Tema central: Controle de qualidade em cultivo celular. Crescimento atípico sugere deriva/clonalidade anômala, contaminação (ex.: mycoplasma) ou transformação. A conduta deve identificar a causa antes de intervir, preservando a integridade e a reprodutibilidade do experimento.

Alternativa correta: C – Realizar uma análise genômica para identificar mutações. Essa é a abordagem mais adequada para diagnosticar a origem do fenótipo atípico, distinguindo entre autenticação/identidade da linhagem (perfilagem STR), instabilidade cromossômica (cariótipo) e mutações adquiridas (painéis por NGS). Com o achado, decide-se por retornar ao banco-mestre, descartar a cultura contaminada/derivada ou padronizar passagens. Boas práticas de ATCC e ICLAC recomendam autenticação por STR e teste de mycoplasma como rotina diante de alterações fenotípicas (ATCC Cell Authentication; ICLAC Recommendations). O OECD GIVIMP reforça investigar causa raiz antes de alterar condições de cultivo.

Por que as demais estão incorretas?

• A – Aumentar a densidade celular: não diagnostica a causa e pode selecionar subclones agressivos, alterar sinalização por contato, causar hipóxia/escassez de nutrientes e piorar a deriva. É intervenção empírica e não controlada.
• B – Adicionar nutrientes sem considerar o meio: fere o princípio de meio definido e controle experimental; pode mascarar o problema, introduzir variáveis de confusão e comprometer reprodutibilidade. Diretrizes (ATCC, GIVIMP) desencorajam “suplementação aleatória”.
• D – Modificar a matriz extracelular: a ECM regula adesão/diferenciação e muda o fenótipo, mas não corrige mutações ou contaminação. Introduz nova condição experimental sem abordar a causa raiz.

Estratégia de prova: Diante de “crescimento atípico”, priorize investigação e autenticação (genômica/STR, cariótipo, teste de mycoplasma) antes de qualquer modificação do sistema. Opções que “mexem no ambiente” sem diagnóstico prévio costumam ser armadilhas.

Termos-chave rápidos: STR profiling: impressão digital genética para confirmar identidade da linhagem. Cariótipo: análise de cromossomos para aneuploidias/instabilidade. NGS: detecta mutações somáticas. Mycoplasma: contaminação comum que altera crescimento e expressão gênica.

Referências úteis: ATCC Cell Culture Guidelines e Authentication; ICLAC (cell line authentication); OECD GIVIMP (boas práticas in vitro).

Gabarito: C.

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