Em um laboratório de microbiologia clínica, a conservação a...
I. A liofilização é um método eficiente para conservação a longo prazo, pois remove a água da amostra, reduzindo a atividade metabólica e permitindo a manutenção da viabilidade sem necessidade de congelamento.
II. O armazenamento de bactérias em geladeira a 4°C é indicado para conservação temporária, mas não é recomendado para manter cepas viáveis por períodos superiores a algumas semanas.
III. Para microrganismos anaeróbios estritos, a estocagem em meios líquidos à temperatura ambiente é uma técnica adequada para garantir a viabilidade e evitar a exposição ao oxigênio.
Assinale a alternativa CORRETA:
Gabarito comentado
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Gabarito: A — Apenas as afirmativas I e II estão corretas.
Tema central: Conservação de cepas bacterianas para manter viabilidade e estabilidade fenotípica/genotípica. Na prática de microbiologia clínica, escolher a técnica certa depende do tempo de armazenamento, da sensibilidade ao oxigênio e da temperatura.
Por que a alternativa A é correta?
I. Liofilização: método clássico e eficiente para longo prazo. Remove a água por sublimação, reduz atividade metabólica e preserva características por anos, sem necessidade de congelamento durante o armazenamento, quando bem protegida (ex.: trealose, leite desnatado). É amplamente recomendado por bancos de cepas (ATCC) e manuais de referência (ASM, Practical Handbook of Microbiology).
II. 4°C: ideal para curto prazo (dias a poucas semanas). Temperaturas de geladeira diminuem o metabolismo, mas não impedem perdas de viabilidade e seleção de variantes com o tempo; por isso, não é indicado para períodos superiores a algumas semanas. Essa prática está alinhada a guias de qualidade em laboratórios clínicos (ASM; ATCC).
Por que a afirmativa III está incorreta?
III. Anaeróbios estritos: armazenar em meio líquido à temperatura ambiente é inadequado. O oxigênio difunde-se no líquido e a atividade metabólica permanece relativamente alta, comprometendo a viabilidade. O adequado é usar condições anaeróbias controladas e/ou baixa temperatura: curto prazo em meios semissólidos prereduzidos (ex.: tioglicolato, PRAS) em frascos bem vedados/atmosfera anaeróbia; longo prazo por criopreservação (-80°C ou nitrogênio líquido) com crioprotetores (glicerol 10–20%) ou liofilização quando a espécie tolera. Referências: ATCC “Preservation of Microorganisms”, ASM, CDC/CLSI sobre boas práticas.
Estratégia de prova:
- Associe “longo prazo” → liofilização/criopreservação.
- “4°C” → conservação temporária, não meses.
- Desconfie de “temperatura ambiente + meio líquido” para anaeróbios: costuma expor ao O₂.
Análise das alternativas:
- A (I e II corretas): Correta.
- B (apenas II): incorreta, pois I também é verdadeira.
- C (apenas III): incorreta, III é falsa.
- D (I e III): incorreta, III é falsa.
- E (todas): incorreta, III é falsa.
Referências úteis: ATCC – Preservation of Microorganisms; ASM – Practical Handbook of Microbiology; CDC/CLSI – boas práticas de laboratório e manutenção de culturas.
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