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Q573825 Biomedicina - Análises Clínicas
Em engenharia genética, uma das etapas importantes no processo de criação de moléculas de DNA recombinante é a obtenção dos fragmentos de DNA de interesse, esta etapa pode ser realizada com o uso de enzimas de restrição. Em relação a estas enzimas, é correto afirmar que:

I. Estas enzimas são endonucleases das moléculas de DNA que cortam em locais aleatórios.

II. De acordo com a enzima utilizada, podem ser gerados fragmentos de DNA com extremidades coesivas ou cegas.

III. As enzimas que geram fragmentos com extremidade cega são particularmente úteis na clonagem de genes visto que geram fragmentos que apresentam um pequeno número de nucleotídeos em cadeia simples, capazes de hibridizar com uma sequência de bases complementar.

IV. Estas enzimas catalisam a destruição de uma ligação fosfodiéster entre dois nucleotídeos consecutivos ligados a determinadas bases.

V. Qualquer molécula de DNA derivada de vírus, bactérias, insetos ou humanos contém alvos de enzimas de restrição.

Assinale: 
Alternativas

Comentários

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I. Errado. As enzimas de restrição são caracterizadas por sua seletividade, portanto não clivam de forma aleatória;

II. Correto. As enzimas de restrição podem gerar fragmentos com extremidades adesivas (sticky ends), fora do eixo de simetria e com pbs desemparelhadas, ou fragmentos com extremidades abruptas (blund ends), onde o corte acontece no eixo de simetria e os pbs estão pareados;

III. As extremidades abruptas, ou cegas, não possuem cadeia simples. 

 

Incorreta.

As enzimas de restrição são endonucleases sim, mas não cortam em locais aleatórios. Elas reconhecem sequências específicas de nucleotídeos (geralmente palindrômicas) e cortam sempre no mesmo ponto dentro dessas sequências.

Correta.

Algumas enzimas produzem cortes com extremidades coesivas (ou pegajosas) – com fitas simples complementares – enquanto outras produzem extremidades cegas, sem nucleotídeos expostos.

Incorreta.

Essa descrição está invertida. Quem gera fragmentos com cadeia simples capazes de hibridizar são as enzimas que produzem extremidades coesivas, e não as que produzem extremidades cegas.

Correta.

As enzimas de restrição quebram ligações fosfodiéster no DNA, cortando entre nucleotídeos, em posições específicas das sequências-alvo.

Correta.

É altamente provável que qualquer DNA natural contenha as sequências reconhecidas por pelo menos uma enzima de restrição, já que essas sequências são geralmente curtas (4–8 pb).

Apenas as afirmativas II, IV e V estão corretas.

Explicação Detalhada: Extremidades Coesivas (Pegajosas): As extremidades coesivas, também conhecidas como extremidades "pegajosas", são resultantes de um corte "desalinhado" na molécula de DNA. Isso significa que uma das fitas do DNA é cortada um pouco antes da outra, criando uma pequena porção de fita simples (de um lado) que se estende. Estas porções de fita simples são complementares entre si, o que permite que fragmentos de DNA cortados com a mesma enzima se parem e unam facilmente, facilitando a técnica de DNA recombinante. Extremidades Cegas (Rombas): As extremidades cegas, por outro lado, são resultantes de um corte direto e simétrico na molécula de DNA. Neste caso, as duas fitas são cortadas ao mesmo tempo e no mesmo ponto. Isso resulta em extremidades lisas, sem porções de fita simples exposta. Para unir fragmentos de DNA que possuem extremidades cegas, é geralmente necessário adicionar sequências de DNA especiais, chamadas de "adaptadores", ou utilizar técnicas mais complexas de ligação.

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