Para a classificação das bactérias Gram-positiva e Gram-neg...

Para responder à questão sobre a técnica de coloração de Gram, é importante entender **o que é essa técnica e por que ela é utilizada**. A coloração de Gram é um método de coloração bacteriana que distingue entre bactérias Gram-positivas e Gram-negativas com base na estrutura da parede celular.

Resumo Teórico:

A coloração de Gram envolve uma série de passos que incluem a aplicação de diferentes corantes e reagentes:

• Cristal Violeta: É o corante primário que penetra nas paredes celulares de todas as bactérias.
• Fixador (Lugol): Forma um complexo com o cristal violeta, fixando-o dentro das células.
• Álcool: Atua como um agente de descoloração. As bactérias Gram-positivas, com suas paredes celulares mais espessas, retêm o cristal violeta, enquanto as Gram-negativas não.
• Safranina: É o corante de contraste que mancha as bactérias Gram-negativas, que aparecem rosadas/vermelhas sob o microscópio, enquanto as Gram-positivas permanecem roxas.

Segundo o protocolo padrão, após a secagem da lâmina, a observação é feita com a objetiva de 100x no microscópio óptico, utilizando óleo de imersão para melhorar a resolução.

Justificativa da Alternativa Correta: D

A alternativa D descreve corretamente os passos da coloração de Gram: iniciando com o cristal violeta, seguido pelo lugol, depois a descoloração com álcool e, por último, a safranina. Após a secagem, a lâmina é observada na objetiva 100x do microscópio óptico, que é apropriada para este tipo de análise.

Análise das Alternativas Incorretas:

• A: A sequência dos reagentes está incorreta e menciona a observação na objetiva de 40x, que não é adequada após a coloração de Gram.
• B: A sequência de aplicação dos reagentes está incorreta (álcool antes do lugol), e a ordem correta é crucial para a técnica funcionar.
• C: Além de uma sequência incorreta (álcool antes do lugol), a observação ao microscópio estaria comprometida.
• E: A sequência correta dos reagentes é usada, mas a observação é indicada na objetiva de 40x, o que não é apropriado para a análise completa.

É essencial lembrar que a ordem e a escolha da objetiva influenciam diretamente os resultados e a interpretação correta das características bacterianas.

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A técnica de coloração de Gram é um método fundamental na microbiologia para a classificação de bactérias em Gram-positivas ou Gram-negativas, baseado nas características de suas paredes celulares. A alternativa correta, a letra D, descreve corretamente a sequência e os reagentes usados nesse procedimento. Primeiramente, a bactéria é fixada na lâmina para aderir à superfície e evitar que seja removida durante a coloração. Em seguida, aplica-se o corante primário, o cristal violeta, que entra em todas as células. O lugol é utilizado como mordente, auxiliando na fixação do cristal violeta na parede celular. A etapa seguinte envolve a descoloração com álcool ou acetona, que é crucial para a diferenciação: as bactérias Gram-positivas retêm o cristal violeta devido a suas paredes celulares espessas, enquanto as Gram-negativas são descoradas devido à sua membrana externa mais complexa e parede celular mais fina. Por fim, a safranina é usada como contracorante, tingindo as células Gram-negativas de vermelho ou rosa, enquanto as Gram-positivas se mantêm roxas. A observação é realizada em um microscópio ótico com a objetiva de 100x, geralmente em combinação com óleo de imersão, para melhorar a resolução. As outras opções contêm erros na ordem dos corantes e/ou nos detalhes de observação.