Alternativa correta: E (Errado)

1. Tema central da questão:

A questão trata sobre a Reação em Cadeia da Polimerase (PCR), uma técnica essencial em biologia molecular desenvolvida em 1985 que revolucionou o estudo do DNA. Ela permite amplificar, ou seja, multiplicar em grande quantidade, fragmentos específicos de DNA.

2. Resumo teórico:

A PCR utiliza primers (pequenas sequências de DNA) que se ligam a regiões específicas do DNA-alvo, delimitando o trecho que será amplificado. Como destaca o manual Molecular Biology of the Cell (Alberts et al., 6ª edição), para desenhar os primers é necessário conhecer a sequência de nucleotídeos das extremidades do fragmento de interesse. Sem essa informação, não é possível direcionar a amplificação para a região correta do DNA.

Fonte: Alberts, B. et al. Molecular Biology of the Cell, 6ª Ed., Garland Science, 2014.

3. Justificativa da alternativa correta:

O item afirma que a PCR pode ser usada para isolar fragmentos de DNA cuja estrutura ainda não foi sequenciada. Isso está ERRADO porque, sem conhecer ao menos parte da sequência do DNA, não é possível construir os primers adequados. A identificação das sequências-alvo é pré-requisito fundamental para a realização da técnica.

Estratégia de interpretação: Atenção a expressões absolutas como “cuja estrutura ainda não foi sequenciada”. Essa informação é um forte indicativo de erro, pois a ausência de dados sobre a sequência inviabiliza a utilização da PCR.

4. Análise da alternativa incorreta:

A alternativa "Certo" estaria equivocada porque contradiz o princípio básico da PCR: sem conhecimento da sequência, não é possível amplificar seletivamente um fragmento de DNA.

Resumo final:
Para usar a PCR, é necessário conhecer a sequência do DNA-alvo para projetar os primers.

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A reação em cadeia da polimerase (PCR, na sigla em inglês) é uma técnica de biologia molecular que permite replicação in vitro do DNA de forma rápida.

Para realizar a PCR necessita de um fragmento de DNA já conhecido, uma vez que a função dessa técnica é amplificar essa sequência conhecida.

O isolamento de fragmentos de DNA cuja estrutura ainda não foi sequenciada é via clonagem.

CESPE - 2004 - Prefeitura de Boa Vista RR - Biomédico - A técnica de PCR demanda um conhecimento prévio da sequência que será amplificada. (CERTA)

É necessário utilizar as enzimas de restrição.