Em relação às vantagens da técnica de espectrometria de massas de alta resolução em relação à espectrometria de massas com analisadores do tipo triplo quadrupolo, é INCORRETO afirmar que:

O objetivo de um método bioanalítico quantitativo é fornecer uma determinação exata, precisa e confiável da quantidade de um analito alvo, geralmente um fármaco, um metabólito ou um biomarcador em amostras biológicas complexas, tais como fluidos ou tecidos. A seletividade de um sistema de detecção triplo quadrupolo no modo de aquisição de monitoramento de reações múltiplas (MRM) é elevada e, em muitos casos, a separação de diferentes analitos por cromatografia a líquido não precisa ser efetuada com o mesmo rigor exigido por outros sistemas de detecção. A separação cromatográfica é realmente necessária na espectrometria de massas sequencial com analisador do tipo triplo quadrupolo no modo de aquisição MRM:
I – para aumentar a sensibilidade, exatidão e precisão do método analítico quantitativo, como resultado da separação eficiente dos analitos alvo de impurezas e outros componentes da matriz complexa, que mesmo não sendo detectados no modo MRM podem competir pela ionização e alterar o sinal obtido.
II – a fim de possibilitar a análise de isóbaros, substâncias quirais e substâncias que podem interferir pela contribuição de isótopos M+1 ou M+2, onde M é a massa monoisotópica.
III – sempre que for preciso analisar mais de uma substância simultaneamente.
Dos itens acima, somente:

No Brasil, o Programa Nacional de Controle da Tuberculose (PNCT) é responsável, entre outras ações, por estabelecer as diretrizes para o controle da doença, que tem tratamento padronizado, exclusivamente oferecido pelo Sistema Único de Saúde. A apresentação farmacológica dos medicamentos atualmente em uso para o esquema básico de tratamento em adultos e adolescentes na fase intensiva é de comprimidos em doses fixas combinadas com a apresentação tipo 4 em 1 (rifampicina-RIF, isoniazida-INH, pirazinamida-PZA e etambutol-EMB). Para INH, o principal metabólito ativo é o acetil-INH (AC-INH). Como a terapia combinada com múltiplos fármacos é necessária, um método analítico para monitorar simultaneamente as substâncias em plasma humano também é fundamental, porém alguns métodos publicados, baseados na cromatografia a líquido acoplada à espectrometria de massas sequencial apresentam desvantagens, tais como longo tempo de separação cromatográfica, baixa retenção da INH e separação parcial de AC-INH e INH em colunas de fase reversa. Xing et al (2021) desenvolveram um método de cromatografia a líquido de ultra eficiência acoplada à espectrometria de massas triplo quadrupolo para quantificar simultaneamente RIF, INH, PZA, EMB e o metabólito ACINH em plasma humano. Após precipitação do plasma com acetonitrila e centrifugação, uma alíquota do sobrenadante foi submetida a uma reação de derivatização com cinamaldeído (CA) e diluída com um diluente contendo 20 % de acetonitrila, 0,1 % de ácido fórmico e 2 % de ácido heptafluorobutírico (HFBA). Observe a figura abaixo:



Cromatogramas de INH, AC-INH, CA-INH, e EMB com ou sem adição de CA e HFBA. (A) sem CA e sem HFBA; (B) sem CA e com HFBA; (C) com CA e sem HFBA; (D) com CA e com HFBA. INH = isoniazida; AC-INH = acetil isoniazida; CA-INH = produto de derivatização da isoniazida com cinamaldeído; EMB = etambutol; CA = cinamaldeído; HFBA = ácido heptafluorobutírico. Os picos de cada analito estão destacados por asteriscos (*). Separação cromatográfica realizada em coluna Acquity UPLC HSS T3 1,8 μm (2,1 x 100 mm, Waters). Fonte: Xing et al. Heliyon 2021;7:e07532.
Com base na figura apresentada, pode-se afirmar que:
I – o produto de derivatização CA-INH formado pela reação entre a isoniazida (INH) e o cinamaldeído (CA) possui maior hidrofobicidade que a INH e apresenta maior intensidade de sinal.
II – a adição do reagente de pareamento iônico HFBA à solução diluída da amostra aumentou significativamente a retenção do etambutol (EMB).
III – o analito etambutol (EMB) é menos polar que o produto de derivatização CA-INH.
Dos itens acima, somente:

Sobre o modelo 3R, temos que: recentemente foram adicionados 2 Rs que, apesar de não constarem, devem ser considerados. Trata-se de Respeito e Relevância. É correto afirmar que ambos estão descritos corretamente em:

Ensaios de citotoxicidade podem ser realizados diretamente por contagem de células viáveis ou através de 3-(4,5-dimetil-2-tiazol)-2,5 dienil-2H-brometo de tetrazolium (MTT). Para este último, o aparecimento de cor púrpura em cada grupo de células indica que:

A norma ISO 17025:2017 especifica os requisitos gerais para a competência, imparcialidade e operação consistente de laboratórios. Nesta norma se incluem requisitos sobre os sistemas de gestão de informação laboratorial. Deste modo, está INCORRETO afirmar que:

De acordo com a norma ISO 17025:2017, em relação ao uso de produtos e serviços providos externamente para um laboratório clínico, avalie se são verdadeiras (V) ou falsas (F) as afirmativas a seguir:

I. Os produtos e serviços devem ser empregados quando destinados à incorporação nas atividades do próprio laboratório.

II. Os produtos e serviços devem ser fornecidos, em parte ou por completo, diretamente ao cliente pelo laboratório, conforme recebidos do provedor externo.

III. Os produtos e serviços devem ser utilizados para apoiar a operação do laboratório.


As afirmativas I, II e III são respectivamente:

Os testes imunoenzimáticos são ferramentas úteis para detecção de antígenos. Leia abaixo as afirmativas sobre o tema:

I. A fase sólida é sensibilizada com anticorpos específicos.
II. Utilizam-se como conjugado anticorpos específicos marcados com uma enzima.
III. A revelação é feita pela adição do substrato em solução cromógena.


Das afirmativas acima:

A validação de métodos é uma atividade essencial em um laboratório e deve ser realizada quando da utilização de métodos não normalizados, métodos desenvolvidos pelo próprio laboratório ou mesmo métodos normalizados, mas utilizados fora de sua finalidade. Todas as técnicas citadas abaixo para validação são descritas na NBR ISO/ IEC 17025: 2017, EXCETO: 

Nas boas práticas para Laboratórios de Controle de Qualidade, as condições ambientais e a infraestrutura do laboratório devem seguir as instruções da RDC 512 de 2021, ente elas:

Segundo a RDC 512 de 2021 de Boas Práticas para Laboratórios de Controle de Qualidade, os procedimentos analíticos devem seguir instruções específicas, sendo aceitos como métodos analíticos:

O animal de laboratório é um organismo biológico e as condições ambientais e de experimentação podem exercer influências que se refletem na resposta do animal durante a experimentação. Nessa relação animal/condições do biotério, pode-se afirmar que: 

O manejo na criação e manutenção de animais de laboratório com características especiais, como a ausência de vida associada, pode ser realizado através de técnicas direcionadas para esse fim. Com base nas condições sanitárias, é INCORRETO afirmar que:

Entre as regras de biossegurança relacionadas diretamente ao bioterismo, pode-se afirmar que é INCORRETA: 

Os laboratórios que manipulam microrganismos patogênicos ou que possam contê-los, são ambientes de trabalho onde há riscos de se contrair doenças infecciosas. As medidas de biossegurança apropriadas, como citadas abaixo, auxiliam no controle dos mecanismos potenciais de riscos mais comuns da exposição em laboratórios de experimentação animal, EXCETO:

O princípio humanitário de experimentação animal no sentido de diminuir o sofrimento dos mesmos é uma preocupação que já foi levantada desde 1959, por Russel & Burch, quando enunciaram a importância das adoções da regra dos 3R´s no momento da elaboração dos projetos de pesquisas com animais. Os 3R´s se referem aos termos em inglês “ Replacement, Reduction e Refinament”, ou seja, o uso de técnicas e procedimentos alternativos em substituição ao uso dos animais, a redução do número de animais nos experimentos e a utilização de técnicas e procedimentos menos invasivos aliados a outros protocolos para diminuição da dor e sofrimento animal, respectivamente. Assim, em relação à regra dos 3Rs, pode-se afirmar que:

A substituição de testes in vivo por testes in vitro tem sido uma demanda cada vez maior na pesquisa biomédica. Várias vantagens podem ser elencadas a favor dessa substituição, EXCETO:

As enzimas abaixo podem ser empregadas no ELISA conjugadas ao anticorpo ou ao antígeno, EXCETO:

Observe abaixo as etapas principais para padronização de um Imunoensaio ELISA:

I- revestimento da placa de 96 poços (com antígeno ou anticorpo de captura).
II- bloqueio de anticorpos não específicos à placa minimiza resultados falso-positivos (normalmente com adição de albumina sérica bovina [BSA]).
III- detecção /revelação.
IV- leitura final e interpretação da reação.
V- determinação de infectividade de vírus atenuado em vacinas.


De acordo com as afirmativas acima, pode-se dizer que:

Definição e princípio do método imunoenzimático de ELISA:

I- os imunoensaios enzimáticos (ELISA) usam as propriedades catalíticas das enzimas para detectar e quantificar reações imunológicas (antígenos e anticorpos).

II- ELISA se baseia na formação de complexo imune (Ag x Ac) resultado da interação antígeno / anticorpo. O complexo imune interage com um anticorpo conjugado a uma enzima (por exemplo peroxidase).

III- a enzima age no seu substrato (água oxigenada) e catalisa a reação de desdobramento da água oxigenada (H2O2) em H2O mais oxigênio singlete (O2).

IV- o produto de degradação do substrato (O2) oxida o cromógeno por exemplo a tetrametilbenzidina (TMB). O resultado positivo da reação é observado pelo desenvolvimento de cor.

V- no desenvolvimento da técnica de ELISA quantitativo utilizam-se controles negativos (soros reconhecidamente negativos) e soros controles positivos (soros reconhecidamente positivos).


Das afirmativas acima: