O principal problema na extração de RNA é a presença da enz...
Selecione a alternativa que descreve uma forma ineficaz de proteção do RNA da ação das RNAses durante a extração.
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O tema central desta questão é a proteção do RNA contra a degradação por RNAses durante o processo de extração. Este é um aspecto crucial em biologia molecular, pois as RNAses são enzimas altamente estáveis e resistentes, capazes de degradar rapidamente o RNA, prejudicando análises posteriores.
A resposta correta, que descreve uma forma ineficaz de proteção do RNA, é a alternativa B. Vamos entender por quê:
Justificativa para a alternativa B: Aquecer as amostras biológicas a 80°C por 10 minutos é ineficaz na inativação de RNAses. Estas enzimas são termorresistentes e podem permanecer ativas mesmo após exposição a temperaturas elevadas por curtos períodos. Portanto, esse método não protege adequadamente o RNA durante a extração.
Análise das alternativas incorretas:
A - Utilizar proteínas inibidoras de RNAses: Existem proteínas comerciais que são eficazes em inibir a atividade catalítica das RNAses, protegendo assim o RNA durante a extração. Essa é uma prática comum e recomendada em laboratórios de biologia molecular.
C - Utilizar dietil pirocarbonato (DEPC): O DEPC é um agente que se liga aos resíduos de histidina nas RNAses, inativando-as. É eficaz na preparação de soluções livres de RNAses e amplamente utilizado em laboratórios. Portanto, esta é uma medida eficaz.
D - Expor a vidraria a altas temperaturas: Aquecer a vidraria a 200°C por várias horas é um método eficaz para destruir RNAses, garantindo que o equipamento utilizado não seja uma fonte de contaminação. Assim, esta estratégia é eficaz para proteção do RNA.
E - Trabalhar com luvas: Usar luvas durante a manipulação das amostras reduz a contaminação com RNAses das mãos do operador. Essa prática higiênica é essencial em biologia molecular e constitui uma medida eficaz de proteção.
Ao analisar as alternativas, percebe-se que a única abordagem ineficaz listada é o aquecimento das amostras, destacando a importância de reconhecer métodos cientificamente validados para proteger o RNA.
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