Alternativa correta: A — fenilalanina, 257–270 nm.

Tema central: Espectrofotometria UV-Vis para quantificar proteínas usando a Lei de Beer-Lambert. A absorção no UV decorre de transições eletrônicas em cromóforos, sobretudo os aminoácidos aromáticos: triptofano (~280 nm), tirosina (~274–276 nm) e fenilalanina (~257–260 nm). Em diagnósticos laboratoriais, essa quantificação é fundamental antes de técnicas como eletroforese, ensaios enzimáticos e imunodiagnósticos.

Justificativa da correta (A): Se a proteína não tem triptofano, outro cromóforo aromático útil é a fenilalanina, cujo anel fenil apresenta máximo de absorção em ~257–260 nm e banda que se estende até ~270 nm. Por isso, o intervalo 257–270 nm é o mais coerente para monitorar sua absorção. Referências clássicas de bioquímica (Lehninger; Stryer) e métodos analíticos (Harris) descrevem esses máximos de absorção.

Análise das incorretas:

• B) Fenilalanina, 247–272 nm: inclui 247 nm, região onde a absorção da fenilalanina é menos característica e há maior interferência do esqueleto peptídico (UV profundo, ~190–220 nm). O máximo aceito é ~257–260 nm, tornando o limite inferior de 247 nm inadequado.
• C) Histidina, 220–247 nm e D) Histidina, 222–257 nm: a histidina (anel imidazol) tem absorção fraca e predominantemente em ~200–220 nm, onde o peptídeo também absorve fortemente, prejudicando a especificidade. Não é cromóforo de escolha para quantificação de proteína por UV em matrizes complexas.
• E) Tirosina, 210–226 nm: a tirosina absorve em ~274–276 nm (próximo a 280 nm). O intervalo 210–226 nm é incorreto e conflita com dados consolidados (Lehninger; Stryer). Assim, não atende ao objetivo da questão.

Pegadinhas e estratégias:

• Memorize os picos: Trp ~280 nm, Tyr ~274–276 nm, Phe ~257–260 nm; peptídeo forte em ~190–214/220 nm.
• Quando o enunciado “exclui triptofano”, verifique se as faixas ofertadas são compatíveis com Phe ou Tyr. Se a faixa de Tyr estiver errada (como 210–226 nm), opte por Phe 257–270 nm.
• Lembre: a absorção da fenilalanina é mais fraca que a de tirosina e triptofano, exigindo amostras mais concentradas ou cubetas de maior caminho óptico.

Referências úteis: Lehninger Principles of Biochemistry; Biochemistry (Stryer); Harris, Quantitative Chemical Analysis; práticas laboratoriais descritas em UpToDate (métodos de quantificação de proteínas) e guias de laboratório clínico baseados na Lei de Beer-Lambert.

Conclusão: Para proteína sem triptofano, o cromóforo alternativo correto e a faixa de absorção mais fiel entre as opções é fenilalanina, 257–270 nm (Alternativa A).

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