Tema central: A questão aborda técnicas de biologia molecular, especificamente qual foi a primeira capaz de identificar a sequência exata de nucleotídeos em uma molécula de DNA. Esse conhecimento é essencial na área da Genética Médica, pois o sequenciamento de DNA revolucionou o diagnóstico de doenças genéticas, permitindo a identificação de mutações específicas associadas a síndromes e patologias hereditárias.

Alternativa correta: E) Método de Sanger

O Método de Sanger, desenvolvido em 1977, foi pioneiro no sequenciamento de DNA. Baseia-se na utilização de didesoxinucleotídeos (ddNTPs), que interrompem a síntese da nova cadeia de DNA, formando fragmentos de diversos tamanhos. Após separação desses fragmentos por eletroforese, é possível ler a sequência na ordem correta dos nucleotídeos. Segundo referências clássicas como “Genética Médica”, de Jorde, Carey e Bamshad (2016, p. 56), o método Sanger “foi o padrão-ouro do sequenciamento genético por várias décadas”.

Estratégia de resolução: O segredo para acertar questões como esta está em identificar se a técnica revela a sequência exata do DNA ou apenas detecta/amplifica fragmentos.

Análise das alternativas incorretas:

A) PCR em tempo real: Técnica que amplifica e quantifica DNA, mas não descreve a ordem dos nucleotídeos.

B) Southern blot: Detecta a presença de sequências específicas de DNA após separação em gel, mas não sequencia o material genético.

C) ELISA: Utilizado para detecção de proteínas/anticorpos, não envolve DNA diretamente.

D) Eletroforese em gel de agarose: Separa fragmentos de DNA pelo tamanho, mas não revela a sequência completa.

Ponto-chave para provas: Muitas questões apresentam termos técnicos semelhantes (exemplo: amplificação, detecção, quantificação e sequenciamento). Concentre-se no verbo do enunciado (“identificar a sequência exata”) para não cair em pegadinhas!

Referência: “Em 1977, Sanger e colaboradores introduziram a técnica de terminação de cadeia, permitindo o sequenciamento de bases do DNA de maneira precisa.” (Jorde LB, Carey JC, Bamshad MJ. Genética Médica. Elsevier, 2016, p. 56)

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