uma das etapas prévias ao sequenciamento baseado no método de Sanger é a clonagem.

no método de Sanger, o sequenciamento de DNA se baseia no uso de modificações de bases específicas e reações de clivagem.

a maioria dos sequenciadores automáticos usam o método Sanger de sequenciamento com fragmentos de DNA marcados radioativamente.

nos sequenciadores automáticos em que os fragmentos de DNA são detectados durante eletroforese, a passagem dos fragmentos é registrada por um laser móvel.

apesar de ser, atualmente, uma técnica rotineira, até meados da década de 1970, apenas sequências de 15-20 pares de base haviam sido sequenciadas.

Em células bacterianas, um gene regulador ajuda a controlar a transcrição do óperon.

Em células bacterianas, o DNA deve desenrolar-se parcialmente das proteínas histona para que possa haver transcrição.

Os genes regulatórios codificam proteínas usadas no metabolismo ou na biossíntese ou que tem papel estrutural na célula.

A maioria dos genes eucarióticos é organizada em óperons e frequentemente é transcrita em uma única molécula de mRNA.

Os genes constitutivos são aqueles cujos produtos – RNA ou proteínas – interagem com outras sequências e afetam a transcrição ou a tradução dessas sequências.

quanto a origem das mutações, elas sempre ocorrem em função de uma indução por atividade humana.

quanto ao destino, as mutações são classificadas como somáticas quando envolverem gametas ou zigotos.

quanto ao tamanho da estrutura envolvida, as mutações gênicas referem-se aos casos onde trechos de DNA alterado forem relativamente grandes, quando podem ocorrer quebras de cromossomos.

com relação ao compartimento atingido, as mutações serão citoplasmáticas quando ocorrerem no DNA presente nos cromossomos do núcleo, e nucleares quando ocorrerem no DNA de mitocôndria e cloroplastos.

as mutações gênicas representam a maioria das mutações úteis ao melhoramento genético, pois, nestes casos de simples substituição de bases, a sobrevivência e a fertilidade dos mutantes são muito maiores do que nas mutações cromossômicas.

Mortalidade elevada ocasionada por septicemia generalizada e falha na capacidade osmorregulatória.

Morbidade crônica, acompanhada de uma mortalidade baixa, mas persistente, acompanhada de úlceras na pele, dano nas córneas e erosão na nadadeira caudal.

Alteração na capacidade respiratória do peixe, com intensa produção de muco nas brânquias, acompanhada de perda de equilíbrio, natação errática e letárgica.

Grande quantidade de fluidos na cavidade visceral, sendo observadas a existência de colônias brancas crescendo na superfície dos peixes, às vezes com aparência de algodão.

Mortalidade aguda a crônica, acompanhada de letargia, natação errática, exoftalmia, opacidade dos olhos, escurecimento da pele, hemorragias multifocais pelo corpo, ao redor da boca e do ânus, na base das nadadeiras e no opérculo.

Etiologia causada por bactéria intracelular, membro da ordem α -Proteobacteria.

Etiologia causada pelo fungo Astaci Aphanomyces, do grupo Oomycetida.

Etiologia de origem bacteriana, causada pelo Vibrio parahemolyticus.

Etiologia de origem viral, pertencente à família Nodaviridae.

Etiologia de origem bacteriana, causada pelo Vibrio harveyi.

Transporte de água e mudanças de mares com o mar no corpo receptor.

Secagem do solo dos viveiros entre os ciclos de produção.

Práticas de alimentação empregadas na fazenda.

Qualidade nutricional da ração empregada.

Métodos utilizados de aeração mecânica.

transformação de amônia a nitrato, representado resumidamente pela fórmula NH3 -> NO2- -> NO3-.

fixação do carbono inorgânico (CO2) e carbono orgânico (glicose), através da quimiossíntese.

quantidade necessária de ácido para titular as bases presentes em uma amostra de água.

oxidação dos aminoácidos pelas células vivas, sejam de tecidos orgânicos ou bactérias.

incorporação de biomassa vegetal pelas bactérias.

O gel de poliacrilamida não é recomendado para separação de RNA.

Os géis de agarose são utilizados tanto para separação de proteínas como de ácidos nucleicos.

Os únicos meios de suporte usados na eletroforese são agarose e acrilamida por serem química e fisicamente inertes.

A propriedade gelificante da acrilamida é atribuída à formação de pontes de hidrogênio inter e intra-moleculares entre as cadeias.

O tamanho do poro do gel é controlado pela concentração da agarose, com poros grandes formados em altas concentrações e poros menores em baixas concentrações.

A mobilidade eletroforética do DNA através do gel é influenciada apenas pelo tamanho e conformação da molécula.

Para a separação de moléculas de DNA maiores que 50 kb é recomendado o uso de eletroforese em gel de campo pulsado (pulsed field).

O tipo de matriz usada depende do tamanho dos fragmentos de DNA sendo a matriz de poliacrilamida mais utilizada para separar fragmentos maiores.

A estrutura necessária para a eletroforese vertical e horizontal consiste em uma fonte de tensão, uma unidade de eletroforese e uma câmera para digitalização.

O princípio se baseia no fato de biomoléculas com carga negativa quando aplicadas ou imersas em uma matriz de gel e submetidas a um campo elétrico migram em direção ao polo negativo.

marcadores baseados em DNA mitocondrial são inúteis no estabelecimento de relações entre espécies domésticas e seus parentes selvagens.

os marcadores moleculares não são eficientes como ferramenta na investigação da ocorrência de endogamia em plantéis de organismos aquáticos cultivados.

a predição de ganhos genéticos de animais adaptados ao setor produtivo é um exemplo de abordagem onde a genotipagem de marcadores moleculares é ineficiente.

a análise com marcadores é uma estratégia importante na manutenção dos recursos genéticos na fase inicial de domesticação de organismos aquáticos nativos.

os marcadores moleculares são utilizados em aquicultura para analisar a variação genética e identificação de indivíduos mas não se prestam para análise de variações dentro e entre populações.

É possível a quantificação de carga viral em ambos.

Os reagentes usados na PCR convencional e PCR em tempo real são iguais.

A etapa de manipulação das amostras pós-PCR inexiste na PCR em tempo real.

A PCR em tempo real usa a mesma plataforma de instrumentos que a PCR convencional.

Os dados gerados na PCR em tempo real são mais precisos e obtidos no mesmo período de tempo que a PCR convencional.

Uma instituição não pode ter mais de uma CEUA.

Somente as instituições de pesquisa precisam ter CEUAs.

A legislação da lei Aroca trata somente dos princípios éticos quanto ao uso de animais vertebrados.

A lei 11. 794, de 8 de outubro de 2014, Lei Aroca, estabelece os critérios para o uso de animais experimentais.

A criação e uso de animais experimentais fica restrita às instituições de ensino mesmo sem inscrição no CONCEA, ficando este requisito somente para as instituições não educacionais.

os neonatos podem ser eutanasiados por dióxido de carbono.

o neonatos são camundongos com até 30 dias de vida e podem ser eutanasiados por decapitação ou concussão.

quando se pretende anestesiar um feto para sua remoção, uma grande quantidade de anestésico deve ser administrada à mãe para assegurar a passagem pela placenta.

a dose de anestésico administrada a uma fêmea não prenha é a mesma de uma prenha, sendo suficiente para remover o feto sem sofrimento.

fetos acima de 5g, não anestesiados antes da remoção, podem ser mortos pelo rápido congelamento em nitrogênio líquido.

2,5 mg de quetamina e 0,25 mg de xilazina em 0,1 ul

2,5 mg de quetamina e 0,25 mg de xilazina em 0,2 ml

2,5 mg de quetamina e 0,25 mg de xilazina em 1ml

2,5 ug de quetamina e 0,25 ug de xilazina em 200 ul

2,5 ug de quetamina e 0,25 mg de xilazina em 1000 ul

O Hamster é a espécie animal com maior período de vida, sendo entre 3 – 8 anos.

Um camundongo nocaute é aquele que através de manipulação genética teve genes acrescentado.

Um camundongo nocaute é aquele que através de manipulação genética teve genes retirados.

A temperatura corporal normal dos pequenos roedores como ratos e camundongos varia em torno de 39 e 40 °C para camundongos e ratos, respectivamente.

Considerando que o número de animais por ninhada é bem maior nos camundongos, estes têm um período de gestação de 21 – 50 dias, superior ao dos ratos que corresponde a 15 – 20 dias.

A confirmação da morte é simples e pode ser feita por qualquer membro do laboratório de pesquisa.

Animais fetais ou recém-nascidos são mais resistentes à hipóxia e a biotransformação de fármacos, por isso a morte pode ser mais lenta.

A escolha de um método de eutanásia que produza morte imediata com o mínimo de sofrimento, não depende da espécie animal, idade e estado de saúde deste.

O método de eutanásia deve ser rápido e produzir a morte imediata por parada respiratória, cardíaca e perda da função renal, mesmo sem a perda de consciência do animal.

Caso haja alguma dúvida sobre a morte do animal, um segundo método de eutanásia não poderá ser usado, o animal terá que receber os cuidados necessários à sua recuperação.

são capazes de produzir imagens em alta resolução.

utilizam, em vez da luz, um feixe de elétrons , para iluminar a amostra.

utilizam ponteiras de vidro com alta sensibilidade à superfície da amostra.

os microscópios de ultravioleta e de fluorescência são exemplos de microscópio ópticos.

com funcionamento simples, a ampliação é feita por meio de lentes eletrostáticas e eletromagnéticas.

Quantifica somente a concentração de anticorpos.

No elisa tipo sanduiche são utilizados dois anticorpos diferentes.

Em geral, a curva padrão é feita com concentrações crescentes e conhecidas da enzima ligadora de antígeno.

Amostras de tecidos devem ser inicialmente centrifugadas e o sobrenadante, contendo as células, estocado para análise.

Neste método, uma enzima incolor, que reage com um substrato colorido para produzir um produto, é covalentemente ligada a um anticorpo específico que reconhece o antígeno alvo.

C = absorbância da substância x Absorbância do padrão.

C = absorbância da substância x Fator de calibração.

C = absorbância da padrão x Transmitância da amostra.

C = absorbância da substância x Transmitância do padrão.

C = Log da absorbância da substância x Fator de calibração.

ELISA.

Fotometria.

Fluorometria.

Espectrofotometria.

Imunohistoquímica.