Os ensaios moleculares aplicados ao diagnóstico precoce de doenças infecciosas facilitam o tratamento e permitem a individualização de terapias. Entre essas tecnologias, a reação em cadeia da polimerase, do inglês “Polymerase Chain Reaction” (PCR), detecta infecções, quantifica carga viral, além de avaliar a progressão de doenças. Nesse contexto, o vírus HIV pode ser detectado pela técnica PCR, desde que sua amplificação seja proveniente de moldes de :

Analise as seguintes afirmativas sobre a composição e arquitetura das proteínas, e assinale a alternativa INCORRETA.

Sobre os métodos de separação e caracterização de proteínas, assinale a alternativa INCORRETA. 

                                   

Legenda:

A – cromatograma da amostra suspeita

B – cromatograma de ponto de 50 mg/L de MHS–2.238 da curva de calibração

P.I. – padrão interno

Observação: a área dos picos está expressa ao lado de cada um.

Os cromatogramas contidos na figura representam a eluição de uma droga sintética hipotética, aqui denominada MHS-2.238, e um padrão interno compatível. O cromatograma A é de uma amostra apreendida com traficantes, e o cromatograma B é referente ao padrão cromatográfico da substância MHS-2.238, na concentração de 50 mg/L. Considere que o método seja linear entre 1 e 5.000 mg/L e que este ponto seja representativo do restante da curva. Além disso, considere as condições cromatográficas a seguir: cromatógrafo líquido de alta eficiência (CLAE – HPLC) com detector de UV (ajustado em 254 nm); coluna C18 (fase reversa); e fluxo isocrático de fase móvel composta por metanol:água (65:35). Com base nessas informações e na figura, assinale a alternativa correta.

A Biologia Molecular compreende o estudo da química de ácidos nucléicos e de proteínas, especialmente em relação aos mecanismos de expressão e manipulação gênica. Nas últimas duas décadas, verificamos expressivos avanços nesta área, permitindo um grande salto qualitativo no conhecimento humano, com consequências revolucionárias para a Sociedade. Efetivamente, conseguimos hoje, acrescentar, eliminar, organizar, inserir, selecionar e juntar material genético de diferentes origens, ultrapassando as fronteiras da Biologia, criando novos (micro)organismos, selecionando e maximizando suas funções. A área não envolve apenas questões de natureza técnica, mas também aquelas ligadas à parte legal, à segurança e à ética. Com base nestas declarações, analise as afirmativas a seguir.

I. A primeira vacina recombinante para uso humano foi produzida por meio da clonagem do gene que codifica a síntese de uma proteína de superfície do vírus da hepatite B em levedura.

II. O tratamento padrão para a diabete é baseado na injeção, ou administração oral, periódica de insulina. Devido à similaridade em estrutura deste hormônio, produzido pela maioria dos animais, é possível tratar a diabete humana com insulinas isoladas de pâncreas de suínos ou bovinos. No entanto, estas não são tão efetivas quanto a insulina humana e, adicionalmente, o processo de extração de insulina destes animais é caro e complexo. A clonagem genética para expressão da síntese de insulina humana em bactéria é outro exemplo de sucesso do emprego das técnicas da Biologia molecular na produção de medicamentos.

III. As principais áreas para o melhoramento genético de plantas incluem: resistência a herbicidas, a insetos e a doenças provocadas por microrganismos endofíticos, encontrando-se no mercado internacional, produtos com estas características. Um aspecto negativo que precisa ser contornado, com pesquisa e desenvolvimento, é que todas as plantas transgênicas perdem a capacidade de germinação, devido à deleção dos genes responsáveis por este processo, com a introdução do gene exógeno.

Assinale:

Os marcadores moleculares incluem:

I. isoenzimas que permitem a identificação ou a diferenciação de organismos.

II. sequências de DNA codificadoras de enzimas-repórter, facilitando a avaliação da eficiência de transformação ou da função de sequências reguladoras de DNA.

III. genes capazes de conferir resistência a antibióticos.

Assinale: 

A função de um vetor na engenharia genética do DNA recombinante é:

No operon lac durante o controle da expressão genética em procariotas, se a lactose estiver presente, acontece:

Na atualidade os principais sistemas de expressão de proteínas recombinantes são: bactérias (E. coli), leveduras e fungos, células de insetos, células vegetais e células de mamíferos. Entretanto, o processamento dos oligossacarídeos por esses diferentes tipos de células gera uma heterogeneidade de formas estruturais pela adição de glicanos à cadeia polipeptídica (modificações pós-traducionais), que deve ser monitorada em um bioprocesso desenvolvido para a produção de um biofármaco. Entre as estruturas de N-glicanos típicos predominantes nesses tipos de células, as células vegetais apresentam uma estrutura:

Assinale abaixo o item que não está relacionado à formulação de vacinas e de biofármacos.

Na formulação, quando possível, os imunobiológicos devem ser submetidos à esterilização a vapor em seus recipientes finais. Não sendo possível a realização deste procedimento, devido às características da formulação do produto, os seguintes métodos podem ser usados:

Considere como uma das etapas para formulação de vacina o fracionamento de polissacarídeo. Considerando a necessidade de se obter um produto com concentração final de 0,5% a partir de um produto concentrado com concentração de 50 % você deveria:

Durante o preparo de tanques e garrafões para formulação de vacinas precisamos nos assegurar do correto posicionamento dos sifões e seu perfeito acoplamento a fim de evitar vazamentos. Assinale abaixo a alternativa correta para montagem destes utensílios para uso em classe grau B.

Durante o processamento final de imunobiológico as áreas são monitoradas para comprovar sua qualidade durante o processo. Sobre o tema, assinale a afirmativa correta.

Com relação ao Controle Estatístico de Processo (CEP), assinale a alternativa incorreta.

Tipicamente, um processo de purificação de uma proteína é composto por múltiplas etapas. O tempo de processamento, os grandes volumes e os custos elevados são fatores limitantes para a produção industrial de proteínas terapêuticas. Analise as afirmativas a seguir.

I. No leito expandido, após o equilíbrio da fase estacionária (resina/adsorvente) com tampão a amostra é aplicada de cima para baixo.

II. O Sistema de leito expandido permite a adsorção de amostras contendo materiais particulados e/ou células, oriundas seja do plasma sangüíneo, de cultivos de cultura de células, de cultura de microrganismos, extratos de tecidos ou mesmo de células rompidas.

III. O tempo para que uma proteína alvo seja adsorvida pelo sistema de leito expandido, depende do fluxo de aplicação da amostra, bem como da quantidade de resina que foi utilizada para se fazer a expansão (tempo de retenção).

Assinale:

Na fabricação de um ingrediente farmacêutico ativo (IFA), a partir de células procarióticas, são utilizados os seguintes equipamentos e sistemas, dentre outros, nas suas várias etapas do processo: agitador orbital de frascos, fermentador de 500 litros, centrífuga industrial, colunas cromatográficas, sistemas de filtração tangencial e sistemas de filtração esterilizante. Essa produção é certificada de acordo com as norma da ANVISA. Em relação aos ambientes em que esses equipamentos e sistemas operam podemos afirmar que:

I. o preparo do inóculo e a fermentação ocorrem em área com pressão negativa classe grau B e as etapas cromatográficas ocorrem em áreas com pressões positivas também classe grau B.

II. os sistemas de filtração esterilizante são operados em módulo de fluxo laminar localizado em sala com pressão positiva e classe grau B.

III. todas as etapas de obtenção do IFA estéril podem ser realizadas em área classe grau C.

Assinale:

Em relação às vacinas polissacarídicas, as vacinas denominadas conjugadas apresentam as seguintes características como principais vantagens:
I. Memória imunológica prolongada com maturação da afinidade de resposta.
II. Oferecem imunidade para crianças menores de 18 meses.
III. São caracterizadas por um tipo de resposta T independente.
Assinale:

Assinale a alternativa que representa exemplo(s) de vacina(s) bacteriana(s) existente(s) no mercado classificada(s) como conjugada(s).

A respeito do controle do processo de cultivo em biorreatores, assinale a afirmativa incorreta.