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I. O sistema de fluidos é responsável pela condução ordenada de células ou partículas através de um fluxo contínuo, até que elas interceptem os feixes de laser. A ordenação é garantida pelo princípio da focalização isoelétrica, por meio da pressão exercida pelo fluido de condução da amostra até o recipiente de descarte.
II. O sistema ótico é composto por diferentes componentes de excitação (lasers, prismas e lentes) e de coleta (lentes, espelhos, filtros e fotodetectores). Os espelhos dicróicos e os filtros podem ser de três diferentes tipos: curta passagem (short pass), longa passagem (long pass) ou de passagem específica (band pass). Os filtros e espelhos de curta passagem permitem a passagem de luz com comprimento de ondas maiores ou iguais ao comprimento de onda especificado. No entanto, os filtros de longa passagem permitem a passagem de luz com comprimentos de ondas inferiores ou iguais aos especificados.
III. O sistema elétrico é composto de detectores que convertem os sinais luminosos em sinais elétricos gerando pulsos de voltagens. O pulso atinge intensidade máxima quando a partícula ou célula está totalmente inserida no feixe de laser.
Assinale:
I. Receptor celular CD3 revelado com anticorpo marcado com PE.
II. Receptor celular CD8 revelado com anticorpo marcado com FITC.
III. Receptor celular CD45 revelado com anticorpo marcado com PerCP.
IV. Receptor celular CD4 revelado com APC.
Além destes marcadores, você deseja avaliar a expressão do receptor CD25 nestas células. A melhor opção de marcador a ser utilizado é o com emissão de:
I. Deve-se sempre utilizar os equipamentos adequados de proteção individual.
II. O jaleco de trabalho deve permanecer dentro do laboratório.
III. Não comer, não beber, não utilizar cosméticos, não utilizar lentes de contato sem utilização de EPI adequado dentro do laboratório.
Assinale:
I. Para o preparo de meio de cultivo de células eucarióticas, deve-se inicialmente solubilizar os componentes do meio com 80 a 90% do volume final de água destilada e posteriormente adicionar os componentes como bicarbonato e HEPES.
II. Após a esterilização do meio de cultura, deve-se ajustar o pH do mesmo.
III. O soro de origem animal a ser utilizado no meio de cultivo nunca deve ser sido inativado antes de ser adicionado ao meio.
Assinale:
I. Uma vez que na reação de PCR se utiliza uma DNA Polimerase dependente de DNA, somente os vírus cujo genoma é constituído por DNA podem ser detectados pela técnica de PCR.
II. É possível detectar microorganismos diferentes em uma mesma reação de PCR, desde que se utilize na reação pares de iniciadores específicos para cada microorganismo que se queira detectar.
III. A utilização da técnica de PCR para diagnóstico molecular terá sempre e somente caráter qualitativo.
Assinale:
I. Iniciadores degenerados são misturas de oligonucleotídeos apresentando diferenças nos nucleotídeos em várias posições.
II. A inosina é uma base que pareia somente com adenina e timina.
III. Não é possível sintetizar iniciadores degenerados e que, ao mesmo tempo, contenham inosina.
Assinale:
I. Aumento da concentração de deoxinucleotídeo na reação de PCR.
II. Aumento da concentração da DNA polimerase na reação de PCR.
III. Realização de reações de PCR aninhadas (PCR-nested), utilizando par de iniciadores mais externos à região de interesse na primeira reação, seguido da utilização de par de iniciadores mais internos.
Assinale:
I. Pode-se dizer que com este novo teste houve um número de 80 resultados falso-positivos e um resultado falso-negativo.
II. Define-se sensibilidade como a percentagem dos resultados que serão negativos quando o anticorpo testado não estiver presente.
III. Um ensaio pouco sensível significa que haverá a detecção de um grande número de falso-negativos.
Assinale:
I. A única área que deve ser separada fisicamente das demais, no laboratório que realiza diagnóstico molecular por PCR, é a área onde é realizada a extração de ácidos nucléicos a partir das amostras clínicas.
II. O fluxo de trabalho, no laboratório que realiza diagnóstico molecular por PCR, deve ser sempre a partir da área livre de DNA para a área onde os tubos das reações finais de PCR são abertos ou manipulados (área que contem amplicons).
III. Para a pipetagem das misturas de PCR, diluição de oligonucleotídeos, etc, não é necessária a utilização de ponteiras com barreira.
Assinale: