta, de cima para baixo, das etapas apresentadas durante a reação da polimerase em cadeia (PCR) é:

Alternativas
Q3334279 Técnicas em Laboratório
Os Ensaios de ligação, também chamados Ensaios de ligação de ligantes (LBA - Ligand-binding assay) são métodos analíticos de quantificação de alta afinidade e seletivos para interações macromoleculares entre reagentes (anticorpos, receptores ou ligantes) e o produto. Sobre a diferença entre ensaios de ligação, que o difere dos métodos cromatográficos, é INCORRETO afirmar que: 
Alternativas
Q3334189 Técnicas em Laboratório
Um laboratório inicia um processo de validação de teste de diagnóstico para sífilis. Em relação aos procedimentos de avaliação da exatidão do método, é correto afirmar que: 
Alternativas
Q3334155 Técnicas em Laboratório
Em relação ao diagnóstico para infecção pelo HTLV, é INCORRETO afirmar que:
Alternativas
Q3332717 Técnicas em Laboratório
A técnica de PCR em tempo real (real time PCR) foi desenvolvida com base na reação de PCR convencional. É considerada uma vantagem dessa técnica sobre a PCR convencional:
Alternativas
Q3332714 Técnicas em Laboratório
Algumas técnicas para a identificação de vírus murinos baseiam-se na amplificação de sequências únicas de ácido nucleico viral. A reação em cadeia da polimerase (PCR) convencional é uma técnica de amplificação de genoma que requer:
Alternativas
Q3331669 Técnicas em Laboratório
Observe as afirmativas a seguir, em relação aos microarrays.

I. É uma ótima ferramenta para estudos de expressão gênica.
II. Pode ser utilizado para identificar polimorfismos de nucleotídeo único (SNPs).
III. É utilizado na detecção direta de patógenos.

Sobre as afirmativas acima, pode-se dizer que:
Alternativas
Q3331659 Técnicas em Laboratório
Na técnica da PCR alelo específico (também denominada ARMS - amplification of refractory mutation systems e PCR/ SSP - Sequence-specific Primer) para diagnosticar uma variante patogênica:
Alternativas
Q3331658 Técnicas em Laboratório
Nos casos em que é necessário sintetizar simultaneamente várias regiões gênicas simultaneamente, deve-se utilizar: 
Alternativas
Q3331656 Técnicas em Laboratório
Ao se realizar um sequenciamento de Sanger do gene β globina para identificação das mutações de um paciente com diagnóstico de Talassemia Beta, foi encontrada uma variante patogênica (deletéria), uma mutação sem sentido, no códon 39 em homozigose. No entanto, ao se analisarem os pais desse paciente, apenas o pai apresentava essa variante. Partindo do princípio de que as reações de sequenciamento foram bem-sucedidas e com alta qualidade, uma possível explicação seria:
Alternativas
Q3331655 Técnicas em Laboratório
Para a identificação e quantificação de um vírus que tenha como material genético o RNA, o método apropriado seria:
Alternativas
Q3331265 Técnicas em Laboratório
A medida da absorbância é comumente usada para caracterizar interações proteína-proteína. Quando associada a métodos baseados em placas, fornece uma abordagem de alto rendimento para triagem de múltiplas interações simultaneamente. Entre os itens abaixo, o único com métodos que utilizam medidas de absorbância a partir de amostras em placas é:
Alternativas
Q3331262 Técnicas em Laboratório
A espectroscopia de fluorescência em estado estacionário permite o monitoramento do espectro de emissão de proteínas em função do tempo, o qual pode revelar mudanças de intensidade de fluorescência. Tal técnica é útil para o estudo de mudanças conformacionais ou da cinética de ligação. A intensidade de fluorescência (I) está relacionada à concentração do fluoróforo (C) e à absortividade molar (ε), pela equação I = ε.C.L, conforme descrito pela lei de Lambert-Beer. Já o brilho de emissão (B) é dado por B = Ф.ε, onde Ф é o rendimento quântico. Entre as afirmativas abaixo é INCORRETO afirmar que:
Alternativas
Q3331257 Técnicas em Laboratório
As figuras abaixo, (adaptadas de Jerabek-Willemsen et. al., J. Mol. Struct. 1077: 101-113, 2014), representam as etapas de um ensaio de termoforese em microescala (Figura A) e a curva dose-resposta como resultado do experimento (Figura B).

Imagem associada para resolução da questão
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Baseado nas figuras acima apresentadas, é INCORRETO afirmar que:
Alternativas
Q3331254 Técnicas em Laboratório
Diferentes tipos de biosensores têm sido desenvolvidos para o estudo de interações entre macromoléculas biológicas. Experimentos de interação em superfícies ,tipicamente, envolvem a imobilização de uma molécula (ligante) em uma superfície e o monitoramento da interação dessa com uma segunda molécula (analito) em solução. Neste sentido, o aumento da concentração do analito na superfície do biosensor leva à mudança do índice de refração próximo à superfície. Dois principais tipos de instrumentos foram desenvolvidos para medir essa mudança com alta sensibilidade: interferômetros e equipamentos de ressonância plasmônica de superfície (do inglês surface plasmon resonance – SPR). Sobre este último, é correto afirmar que:
Alternativas
Q3331253 Técnicas em Laboratório
A técnica de espectroscopia de dicroísmo circular (do inglês circular dichroism – CD) é um método rápido para avaliar a estrutura secundária, o enovelamento e as propriedades de interação de uma biomolécula. Sobre esta técnica, é INCORRETO afirmar que:
Alternativas
Q3331252 Técnicas em Laboratório
O cristalino é composto principalmente por proteínas solúveis em água (do inglês water soluble – WS) altamente ordenadas e denominadas cristalinas. A agregação e a perda de solubilidade destas proteínas ocasionam desde a opacificação progressiva do cristalino até o surgimento de catarata. Embora esta seja uma doença bem conhecida, o mecanismo de agregação das proteínas WS no cristalino não é bem compreendido. Uma das causas reconhecidas de modificação de proteínas está relacionada à exposição à luz UV (ultravioleta). Por esta razão, o grupo de pesquisa liderado por Claudia Honisch (Institute of Biomolecular Chemistry, Padova, Itália) decidiu avaliar as propriedades espectroscópicas das proteínas WS e a sua estabilidade frente à irradiação UV por espectroscopia de dicroísmo circular. Para tanto, proteínas WS de origem animal foram utilizadas para a medição do espectro far-UV de dicroísmo circular antes (linha preta) e após (linha vermelha) exposição à luz UV-C (254 nm, nanômetros) durante 45 minutos, conforme figura abaixo.


Imagem associada para resolução da questão


Legenda: Espectro de dicroísmo circular (far-UV) de proteínas WS isoladas do cristalino de porcos antes (preto) e após (vermelho) exposição à luz UV-C. Proteínas WS foram diluídas à concentração de 0,09 mg/mL em 10 mM tampão fosfato, pH 7,2. Espectro adquirido em equipamento Jasco J-1500. Condições do experimento: resposta de 1 s, data pitch de 0,5 nm, largura de banda (bandwidth) de 1,0 nm, e cubeta com caminho ótico de 0,1 cm (200 μL). Adaptado de Honisch et al. Application of Circular Dichroism and Fluorescence Spectroscopies To Assess Photostability of Water-Soluble Porcine Lens Proteins. ACS Omega. 2020. 5 (8), 4293-4301. DOI: 10.1021/acsomega.9b04234.
Com base nos dados obtidos por Dr. Honisch, é correto afirmar que:
Alternativas
Q3331250 Técnicas em Laboratório
Sobre o método de Bradford para mensuração da concentração de uma solução contendo proteína, é INCORRETO afirmar que:
Alternativas
Q3331249 Técnicas em Laboratório
A mensuração da concentração de uma determinada solução contendo proteína é frequentemente realizada por espectrofotometria de luz UV (ultravioleta) visível. Neste sentido, a absorção de luz UV é associada às transições eletrônicas nas quais os elétrons de determinadas moléculas absorvem energia em forma de luz e transitam para seus estados eletrônicos excitados (de maior energia). Neste contexto, o grupo de átomos em uma determinada molécula que compreende os orbitais envolvidos nas transições eletrônicas constituem os cromóforos. Dentre os cromóforos mais utilizados para mensuração da concentração de proteínas está o triptofano, cujo grupo indol (presente em seu anel aromático) absorve luz UV em torno de 280 nm (nanômetros) e sofre transição eletrônica neste comprimento de onda. Diante da necessidade de medir a concentração de determinada solução contendo uma proteína que não possua em sua sequência primária nenhum resíduo de triptofano, o aminoácido e o respectivo comprimento de onda de absorção de luz UV que deverá ser utilizado corresponde a: 
Alternativas
Q3331248 Técnicas em Laboratório
João, Tecnologista da Fiocruz PE, recebeu a demanda de realizar a aquisição do espectro de dicroísmo circular (do inglês circular dichroism – CD) da glicoproteína Gc do vírus Oropouche. Apesar de a referida proteína ter sido transportada nas condições adequadas para a sua conservação, João identificou a existência de precipitado sólido no interior do tubo contendo a proteína em questão no momento do recebimento da amostra na Fiocruz PE. Visando a realização da medição do espectro de CD à temperatura ambiente, João precisará quantificar novamente a amostra de proteína recebida, a fim de ajustar a concentração da mesma para a concentração de trabalho (20 mM, micromolar). Para tanto, João deverá remover o precipitado sólido e medir a concentração da proteína recebida por espectrofotometria utilizando luz no comprimento de onda de 280 nm (nanômetros). De posse da sequência primária da proteína em questão (informada abaixo), João rapidamente calculou o coeficiente de absorção molar (Ꜫ) da mesma.

Sequência de aminoácidos da glicoproteína Gc:

DEDCLSKDIKITYQELHNCIGPKIMGNTCVSKNELYSDLFSKNLVTEYDKKYFEPDTVNDQFNKIEFAQDAHRMILLERILYKTECEMLSLKKNSGPYNVAWRTYLKNHNIDLCSRHNYKMICQCINTHSMCKNTDIDYNKEIETYYKSNAAAYRADLNTIMDTLKTAFRGLTKVLIENYIEKDDSDALKALFSNITDSVQDNYQMIGILKFASKLLDINLGGWSHPQFEK


O valor do coeficiente de absorção molar encontrado por João corresponde a: 
Alternativas
Respostas
101: B
102: E
103: B
104: C
105: C
106: A
107: E
108: B
109: A
110: X
111: E
112: B
113: A
114: C
115: D
116: D
117: A
118: A
119: A
120: D