Questões de Concurso Público FIOCRUZ 2024 para Tecnologista em Saúde Pública - Plataforma tecnológica de caracterização de proteínas e citometria de fluxo

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Q3331227 Técnicas em Laboratório
A Citometria de Fluxo emprega três importantes sistemas na aquisição de dados quantificáveis a partir de uma amostra. Um dos sistemas empregados é o sistema de fluidos. Em relação a este sistema, é INCORRETO afirmar que:
Alternativas
Q3331229 Técnicas em Laboratório
Em relação a fluorocromos e corantes empregados em Citometria de Fluxo, avalie se as afirmativas a seguir são verdadeiras (V) ou falsas (F).

I. Um determinado fluorocromo pode ser excitado apenas uma vez e depois é irreparavelmente fotobranqueado.

II. Para armazenamento a longo prazo, os fluorocromos, tipo “Tandem”, devem ser expostos à luz e congelados.

III. A autofluorescência é excitada apenas pelos lasers violeta e azul e emitida nos comprimentos de onda azul, verde e amarelo.

IV. O substrato fluorescente, denominado éster succinimidílico de diacetato de carboxifluoresceína (do inglês, carboxylfluorescein succinimidyl ester - CFSE), é um exemplo de corante de ácido nucleico, que pode ser empregado para determinar divisão celular ou viabilidade celular.

V. Os corantes de viabilidade celular associam-se sempre ao DNA.


De cima para baixo, a sequência correta é:
Alternativas
Q3331230 Técnicas em Laboratório
A titulação de anticorpos é fundamental para garantir que a fluorescência detectada seja específica, minimizando a superestimação ou subestimação dos sinais e obtendo resultados mais precisos. Neste sentido, a variável que influencia neste processo é:
Alternativas
Q3331236 Técnicas em Laboratório
A tomada de decisão para a escolha dos fluorocromos em um painel multiparamétrico, envolve: 
Alternativas
Q3331237 Técnicas em Laboratório
As afirmativas abaixo são regras práticas adequadas ao escolher a combinação de fluorocromos de um painel multiparamétrico, EXCETO:
Alternativas
Q3331238 Técnicas em Laboratório
Um marcador de viabilidade deve ser empregado na seguinte situação, EXCETO:
Alternativas
Q3331239 Técnicas em Laboratório
São aplicações clínicas da Citometria de Fluxo:

I. Análise de reticulócitos. II. Diagnóstico e acompanhamento de leucemias e linfomas. III. Monitoramento de células CD4+ de pacientes HIV+.

Das afirmativas acima:
Alternativas
Q3331240 Técnicas em Laboratório
Observe a figura abaixo sobre o perfil morfométrico de células do sangue periférico humano avaliado por Citometria de Fluxo em gráfico bidimensional de densidade de tamanho (FSC-Height) versus complexidade interna (SSC-Height):

As populações celulares selecionadas nos gates R1, R2, R3 e R4 correspondem, respectivamente, a:

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Alternativas
Q3331241 Técnicas em Laboratório
Considerando a população R1 da questão anterior, avalie os gráficos A-D abaixo, após imunofenotipagem de subpopulações de linfócitos do sangue periférico humano:

Os percentuais das subpopulações de linfócitos T totais, linfócitos T CD4+, linfócitos T CD8+, linfócitos B e células NK são os seguintes, respectivamente:

Imagem associada para resolução da questão

Imagem associada para resolução da questão
Imagem associada para resolução da questão
Alternativas
Q3331242 Técnicas em Laboratório
A atenuação de ligações não específicas de anticorpos deve ser realizada, empregando:
Alternativas
Q3331245 Técnicas em Laboratório
São aplicações rotineiras de separação de populações (cell sorting), EXCETO:
Alternativas
Q3331246 Técnicas em Laboratório
Uma série de métodos são utilizados para separação e purificação de proteínas. Entre os métodos abaixo, aquele que NÃO consiste em um método de separação e purificação de proteínas corresponde à(ao): 
Alternativas
Q3331248 Técnicas em Laboratório
João, Tecnologista da Fiocruz PE, recebeu a demanda de realizar a aquisição do espectro de dicroísmo circular (do inglês circular dichroism – CD) da glicoproteína Gc do vírus Oropouche. Apesar de a referida proteína ter sido transportada nas condições adequadas para a sua conservação, João identificou a existência de precipitado sólido no interior do tubo contendo a proteína em questão no momento do recebimento da amostra na Fiocruz PE. Visando a realização da medição do espectro de CD à temperatura ambiente, João precisará quantificar novamente a amostra de proteína recebida, a fim de ajustar a concentração da mesma para a concentração de trabalho (20 mM, micromolar). Para tanto, João deverá remover o precipitado sólido e medir a concentração da proteína recebida por espectrofotometria utilizando luz no comprimento de onda de 280 nm (nanômetros). De posse da sequência primária da proteína em questão (informada abaixo), João rapidamente calculou o coeficiente de absorção molar (Ꜫ) da mesma.

Sequência de aminoácidos da glicoproteína Gc:

DEDCLSKDIKITYQELHNCIGPKIMGNTCVSKNELYSDLFSKNLVTEYDKKYFEPDTVNDQFNKIEFAQDAHRMILLERILYKTECEMLSLKKNSGPYNVAWRTYLKNHNIDLCSRHNYKMICQCINTHSMCKNTDIDYNKEIETYYKSNAAAYRADLNTIMDTLKTAFRGLTKVLIENYIEKDDSDALKALFSNITDSVQDNYQMIGILKFASKLLDINLGGWSHPQFEK


O valor do coeficiente de absorção molar encontrado por João corresponde a: 
Alternativas
Q3331249 Técnicas em Laboratório
A mensuração da concentração de uma determinada solução contendo proteína é frequentemente realizada por espectrofotometria de luz UV (ultravioleta) visível. Neste sentido, a absorção de luz UV é associada às transições eletrônicas nas quais os elétrons de determinadas moléculas absorvem energia em forma de luz e transitam para seus estados eletrônicos excitados (de maior energia). Neste contexto, o grupo de átomos em uma determinada molécula que compreende os orbitais envolvidos nas transições eletrônicas constituem os cromóforos. Dentre os cromóforos mais utilizados para mensuração da concentração de proteínas está o triptofano, cujo grupo indol (presente em seu anel aromático) absorve luz UV em torno de 280 nm (nanômetros) e sofre transição eletrônica neste comprimento de onda. Diante da necessidade de medir a concentração de determinada solução contendo uma proteína que não possua em sua sequência primária nenhum resíduo de triptofano, o aminoácido e o respectivo comprimento de onda de absorção de luz UV que deverá ser utilizado corresponde a: 
Alternativas
Q3331250 Técnicas em Laboratório
Sobre o método de Bradford para mensuração da concentração de uma solução contendo proteína, é INCORRETO afirmar que:
Alternativas
Q3331252 Técnicas em Laboratório
O cristalino é composto principalmente por proteínas solúveis em água (do inglês water soluble – WS) altamente ordenadas e denominadas cristalinas. A agregação e a perda de solubilidade destas proteínas ocasionam desde a opacificação progressiva do cristalino até o surgimento de catarata. Embora esta seja uma doença bem conhecida, o mecanismo de agregação das proteínas WS no cristalino não é bem compreendido. Uma das causas reconhecidas de modificação de proteínas está relacionada à exposição à luz UV (ultravioleta). Por esta razão, o grupo de pesquisa liderado por Claudia Honisch (Institute of Biomolecular Chemistry, Padova, Itália) decidiu avaliar as propriedades espectroscópicas das proteínas WS e a sua estabilidade frente à irradiação UV por espectroscopia de dicroísmo circular. Para tanto, proteínas WS de origem animal foram utilizadas para a medição do espectro far-UV de dicroísmo circular antes (linha preta) e após (linha vermelha) exposição à luz UV-C (254 nm, nanômetros) durante 45 minutos, conforme figura abaixo.


Imagem associada para resolução da questão


Legenda: Espectro de dicroísmo circular (far-UV) de proteínas WS isoladas do cristalino de porcos antes (preto) e após (vermelho) exposição à luz UV-C. Proteínas WS foram diluídas à concentração de 0,09 mg/mL em 10 mM tampão fosfato, pH 7,2. Espectro adquirido em equipamento Jasco J-1500. Condições do experimento: resposta de 1 s, data pitch de 0,5 nm, largura de banda (bandwidth) de 1,0 nm, e cubeta com caminho ótico de 0,1 cm (200 μL). Adaptado de Honisch et al. Application of Circular Dichroism and Fluorescence Spectroscopies To Assess Photostability of Water-Soluble Porcine Lens Proteins. ACS Omega. 2020. 5 (8), 4293-4301. DOI: 10.1021/acsomega.9b04234.
Com base nos dados obtidos por Dr. Honisch, é correto afirmar que:
Alternativas
Q3331253 Técnicas em Laboratório
A técnica de espectroscopia de dicroísmo circular (do inglês circular dichroism – CD) é um método rápido para avaliar a estrutura secundária, o enovelamento e as propriedades de interação de uma biomolécula. Sobre esta técnica, é INCORRETO afirmar que:
Alternativas
Q3331254 Técnicas em Laboratório
Diferentes tipos de biosensores têm sido desenvolvidos para o estudo de interações entre macromoléculas biológicas. Experimentos de interação em superfícies ,tipicamente, envolvem a imobilização de uma molécula (ligante) em uma superfície e o monitoramento da interação dessa com uma segunda molécula (analito) em solução. Neste sentido, o aumento da concentração do analito na superfície do biosensor leva à mudança do índice de refração próximo à superfície. Dois principais tipos de instrumentos foram desenvolvidos para medir essa mudança com alta sensibilidade: interferômetros e equipamentos de ressonância plasmônica de superfície (do inglês surface plasmon resonance – SPR). Sobre este último, é correto afirmar que:
Alternativas
Q3331257 Técnicas em Laboratório
As figuras abaixo, (adaptadas de Jerabek-Willemsen et. al., J. Mol. Struct. 1077: 101-113, 2014), representam as etapas de um ensaio de termoforese em microescala (Figura A) e a curva dose-resposta como resultado do experimento (Figura B).

Imagem associada para resolução da questão
Imagem associada para resolução da questão



Baseado nas figuras acima apresentadas, é INCORRETO afirmar que:
Alternativas
Q3331262 Técnicas em Laboratório
A espectroscopia de fluorescência em estado estacionário permite o monitoramento do espectro de emissão de proteínas em função do tempo, o qual pode revelar mudanças de intensidade de fluorescência. Tal técnica é útil para o estudo de mudanças conformacionais ou da cinética de ligação. A intensidade de fluorescência (I) está relacionada à concentração do fluoróforo (C) e à absortividade molar (ε), pela equação I = ε.C.L, conforme descrito pela lei de Lambert-Beer. Já o brilho de emissão (B) é dado por B = Ф.ε, onde Ф é o rendimento quântico. Entre as afirmativas abaixo é INCORRETO afirmar que:
Alternativas
Respostas
1: D
2: D
3: B
4: E
5: A
6: E
7: C
8: A
9: B
10: B
11: D
12: E
13: D
14: A
15: A
16: A
17: D
18: D
19: C
20: A