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Q568736 Biomedicina - Análises Clínicas
O principal problema na extração de RNA é a presença da enzima RNAse, responsável pela degradação do RNA. Esta enzima, na maioria das vezes, é derivada do próprio tecido de onde se objetiva a extração de RNA, mas também pode ser resultado de uma contaminação externa.

Selecione a alternativa que descreve uma forma ineficaz de proteção do RNA da ação das RNAses durante a extração. 
Alternativas

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O tema central desta questão é a proteção do RNA contra a degradação por RNAses durante o processo de extração. Este é um aspecto crucial em biologia molecular, pois as RNAses são enzimas altamente estáveis e resistentes, capazes de degradar rapidamente o RNA, prejudicando análises posteriores.

A resposta correta, que descreve uma forma ineficaz de proteção do RNA, é a alternativa B. Vamos entender por quê:

Justificativa para a alternativa B: Aquecer as amostras biológicas a 80°C por 10 minutos é ineficaz na inativação de RNAses. Estas enzimas são termorresistentes e podem permanecer ativas mesmo após exposição a temperaturas elevadas por curtos períodos. Portanto, esse método não protege adequadamente o RNA durante a extração.


Análise das alternativas incorretas:

A - Utilizar proteínas inibidoras de RNAses: Existem proteínas comerciais que são eficazes em inibir a atividade catalítica das RNAses, protegendo assim o RNA durante a extração. Essa é uma prática comum e recomendada em laboratórios de biologia molecular.

C - Utilizar dietil pirocarbonato (DEPC): O DEPC é um agente que se liga aos resíduos de histidina nas RNAses, inativando-as. É eficaz na preparação de soluções livres de RNAses e amplamente utilizado em laboratórios. Portanto, esta é uma medida eficaz.

D - Expor a vidraria a altas temperaturas: Aquecer a vidraria a 200°C por várias horas é um método eficaz para destruir RNAses, garantindo que o equipamento utilizado não seja uma fonte de contaminação. Assim, esta estratégia é eficaz para proteção do RNA.

E - Trabalhar com luvas: Usar luvas durante a manipulação das amostras reduz a contaminação com RNAses das mãos do operador. Essa prática higiênica é essencial em biologia molecular e constitui uma medida eficaz de proteção.

Ao analisar as alternativas, percebe-se que a única abordagem ineficaz listada é o aquecimento das amostras, destacando a importância de reconhecer métodos cientificamente validados para proteger o RNA.

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Comentários

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A alternativa que descreve uma forma ineficaz de proteção do RNA da ação das RNAses durante a extração é a opção A, que sugere o uso de proteínas que inibem a ação das RNAses por inibir sua função catalítica. Isso porque, na realidade, a maioria das proteínas que inibem as RNAses não são eficazes em condições de extração de RNA e podem até mesmo prejudicar a qualidade do RNA extraído. As opções B e C são válidas e eficazes, pois o aquecimento das amostras biológicas pode inativar as RNAses e o DEPC pode degradar as enzimas. A alternativa D é impraticável e desnecessária, enquanto a opção E é importante para evitar contaminações, mas não é uma forma direta de proteger o RNA da ação das RNAses.

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