Tema central da questão: A coloração de Gram é uma técnica essencial em microbiologia para classificar bactérias em Gram-positivas ou Gram-negativas, com base nas características de suas paredes celulares. Essa diferenciação é crucial, pois influencia o tratamento antimicrobiano, uma vez que a composição da parede celular está ligada à resistência aos antibióticos.

Justificativa para a alternativa correta (E - 3 – 1 – 4 – 2):

• Álcool: Atua como descorante. Ele remove o corante primário das células Gram-negativas, tornando-as incolores temporariamente.
• Violeta de genciana: É o corante primário. Ele penetra na célula bacteriana, inicialmente colorindo todas as bactérias.
• Safranina: Funciona como contracorante. Após a descoração, cora as células que perderam o violeta de genciana, ou seja, as Gram-negativas, permitindo sua visualização.
• Lugol: Age como mordente. Forma um complexo com o violeta de genciana, fixando-o nas células Gram-positivas.

Análise das alternativas incorretas:

• A - 3 – 2 – 1 – 4: Esta sequência começa corretamente com o álcool como descorante, mas troca as posições de lugol (mordente) e violeta de genciana (corante primário), além de terminar incorretamente com safranina como mordente.
• B - 2 – 1 – 3 – 4: Nesta opção, lugol é colocado como o primeiro, o que não é correto, pois deve ser usado após o corante primário, o violeta de genciana.
• C - 4 – 1 – 2 – 3: Esta alternativa coloca safranina como o primeiro passo, o que é incorreto, já que a safranina é o contracorante, usado no final do processo.
• D - 3 – 1 – 2 – 4: Aqui, o álcool está corretamente no início como descorante, mas as funções de violeta de genciana e lugol estão invertidas.

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E -

3 – 1 – 4 – 2