Tema central: extração de ácidos nucleicos em diagnóstico molecular viral. Nessa etapa, o fenol é empregado para remover proteínas e enzimas (RNases/DNases), preservando DNA/RNA para análises como PCR/RT‑PCR.

Alternativa correta: B – “solvente orgânico desproteinizante”.

Justificativa: O fenol é um solvente orgânico que desnatura proteínas ao romper interações hidrofóbicas e pontes de hidrogênio, promovendo sua desproteinização da amostra. No método fenol-clorofórmio, as proteínas migram para a fase orgânica/interfase, enquanto os ácidos nucleicos permanecem na fase aquosa, prontos para purificação. Além disso, o fenol inativa nucleases, protegendo o material genético. Referências clássicas: Green & Sambrook, Molecular Cloning (CSH Press); Ausubel, Current Protocols in Molecular Biology; diretrizes CLSI MM03 (métodos moleculares em doenças infecciosas).

Análise das alternativas incorretas

A – detergente solubilizante: Detergentes (ex.: SDS, Triton X‑100) rompem membranas e solubilizam lipídios/proteínas de membrana. Fenol não é detergente; sua ação principal é desnaturar e remover proteínas, não solubilizar como um surfactante.

C – solvente não-orgânico ligante: Contradição conceitual: o fenol é orgânico. “Ligante” implicaria quelar ou se complexar especificamente, o que não é o mecanismo do fenol na extração de ácidos nucleicos.

D – solvente estabilizante: O fenol não estabiliza proteínas; ele as desnatura. Em pH e manejo inadequados, pode até degradar ácidos nucleicos, razão pela qual se usa tampões e fenol equilibrado (conforme Green & Sambrook).

E – detergente quelante: “Quelante” refere-se a substâncias como EDTA, que se ligam a íons divalentes (Mg²⁺) inibindo nucleases. Fenol não é quelante nem detergente. Muitas extrações combinam EDTA (quelante) + detergente + fenol, mas cada um tem funções distintas.

Estrategia de prova: associe “fenol” a fenol-clorofórmio, “fase aquosa” com ácidos nucleicos e “desnaturação/desproteinização” de proteínas. Termos como “detergente” e “quelante” apontam para SDS/Triton e EDTA, respectivamente — pistas para eliminar alternativas.

Fontes de referência: Green MR & Sambrook J. Molecular Cloning: A Laboratory Manual; Ausubel FM et al. Current Protocols in Molecular Biology; CLSI MM03 – Molecular Diagnostic Methods for Infectious Diseases; recomendações da OMS/CDC em protocolos de extração para testes de PCR em vigilância viral.

Gabarito: B

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