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Q3451485 Técnicas em Laboratório
Um laboratório de controle de qualidade recebeu uma amostra de água proveniente de um sistema de abastecimento público para análise microbiológica. A detecção de Salmonella é uma prioridade devido a preocupações sobre possível contaminação. O procedimento adotado pelo técnico de laboratório incluiu os seguintes passos:

• coleta da amostra de água em frascos estéreis;
• concentração da amostra usando uma técnica de filtração;
• inoculação da amostra concentrada em meios de cultivo seletivos para Salmonella (como o meio de cultivo de selenito ou tetrationato);
• incubação das amostras em condições específicas para promover o crescimento de Salmonella;
• realização de testes confirmatórios para identificar Salmonella na colônia cultivada.

Com base nos passos descritos, assinale a alternativa correta.
Alternativas

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Tema central: detecção microbiológica de Salmonella em água de abastecimento, seguindo o fluxo clássico: concentração (membrana), enriquecimento seletivo (selenito/tetrationato/Rappaport-Vassiliadis), incubação em temperatura mesofílica e confirmação (bioquímica/serológica/molecular). Este encadeamento está alinhado com ISO 6579-1:2017, FDA BAM – Salmonella e APHA Standard Methods.

Alternativa correta: A – A concentração por filtração aumenta a sensibilidade porque Salmonella pode estar em baixa carga na água. Usam-se filtros de 0,45 µm para reter bactérias, que depois são eluidas e submetidas a enriquecimento seletivo. Assim, eleva-se a chance de detectar células viáveis. Essa etapa é recomendada em diretrizes (APHA; WHO Guidelines for Drinking-water Quality) quando se busca patógenos pouco abundantes.

Por que está certa? Em amostras com baixa inoculação, ir direto ao plaqueamento gera falso-negativo. A filtração concentra e o enriquecimento seletivo (selenito/tetrationato/Rappaport-Vassiliadis) inibe competidores sem suprimir Salmonella, permitindo sua multiplicação antes do isolamento em meios diferenciais (XLD, Hektoen, SS) e confirmação (TSI/KIA, urease, LIA; sorotipagem O/H; PCR). Referência: ISO 6579-1; FDA BAM.

Análise das incorretas

B – Afirma que a filtração “remove” Salmonella e que não há necessidade de cultivo. Incorreto. A membrana retém as bactérias; o que segue adiante é o filtrado, não a fração de interesse. É necessário recuperar o microrganismo da membrana e cultivar para detecção de células viáveis (padrão ouro em microbiologia ambiental).

C – Diz que o selenito é usado para inibir Salmonella. Incorreto. O caldo de selenito é um meio de enriquecimento seletivo que inibe competidores (p. ex., coliformes) e favorece Salmonella. A confirmação ocorre depois, em meios diferenciais e por testes específicos. Referência: ISO 6579-1; BAM.

D – Propõe incubação <10 °C. Incorreto. Salmonella é mesófila, com crescimento ótimo em torno de 35–37 °C. Temperaturas baixas inibem o crescimento e reduzem a sensibilidade do método.

E – Sugere dispensar testes confirmatórios. Incorreto. Meios seletivos podem gerar falsos-positivos (p. ex., Proteus, Citrobacter). Normas exigem confirmação por painéis bioquímicos e/ou sorologia (Kauffmann-White) e/ou PCR. Referência: ISO 6579-1; WHO; APHA.

Estratégia de prova: em questões de vigilância de água, procure a sequência lógica: concentrarenriquecer seletivamenteincubar a 35–37 °Cisolar em meio diferencialconfirmar. Desconfie de alternativas que proponham pular a confirmação ou usar temperaturas incompatíveis com o microrganismo.

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