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Q3364950 Técnicas em Laboratório

A solicitação de coloração especial, ou específica, é um procedimento feito pelo patologista ou pesquisador sempre que a lâmina corada por Hematoxilina & Eosina (HE) não for suficiente para diagnóstico ou para mostrar estruturas que necessitam serem esclarecidas (Dorigan Neto, 2012). Qual coloração é a indicada para detectar glicogênio em cortes histológicos?

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Tema central: colorações histoquímicas especiais para identificação de carboidratos teciduais. Em diagnóstico histopatológico, quando a HE não é suficiente, escolhe-se a coloração que evidencia a classe química da substância-alvo.

Alternativa correta: B – Ácido Periódico de Schiff (PAS)

Justificativa: O PAS detecta glicogênio e outras estruturas ricas em carboidratos (mucopolissacarídeos neutros, membrana basal, parede de fungos). O ácido periódico oxida dióis vicinais do glicogênio gerando aldeídos, que reagem com o reagente de Schiff produzindo cor magenta. Para confirmar que o material corado é glicogênio, utiliza-se o PAS-diastase (PAS-D): a diastase digere o glicogênio e a positividade desaparece. Referência clássica: Bancroft & Gamble; Kiernan, Histological and Histochemical Methods.

Por que as demais estão incorretas?

A) Von Kossa: evidencia depósitos de cálcio (sais de fosfato/carbonato) por redução indireta da prata, resultando em grânulos pretos. Não reage com glicogênio.

C) Vermelho do Congo: específico para amiloide; mostra birrefringência verde-maçã à luz polarizada. Amiloide ≠ glicogênio; estruturas e composição distintas.

D) Sudan III: corante lipofílico que marca lipídios neutros (gotículas de gordura) em cortes congelados (Oil Red O/Sudan Black B são alternativas). Glicogênio é hidrossolúvel e não é corado por Sudan.

E) Mucicarmim: cora mucinas ácidas (ex.: mucinas epiteliais e cápsula de Cryptococcus) em vermelho-cereja. Glicogênio é mucopolissacarídeo neutro e não é demonstrado por mucicarmim.

Estratégia de prova: associe sempre a classe química ao corante: PAS → carboidratos (glicogênio, membrana basal, fungos); Sudan → lipídios; Von Kossa → cálcio; Vermelho do Congo → amiloide; Mucicarmim → mucinas ácidas. Para “confirmar glicogênio”, lembre do PAS-D (sinal desaparece após diastase).

Termos úteis: Diástase (amilase) digere glicogênio; aldeídos são grupos químicos gerados na oxidação pelo ácido periódico; Schiff reage com aldeídos, produzindo a coloração magenta.

Referências essenciais: Bancroft & Gamble, Theory and Practice of Histological Techniques; Kiernan JA, Histological and Histochemical Methods; College of American Pathologists – protocolos de validação de colorações especiais.

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