O tema central da questão é o método de filtração em membrana para contagem de bactérias heterotróficas na água, um procedimento importante em microbiologia para garantir a qualidade da água.

Justificativa para a alternativa correta (D):

I. As membranas usadas devem ter 47mm de diâmetro e porosidade de 0,45µm, brancas e quadriculadas. Esta afirmativa está correta. As membranas de filtração com 0,45µm de porosidade são padrão para retenção de bactérias, permitindo a passagem de partículas menores, como vírus e algumas partículas coloidais.

III. É um método para análise que pode ser usado em amostras com contagens abaixo de 1 UFC/mL. Esta afirmativa é correta. O método de filtração em membrana é sensível o suficiente para detectar baixas contagens bacterianas, sendo eficaz para amostras com contagens inferiores a 1 Unidade Formadora de Colônia (UFC) por mL.

IV. A membrana deve ser aplicada na placa com a face quadriculada para cima. Esta afirmativa está correta. A face quadriculada ajuda na visualização e contagem das colônias bacterianas após a incubação.

Análise das alternativas incorretas:

II. A água de diluição usada é o tampão fosfato. Esta afirmativa está incorreta. Geralmente, a água de diluição usada é a água destilada estéril, pois o tampão fosfato não é comumente utilizado para diluir amostras de água em análises microbiológicas.

V. O volume de amostra empregado no método é de uma porção de 50mL. Esta afirmativa está incorreta. O volume de amostra pode variar dependendo do conteúdo bacteriano esperado e do método específico, mas não é estritamente limitado a 50mL. Volumes maiores ou menores podem ser usados conforme necessário para garantir precisão na contagem.

Em resumo, a alternativa D é a correta, pois as afirmativas I, III e IV são precisas e de acordo com as práticas padrão de microbiologia para análise da qualidade da água.

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se somente as afirmativas I, III e IV estiverem corretas.

Método de filtração por membrana: filtrar 200 mL da amostra através de membrana de filtração estéril com 47 mm de diâmetro e porosidade de 0,45 μm.

Farmacopeia Brasileira 7ª edição