Em 1985, um grupo de cientistas padronizou uma técnica por m...
Em 1985, um grupo de cientistas padronizou uma técnica por meio da qual eram geradas, a partir do DNA genômico, grandes quantidades de um fragmento específico de DNA. A respeito dessa técnica, julgue o item seguinte.
O princípio da reação em cadeia da polimerase (PCR)
envolve repetidos ciclos de desnaturação térmica do DNA
molde, anelamento dos iniciadores às suas seqüências
complementares e extensão dos oligonucleotídeos anelados
por uma DNA-polimerase altamente resistente à desnaturação
em temperaturas elevadas.
Fases da PCR
1 Desnaturação da fita de DNA (92 - 95 Graus C)
2 Anelamento dos primers e oligonucleotídeos (55 - 60 Graus C)
3 Extensão ou hibridização (72 Graus C)
A alternativa correta é: C - certo
A questão trata da reação em cadeia da polimerase (PCR), uma técnica revolucionária na biologia molecular que permite a amplificação de fragmentos específicos de DNA a partir do DNA genômico. Esta técnica foi padronizada em 1985 e é amplamente utilizada em pesquisas e diagnósticos.
Para entender a questão, é essencial saber como a PCR funciona. A técnica envolve três etapas principais que se repetem em ciclos:
1. Desnaturação térmica: Nesta etapa, a dupla hélice de DNA é aquecida a altas temperaturas (geralmente cerca de 94-98°C) para que as duas fitas de DNA se separem. Este processo é chamado de desnaturação.
2. Anelamento: A temperatura é então reduzida (geralmente entre 50-65°C) para permitir que os iniciadores (oligonucleotídeos curtos que são complementares às extremidades do fragmento de DNA alvo) se liguem às suas sequências complementares no DNA molde. Esse processo é conhecido como anelamento ou hibridização.
3. Extensão: Finalmente, a temperatura é aumentada para cerca de 72°C, a temperatura ideal para a DNA-polimerase resistente ao calor (geralmente Taq polimerase, isolada da bactéria Thermus aquaticus). Esta enzima sintetiza novas fitas de DNA, estendendo os iniciadores ao longo do molde de DNA.
A repetição desses ciclos resulta na amplificação exponencial do fragmento de DNA alvo. Cada ciclo duplica a quantidade de DNA, permitindo a criação de milhões de cópias em poucas horas.
A alternativa correta explica com precisão o princípio da PCR, destacando a importância de uma DNA-polimerase resistente à desnaturação em temperaturas elevadas, como a Taq polimerase. Esse detalhe é crucial para o sucesso da técnica, pois enzimas comuns se desnaturariam nas altas temperaturas da etapa de desnaturação.
As alternativas incorretas não foram fornecidas na questão, mas poderíamos considerar algumas possíveis incorreções comuns como: mencionar enzimas não resistentes ao calor ou descrever etapas da PCR de forma errada, como a inserção de etapas inexistentes ou a ordem equivocada das etapas.
Em resumo, a PCR é uma ferramenta poderosa e essencial na biologia molecular, e a questão aborda corretamente os conceitos fundamentais dessa técnica. É importante que o aluno compreenda cada etapa e a função das enzimas envolvidas para responder corretamente questões similares em concursos.
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