Questões de Concurso Público FIOCRUZ 2010 para Tecnologista em Saúde - Micobactérias

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Q568565 Biomedicina - Análises Clínicas
A técnica de citometria de fluxo vem sendo aplicada na avaliação da susceptibilidade a antimicrobianos em micobactérias com resultados mais rápidos do que métodos tradicionais. Sobre o tema, analise as afirmativas a seguir.

I. Determinação da concentração mínima inibitória de antimicrobianos para cepas clínicas de Mycobacterium tuberculosis em até 24h.

II. Detecção da susceptibilidade ou da resistência a antimicrobianos de cepas clínicas Mycobacterium tuberculosis sem a multiplicação do microrganismo.

III. Determinação da concentração mínima inibitória de antimicrobianos para patógenos localizadas no interior de células fagocíticas.

Assinale: 

Alternativas
Q568566 Biomedicina - Análises Clínicas
De maneira semelhante ao ocorrido recentemente com outros grupos bacterianos, o número de espécies novas descritas para as micobactérias de crescimento rápido (MCR) tem aumentado significativamente nas últimas décadas, dificultando uma classificação confiável em laboratórios de rotina. Em alguns casos, as novas espécies foram propostas com base um único isolamento ou em um número pequeno de cepas isoladas. Sobre os aspectos taxonômicos recentes de MCRs, analise as afirmativas a seguir.

I. Os estudos taxonômicos envolvendo a filogenia entre membros de MCR têm sido baseados na análise de sequências dos genes 16S rRNA, 23S rRNA, hsp65 e aquele codificante para RNA polimerase.

II. A técnica de hibridização DNA-DNA consiste na metodologia de maior acurácia na determinação de espécies de MCRs, apesar de ser laboriosa e atualmente realizada em centros de referência internacionais, justificando a busca de alternativas por diferentes laboratórios de pesquisa.

III. Os complexos taxonômicos descritos para MCRs consistem em (i) Grupo M. fortuitum, composto por M. fortuitum, M. peregrinum, M. mucogenicum e M. senegalense; (ii) Grupo M. chelonae-M. abscessus, composto pelas espécies M. chelonae, M. abscessus, M. bolletii, M. massiliense e M. immunogenum; e (iii) Grupo M. smegmatis, constituído por M. smegmatis, M. goodii e M. wolinskyi.

Assinale: 


Alternativas
Q568567 Biomedicina - Análises Clínicas
O teste da catalase consiste em um dos métodos freqüentemente utilizados para a identificação de micobactérias. A enzima consiste em uma enzima solúvel intracelular capaz de degradar peróxido de hidrogênio em água e oxigênio. Dois testes são possíveis para a detecção da atividade de catalase em micobactérias. Considerando os princípios da técnica, analise as afirmativas a seguir.

I. O teste semi-quantitativo da catalase classifica as micobactérias em dois grupos: produtores de catalase em baixos níveis e produtores de catalase em altos níveis, baseados na altura da coluna de bolhas de gás oxigênio formada após cinco minutos da adição do reagente em temperatura ambiente.

II. A maioria das micobactérias produz catalase em quantidade detectável, exceto cepas de M. tuberculosis, resistente a isoniazida, e M. bovis.

III. O complexo M. tuberculosis pode ser separado das demais micobactérias por apresentar catalase inativada pela temperatura acima de 68°C.

Assinale: 

Alternativas
Q568568 Biomedicina - Análises Clínicas
Vários sistemas foram descritos para identificação genotípica de cepas micobacterianas isoladas de espécimes clínicos, incluindo as diferentes espécies do complexo M. tuberculosis. Sobre os princípios e as aplicações dos sistemas para a identificação de micobactérias, analise as afirmativas a seguir.

I. As técnicas baseadas apenas em reação de polimerização em cadeia com iniciadores específicos para as deleções genômicas RD de M. tuberculosis como RD1, RD4, RD9, RD12, discriminam as espécies M. tuberculosis e M. bovis (incluindo a espécie M. bovis BCG) bem como outras espécies do complexo.

II. Espécies do complexo M. tuberculosis podem ser diferenciadas pelo teste AccuProbe (GenProbe Inc., San Diego, California, EUA), que consiste em sondas marcadas com éster de acridina. Esse mesmo sistema pode também ser aplicado na identificação de cepas do complexo M. avium e M. kansasii.

III. Os sistemas INNO-LiPA Mycobacteria version 2 (Innogenetics, Ghent, Bélgica) GenoType Mycobacteria (Hain Lifescience, Nehren, Alemanha) consistem em hibridização reversa de produtos de reação de polimerização em cadeia biotinilados aos seus fragmentos complementares presentes em “tiras" de membrana. Ambos permitem a identificação molecular de acima de 10 espécies de micobactérias. Uma desvantagem do sistema é a impossibilidade de uso em cepas cultivadas em meios líquidos.

Assinale:

Alternativas
Q568569 Biomedicina - Análises Clínicas
Cepas de micobactérias foram isoladas a partir de dois escarros espontâneos, obtidos em dias consecutivos, de paciente sintomático respiratório, com histórico de tuberculose pulmonar anterior. As cepas foram semeadas emmeio Löwestein-Jensen contendo piruvato. Posteriormente,após confirmação da pureza e coloração de Ziehl-Neelsen, apartir do crescimento, testes fenotípicos convencionais foramrealizados com resultados idênticos entre as cepas edescritos a seguir.

Crescimento ótimo a 25 e 35°C, teste de niacina negativo,produção de arilsulfatase após 3 e 15 dias e de urease,redução positiva de nitrato, produção de pigmentação, após exposição à luz, ausência de crescimento em ágar nutriente,em meio de Sauton contendo ácido pícrico, ou em meiocontendo NaCl a 5%, ausência de produção de β-galactosidase, e redução negativa do telurito.

Sobre a espécie correspondente à descrição fenotípicaacima, assine a alternativa correta. 

Alternativas
Q568570 Biomedicina - Análises Clínicas
Em 1993, Telenti e colaboradores propuseram um método para identificação molecular rápida de micobactérias com a restrição por endonucleases de uma sequência parcial do gene hsp65, seguida da análise do polimorfismo dos fragmentos resultantes, denominada PRA-hsp65. Considerando conceitos e aspectos técnicos da metodologia citada, assinale a alternativa incorreta.
Alternativas
Q568571 Biomedicina - Análises Clínicas
Devido ao crescimento lento de algumas micobactérias, metodologias moleculares rápidas com sequenciamento de genes consistem em procedimentos adequados de aplicação em laboratórios de referência e de rotina visando a identificação de micobactérias. Sobre a aplicabilidade da técnica para a identificação de micobactérias, analise as afirmativas a seguir.

 I. Os pares M. kansasii e M. gastri, M. ulcerans e M. marinum, M. shimoidei e M. triviale, e M. abscessus e M. chelonae não podem ser diferenciados por sequências do gene rrs.

II. Em cepas cultivadas em meio sólido, a extração de DNA e a reação de polimerização em cadeia, para posterior sequenciamento gênico, apresentam resultados reprodutíveis e de precisão superior àqueles realizados a partir de cepas cultivadas em meio líquido. 

III. Para a identificação de espécies de micobactérias não tuberculosas de crescimento rápido, os alvos incluem os genes dnaJ, hsp65, gyrB, 16S rDNA, secA1, sod ou a sequência ITS 16S-23S.

Assinale: 


Alternativas
Q568572 Biomedicina - Análises Clínicas
Bownds e colaboradores (1996) realizaram um dos estudos pioneiros sobre o uso da citometria de fluxo em testes de susceptibilidade a antimicrobianos. Tais pesquisadores usaram a cepa Mycobacterium fortuitum ATCC 14467 e o corante diacetato de fluoresceína (FDA) nos ensaios com antimicrobianos para determinar a concentração mínima inibitória. Na primeira parte do ensaio, os autores avaliaram o padrão de interação do corante com a cepa micobacteriana (viável ou inativada pelo calor) e com o meio de cultura, o qual poderia levar à interpretação errônea dos resultados quanto à fluorescência. Após a incubação, um volume de 10ml de FDA (10 mg/ml; Sigma) foi adicionado às soluções de meio de cultura com células cultivadas por sete dias a 37°C de M. fortuitum ou ao controle negativo de forma a obter uma concentração final de 100 ng/ml. 

As suspensões foram incubadas a 37°C por 30 min e analisadas a 488nm com FACScam flow cytometer (Becton Dickinson Immunocytometry Systems) utilizando FAC Scan Lysys II software para a acquisição de dados e análise. Os gráficos resultantes estão na figura abaixo. 

Imagem associada para resolução da questão

Legenda da Figura: Os números nos eixos y e x de cada painel são 100 , 101 , 102 , 103 e 104 , respectivamente.

Usando seus conhecimentos de citometria de fluxo e micobacteriologia laboratorial, assinale a alternativa correta. 


Alternativas
Q568573 Biomedicina - Análises Clínicas
As micobactérias consistem em bacilos álcool-ácidos resistentes (BAAR) por resistirem à descoloração com etanol acidificado pela metodologia tradicionalmente denominada baciloscopia.

Sobre os detalhes técnicos para a metodologia citada quando aplicada para espécime clínico do tipo escarro espontâneo e de forma direta, analise as seguintes afirmativas.

I. O número mínimo de BAAR necessário para produzir um esfregaço com resultado positivo é estimado entre 100 a 1000 por mililitro (probabilidade de 50% de resultado positivo).

II. A Secretaria de Vigilância em Saúde do Ministério da Saúde recomenda, para o preparo do esfregaço, o uso de Bico de Bunsen ou Cabine de Segurança Biológica, de luvas e de outros Equipamentos de Proteção Individual, em área exclusiva apropriada, sem circulação de pessoas, sem correntes de ar, e com exaustor contendo renovação do ar (seis a 10 renovações por hora).

III. A técnica mundialmente utilizada consiste na coloração do esfregaço pelo método de Ziehl-Neelsen sob metodologia padronizada e observação em microscopia de campo claro com uso de óleo mineral e aumento total de 100X.

Assinale:

Alternativas
Q568574 Biomedicina - Análises Clínicas
A análise de ácidos micólicos é recomendada como um dos critérios mínimos para a descrição de novas espécies de micobactérias. Esses compostos consistem em ácidos graxos beta-hidroxi alfa substituídos com massa molecular elevada presentes na parede celular de micobactérias. Sobre a ordem correta dos procedimentos para extração de ácidos micólicos de micobactérias, assinale a alternativa correta.
Alternativas
Q568575 Biomedicina - Análises Clínicas
A baciloscopia é uma metodologia rápida, de baixo custo, útil no diagnóstico da tuberculose pulmonar. Em escarro espontâneo de pacientes sintomáticos respiratórios, o valor preditivo positivo para M. tuberculosis está geralmente acima de 90%.

No diagnóstico bacteriológico, as micobactérias são Grampositivas fracas, sendo então submetidas a procedimentos que permitem a detecção de sua resistência a álcool-ácido. Essa propriedade, presente em outros gêneros bacterianos, pode levar ao diagnósitico impreciso, devendo ser confirmado por cultura e por identificação definitiva.

Considerando os princípios da baciloscopia, assinale a alternativa incorreta

Alternativas
Q568576 Biomedicina - Análises Clínicas
Considerando os resultados em testes fenotípicos convencionais utilizados na identificação de micobactérias, indique a alternativa incorreta. 
Alternativas
Q568577 Biomedicina - Análises Clínicas
O paciente P.H.S., 45 anos, masculino, procedente de Duque de Caxias - RJ, apresenta perda ponderal há 6 meses, febre vespertina de baixa intensidade e tosse produtiva há 20 dias. Refere também “fraqueza e falta de fôlego". Há uma semana, apresenta tosse com expectoração moderada, acompanhada de sangue. É fumante e etilista moderados. Nega outras alterações. Foi atendido pelo serviço ambulatorial perto de sua residência sendo colhidas 2 amostras de escarro espontâneo para baciloscopia pelo método de Ziehl-Neelsen em dias consecutivos (dia 04.01.2010 no momento da consulta e no dia 05.01.2010 ao acordar).

Imagem associada para resolução da questão

Com base nos achados ilustrados acima, sobre as interpretações finais dos exames baciloscópicos dos escarros do paciente, assinale a alternativa correta. 


Alternativas
Q568578 Biomedicina - Análises Clínicas
Segundo as recomendações da Secretaria de Vigilância em Saúde do Ministério da Saúde, após a detecção de bacilos álcool-ácido resistentes em cultura, métodos fenotípicos convencionais devem ser empregados seguindo um algoritmo específico para identificação presuntiva de micobactérias. Sobre os procedimentos recomendados, assinale a alternativa correta.
Alternativas
Q568579 Biomedicina - Análises Clínicas
A baciloscopia é o exame básico para o diagnóstico da tuberculose, em particular das formas pulmonares. A técnica é utilizada para acompanhar a eficácia do tratamento pela redução bacilar e negativação do escarro. O método consiste em um exame importante no programa de controle da tuberculose na busca e na detecção de casos bacilíferos. Sobre os fatores que influenciam a sensibilidade da baciloscopia da tuberculose, indique a alternativa incorreta.
Alternativas
Q568580 Biomedicina - Análises Clínicas
Considerando as recentes orientações indicadas pela Secretaria de Vigilância em Saúde do Ministério da Saúde para a identificação convencional de micobactérias, analiseas afirmativas abaixo.

I. As principais espécies de micobactérias de crescimento rápido podem ser diferenciadas com os testes de produção de pigmentação, de crescimento em Löwestein-Jensen contendo ácido p-nitrobenzóico, de inibição do crescimento em meio de Sauton contendo ácido pícrico, em ágar nutriente, em meio com NaCl a5%, produção de pirazinamidase, de produção de arilsulfatase (3 e 15 dias), hidrólise de Tween 80, de produção de β-galactosidase, de redução do telurito de potássio, de redução de nitrato, de produção de urease,de crescimento a 25°C e de crescimento a 45°C. 

II. O método PRA-hsp65 é baseado em metodologia molecular e deve ser combinado com avaliação das cepas de micobactérias por testes fenotípicos tais como os de morfologias macro- e microscópica da cultura micobacteriana, de pigmentação fotorreativa, de inibição do crescimento em meio contento ácido p-nitrobenzóico, de inibição do crescimento em meio contendo NaCl a 5%, de avaliação das temperaturas de crescimento, de crescimento em ágar nutriente, e teste de inibição do crescimento em meio de Sauton contendo ácido pícrico. 

III. As espécies do complexo M. tuberculosis exibem alta similaridade fenotípica e não são distinguíveis pelos testes fenotípicos disponíveis.

Assinale: 


Alternativas
Q568581 Biomedicina - Análises Clínicas
Os ácidos micólicos presentes na parede celular de micobactérias são dispostos de maneira a formar uma membrana externa com alta hidrofobicidade, garantindo a esses microrganismos a resistência a diversos antimicrobianos e a álcool-ácido resistência. Com base na estrutura molecular desses compostos, os ácidos micólicos apresentam uma variação entre:
Alternativas
Q568582 Biomedicina - Análises Clínicas
A cromatografia líquida de alta pressão (HPLC) dos ésteres de ácido micólicos demonstrou rapidez e acurácia na identificação de várias espécies de Mycobacterium. Sobre os princípios padronizados e o conhecimento prévio da técnica, analise as afirmativas a seguir.

I. As espécies M. tuberculosis e M. bovis apresentam padrões indistinguíveis.

II. No processo de análise por HPLC, os ésteres de ácidos micólicos são separados em coluna de fase reversa através de gradiente, e detectados por espectrometria UV.

III. Um extrato preparado a partir de cultura com M. fortuitum ATCC 6841 é recomendado para utilização como controle positivo e serve como padrão de referência para nomeação de picos obtidos na análise por espectrometria.

Assinale: 

Alternativas
Q568585 Biomedicina - Análises Clínicas
A baciloscopia corresponde atualmente a um método rápido e de baixo custo para o diagnóstico de tuberculose. Apesar da baixa sensibilidade, o método baseado na coloração de Ziehl-Neelsen apresenta valor preditivo negativo acima de 90%. Considerando os conceitos da baciloscopia no diagnóstico de infecções por micobactérias, assinale a alternativa incorreta.
Alternativas
Q568587 Biomedicina - Análises Clínicas
Dentre micobactérias escotocromógenas, assinale a espécie que não pertence ao grupo. 

Alternativas
Respostas
21: E
22: E
23: E
24: A
25: A
26: D
27: B
28: B
29: C
30: D
31: E
32: D
33: B
34: B
35: B
36: E
37: A
38: D
39: E
40: B