Uma molécula que absorve luz em comprimento de onda de 480 nm estará absorvendo no espectro de luz ultravioleta.

A maior sensibilidade da medida da absorbância ocorre quando a molécula que se deseja quantificar apresenta a máxima absorção.

Se a radiação incidente de luz visível atinge uma solução, parte desta luz será absorvida pelas moléculas contidas na solução. Entretanto, o mesmo não ocorre se a radiação incidente for luz ultravioleta.

A leitura da amostra denominada como “branco” consiste de todos os componentes de uma reação contida na cubeta, exceto o analito em questão. A leitura do “branco” deve ser realizada apenas quando a quantificação ocorre em comprimentos de luz visível.

Caso a amostra em análise no espectrofotômetro estiver muito diluída, certamente serão obtidos valores muito maiores que 0,99.