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Q1245977 Técnicas em Laboratório
O ELISA, ensaio de imunoabsorção enzimática, pode ser realizado com inúmeras modificações do procedimento básico. A etapa principal do processo é fixar o antígeno, que pode ser realizado por adsorção direta ou indireta por meio de um anticorpo de captura. O antígeno pode ser detectado, também, diretamente, pelo anticorpo primário, ou indiretamente, pelo anticorpo secundário, de acordo com o tipo de ensaio ELISA realizado. Nesse tipo de ELISA, primeiramente são ligados ao fundo da placa de teste os anticorpos de captura, impedindo que haja outros pontos de ligação fortes para o antígeno. A seguir, é adicionada a amostra de interesse, e caso exista o antígeno específico procurado, este se liga aos anticorpos de captura. Em seguida é feita uma lavagem para a retirada de antígenos que não se ligaram aos anticorpos de captura. Posteriormente, são adicionados à amostra os anticorpos conjugados à enzima, que farão o reconhecimento da presença do antígeno. A seguir é feita uma segunda lavagem para a retirada dos anticorpos conjugados que não se ligaram à amostra; e, por fim, é adicionado o substrato que reage com a enzima, que promove a mudança de cor ou fluorescência. Esse tipo de ELISA é chamado de ELISA:
Alternativas

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Vamos explorar o tema central da questão: o ELISA (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay), um método amplamente utilizado em técnicas de laboratório para detecção e quantificação de proteínas e antígenos específicos. Compreender as diferentes variações desse ensaio é essencial para responder a questões sobre imunologia em concursos públicos.

O ELISA pode ser realizado de diversas maneiras, incluindo os formatos direto, indireto, sanduíche e por competição. Cada formato tem um protocolo específico que aproveita interações antígeno-anticorpo para alcançar detecção precisa.

No enunciado da questão, o formato descrito é o ELISA sanduíche. Neste método, os anticorpos de captura são fixados à placa de teste inicialmente. O antígeno de interesse da amostra se liga a esses anticorpos de captura. Após lavagens para remover antígenos não ligados, adiciona-se um anticorpo conjugado a uma enzima que reconhece e se liga ao antígeno já preso, formando um "sanduíche".

Com base na explicação acima, a alternativa correta é a A - sanduíche, pois corresponde ao procedimento descrito no enunciado.

Vamos analisar as alternativas incorretas:

  • B - indireto: Nesse método, o antígeno é adsorvido diretamente à placa e o anticorpo primário é adicionado para reconhecimento, seguido por um anticorpo secundário conjugado a enzima. Não se encaixa na descrição do enunciado.
  • C - direto: Neste formato, o antígeno é diretamente adsorvido à placa, e um anticorpo conjugado a enzima é usado para detecção, sem a camada de captura mencionada.
  • D - básico: Não é um termo específico para um tipo de ELISA e não está alinhado com os formatos tradicionais conhecidos.
  • E - por competição: Neste tipo, a amostra compete com um antígeno conhecido por um número limitado de sítios de ligação de anticorpos. Este método não se ajusta à sequência descrita no enunciado.

Para resolver questões como esta, é importante entender as etapas de cada tipo de ELISA, identificando palavras-chave no enunciado que indiquem o formato específico utilizado.

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ELISA de captura, também conhecido como ELISA sanduíche. Baseia-se no uso de anticorpos específicos, fixados na fase sólida, seguida da adição da amostra em que se deseja pesquisar o antígeno e adição de anticorpos especifico conjugado com enzima.

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