Alternativa correta: C - três fragmentos, sendo um do tamanho original da sequência amplificada e dois menores.

1. Tema central: A questão aborda o uso de enzimas de restrição para identificar variantes genéticas após uma PCR (Reação em Cadeia da Polimerase) e análise por eletroforese. Essa técnica é fundamental em biologia molecular, genética forense e diagnóstico de doenças hereditárias, pois explora como pequenas diferenças no DNA podem ser detectadas.

2. Resumo teórico: Enzimas de restrição reconhecem sequências específicas de DNA e cortam-nas nesses sítios. Se um indivíduo for heterozigoto para uma mutação, ele possui um alelo (fragmento de DNA) normal (sem o sítio de corte) e outro mutante (com o sítio de corte). Após a PCR, ambos os alelos são amplificados. Quando a enzima é adicionada, apenas o alelo mutante será cortado, gerando dois fragmentos menores, enquanto o alelo normal permanece intacto.

3. Fonte relevante: Os conceitos estão presentes em livros-texto como "Biologia Molecular da Célula", de Alberts et al., e em manuais de técnicas de biologia molecular.

4. Justificativa da alternativa correta (C):

• O indivíduo heterozigoto possui dois alelos: um normal e um mutante.
• Após PCR e digestão, você terá:
• 1 fragmento do alelo normal (tamanho original, pois não é cortado)
• 2 fragmentos do alelo mutante (resultado do corte pela enzima de restrição)
• Na eletroforese, aparecerão três bandas distintas: uma do tamanho original e duas menores.

5. Análise das alternativas incorretas:

• A: Incorreto. Apenas em homozigotos normais a enzima não cortaria, gerando somente um fragmento.
• B: Incorreto. Dois fragmentos apareceriam apenas se fosse homozigoto mutante (ambos cortados), mas o heterozigoto gera três.
• D e E: Erradas. Quatro ou cinco fragmentos não são possíveis com apenas dois alelos e um sítio de corte diferencial.

6. Estratégias de interpretação: Preste atenção nas palavras-chave: “sítio de corte na mutante”, “heterozigoto” e “fragmentos”. Imagine o processo passo a passo: PCR (duas cópias diferentes), enzima (corta só uma delas), resultado (quantos pedaços?). Perguntas assim frequentemente exigem raciocínio sobre o processo, não apenas memorização.

Gostou do comentário? Deixe sua avaliação aqui embaixo!