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Q3331253 Técnicas em Laboratório
A técnica de espectroscopia de dicroísmo circular (do inglês circular dichroism – CD) é um método rápido para avaliar a estrutura secundária, o enovelamento e as propriedades de interação de uma biomolécula. Sobre esta técnica, é INCORRETO afirmar que:
Alternativas

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Tema central: A espectroscopia de circular dichroism (CD) mede a diferença de absorção entre luz circularmente polarizada à esquerda (EL) e à direita (ER) por moléculas quirais. É muito usada para estimar estrutura secundária de proteínas, enovelamento e interações de ligação (afinidade/constante de ligação).

Alternativa INCORRETA (gabarito: D) – Justificativa: Define CD como “absorção diferencial de luz não polarizada”. O correto é: CD é a absorção diferencial de luz circularmente polarizada (EL vs ER). “Luz não polarizada” não possui componente direita/esquerda, tornando a afirmação conceitualmente equivocada. Referência: Kelly et al., BBA 2005; Whitmore & Wallace, Biopolymers 2008; Fasman, 1996.

Análise das demais alternativas (consideradas corretas):

A. Correta. O sinal de CD pode ser expresso como Δε (diferença de absorptividade molar) ou como elipticidade (θ), que é a forma comumente lida em mdeg nos espectropolarímetros.

B. Correta no espírito da prova. A elipticidade é o ângulo cujo tangente é a razão entre os eixos menor/maior da elipse de polarização. A relação clássica entre as grandezas é que a elipticidade molar [θ] (deg·cm²·dmol⁻¹) é aproximadamente [θ] ≈ 3298·Δε. Algumas convenções incluem fatores de λ quando se tratam formas específicas de normalização; a alternativa captura a proporcionalidade entre θ e Δε, usada em contextos de CD (Kelly 2005; Whitmore 2008).

C. Essencialmente correta. Δε = ΔA/(l·c) normaliza o sinal pela concentração e caminho óptico. Em prática, muitos relatam o sinal como elipticidade molar [θ] em deg·cm²·dmol⁻¹; já Δε em si tem unidades M⁻¹·cm⁻¹. A alternativa reflete o uso de ambas as formas na rotina de CD.

E. Correta. Aplicações clássicas: estimar hélice-α/folha-β de proteínas, avaliar termodinâmica de enovelamento (curvas de melting) e determinar constantes de ligação por titulações espectrais.

Dicas de prova e pegadinhas:

- Procure palavras “sinalizadoras”: CD = diferença de EL vs ER; menção a “não polarizada” indica erro conceitual.

- Memorize relações úteis: ΔA = Δε·c·l; [θ] ≈ 3298·Δε; instrumentos reportam θ (mdeg) ≈ 32980·ΔA.

- Verifique unidades: [θ] em deg·cm²·dmol⁻¹; Δε em M⁻¹·cm⁻¹.

Referências rápidas: Kelly SM et al. Biochim Biophys Acta, 2005; Whitmore L, Wallace BA. Biopolymers, 2008; Fasman GD (ed.). Circular Dichroism and the Conformational Analysis of Biomolecules, 1996.

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