As endonucleases de restrição são proteínas de grande impor...
As endonucleases de restrição são proteínas de grande importância dentro da tecnologia do ADN recombinante, sendo fundamentais, por exemplo, na análise da estrutura dos cromossomos, seqüenciamento de longas moléculas de ADN, isolamento de genes e na criação de novas moléculas de ADN que podem ser posteriormente clonadas em distintos tipos de vetores. Em relação ao tema, analise as afirmativas a seguir.
I. Um pedaço de ADN, produzido pela ação de uma enzima de restrição, também pode ser clivado especificamente em fragmentos menores por ação de outra enzima de restrição.
II. A maioria das enzimas de restrição reconhece sequências de dois a seis pares de bases e hidrolizam uma ligação fosfodiéster na fita de ADN, a exemplo da Pst I que é um palíndromo.
III. As enzimas de restrição são amplamente encontradas em uma grande variedade de procariotos. Sua função básica é reconhecer uma sequência de bases específica na fita simples de ADN em lugares determinados, fazendo cortes no eixo de simetria abruptos ou cortes assimétricos coesivos.
Assinale:
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As endonucleases de restrição são ferramentas essenciais na biologia molecular, especialmente na tecnologia do DNA recombinante. Elas são responsáveis por cortar o DNA em sequências específicas, o que é fundamental para várias aplicações, como clonagem, análise de genes e engenharia genética.
Analisando as afirmativas:
I. Um pedaço de ADN, produzido pela ação de uma enzima de restrição, também pode ser clivado especificamente em fragmentos menores por ação de outra enzima de restrição.
Essa afirmativa está correta. As enzimas de restrição reconhecem sequências específicas de DNA e podem cortar o DNA em locais precisos. É comum usar múltiplas enzimas para criar fragmentos menores, facilitando a análise ou manipulação genética.
II. A maioria das enzimas de restrição reconhece sequências de dois a seis pares de bases e hidrolizam uma ligação fosfodiéster na fita de ADN, a exemplo da Pst I que é um palíndromo.
Essa afirmativa contém um erro. Embora muitas enzimas de restrição reconheçam sequências de quatro a oito pares de bases, a Pst I é, de fato, uma enzima de restrição, mas o enunciado não está claro sobre a questão dos palíndromos. Além disso, a maioria das enzimas corta ambas as fitas de DNA, não apenas uma.
III. As enzimas de restrição são amplamente encontradas em uma grande variedade de procariotos. Sua função básica é reconhecer uma sequência de bases específica na fita simples de ADN em lugares determinados, fazendo cortes no eixo de simetria abruptos ou cortes assimétricos coesivos.
O erro nesta afirmativa está na menção à "fita simples de ADN". As enzimas de restrição atuam em fitas duplas de DNA. Elas fazem cortes em sequências específicas, que geralmente são palíndromas, e podem resultar em extremidades rombas ou coesivas, mas sempre em fitas duplas.
Alternativa Correta: A - se somente a afirmativa I estiver correta.
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II. A maioria das enzimas de restrição reconhece sequências de dois a seis pares de bases e hidrolizam uma ligação fosfodiéster na fita de ADN, a exemplo da Pst I que é um palíndromo.
Enzimas de restrição tipo I - clivam a 1000pb de distância do sítio de restrição
Enzimas de restrição tipo II - clivam a 4-, 6- ou 8pb de distância do sítio de restrição
Enzimas de restrição tipo III - clivam em 2 sítios de restrição, a 25pb de distância do sítio de restrição
III. As enzimas de restrição são amplamente encontradas em uma grande variedade de procariotos. Sua função básica é reconhecer uma sequência de bases específica na fita simples de ADN em lugares determinados, fazendo cortes no eixo de simetria abruptos ou cortes assimétricos coesivos.
-- existem enzimas restrição também em eucariotos
-- reconhecem sequencia de bases específicas na fita dupla de DNA.
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