Tema central: a descrição aborda a amplificação seletiva de um trecho específico de DNA a partir de poucas cópias, aumentando sua detecção e análise — conceito-chave da PCR (Reação em Cadeia da Polimerase). Em Medicina, a PCR é pilar para diagnóstico de infecções (ex.: SARS-CoV-2, TB), identificação de mutações germinativas/somáticas e aplicações forenses.

Gabarito correto: C — PCR

Justificativa: A PCR promove amplificação exponencial de uma sequência-alvo por ciclos de desnaturação–anelamento–extensão, usando primers específicos e uma DNA polimerase termoestável (ex.: Taq). Assim, poucas cópias tornam-se milhões, permitindo análise mesmo em amostras escassas ou degradadas, como na prática forense (STRs e mtDNA). Em diagnóstico clínico, sua alta sensibilidade e especificidade são amplamente reconhecidas (UpToDate; WHO/OMS em protocolos de RT-PCR para vírus respiratórios; Harrison’s).

Por que as demais estão incorretas?

A) Southern blot: técnica de detecção de DNA após digestão por enzimas de restrição, eletroforese e hibridização com sonda marcada. Não amplifica DNA; exige maior quantidade e boa integridade do material. Útil para confirmar presença/tamanho de fragmentos, não para multiplicá-los.

B) RFLP: avalia polimorfismos de comprimento após corte por enzimas de restrição. Requer DNA íntegro e quantidade considerável. Não envolve amplificação; por isso foi amplamente substituída por PCR em genética forense e clínica.

D) PAGE: eletroforese em gel de poliacrilamida é uma técnica de separação de ácidos nucleicos ou proteínas por tamanho/resolução fina. Não replica DNA; frequentemente é usada após PCR para analisar produtos, mas não realiza a amplificação.

Estratégia para a prova: ao ler “amplificação de poucas cópias para muitas” e “sequência específica”, associe imediatamente a PCR. Cuidado com a pegadinha: RFLP e Southern lidam com DNA e sondas/enzimas, mas não amplificam; PAGE apenas separa moléculas.

Referências úteis: UpToDate – Clinical applications of PCR; WHO – Laboratory testing for COVID‑19 (RT-PCR); Harrison’s Principles of Internal Medicine – Molecular diagnostics; Sambrook & Russell – Molecular Cloning (princípios técnicos).

Conclusão: a única técnica que replica um segmento específico de DNA para aumentar sua quantidade e viabilizar análises, inclusive forenses, é a PCR.

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