Assinale:
Algumas técnicas bioquímicas diretas podem ser usadas em identificações preliminares diretamente a partir de colônias de bactérias selecionadas em meios de cultura.
Sobre os testes de ensaios direto que podem ser realizados em colônias isoladas em placas de cultura, analise as afirmativas a seguir.
I. No teste da catalase, algumas gotas de peróxido de hidrogênio a 3% são colocadas diretamente sobre a colônia e a rápida efervescência indica produção de oxigênio molecular e um teste positivo. Esse teste é freqüentemente utilizado para diferenciar estafilococos (positivo) de estreptococos (negativo) ou Clostridium tertium (positivo) de Bacillus spp. (negativo).
II. No teste da citocromo oxidase, o diidrocloreto de ρ-fenilenodiamino, que substitui o oxigênio como aceptor artificial de elétrons, é usado. Na técnica direta, duas a três gotas do reagente são adicionadas nas colônias e a cor azul é indicativa da atividade de citocromo oxidase e de um teste positivo. O teste é útil para a classificação preliminar de Pseudomonas spp., Aeromonas spp. e Pasteurella spp. todas oxidase positivas.
III. O teste de indol se baseia na formação de um complexo vermelho. O complexo se forma quando o indol, um dos produtos da degradação metabólica do triptofano, reage com o grupo aldeído do ρ-dimetilaminobenzaldeído. Nos testes rápidos, tiras reativas impregnadas com o reagente ρ-dimetilaminobenzaldeído, representado pelos reativos de Kovacs ou Ehrlich, são usadas. Para esse teste, podemos utilizar cepas de Escherichia coli como controle negativo e cepas de Klebsiella pneumoniae como controle positivo.
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Tema central da questão: O foco da questão é a interpretação de testes bioquímicos diretos em Microbiologia, usados para identificar preliminarmente bactérias a partir de colônias isoladas em meios de cultura—procedimento essencial para o trabalho do biólogo na área de análises clínicas.
Justificativa da alternativa correta (B):
A afirmativa II descreve corretamente o teste da citocromo oxidase. O reagente diidrocloreto de ρ-fenilenodiamino serve como aceptor de elétrons e, em contato com bactérias como Pseudomonas, Aeromonas, e Pasteurella (todas oxidase positivas), resulta numa coloração azul, indicando teste positivo (Murray PR et al., Manual of Clinical Microbiology).
Análise das alternativas incorretas:
I. O teste da catalase realmente diferencia estafilococos (catalase positivos) de estreptococos (catalase negativos). No entanto, o erro está no exemplo citado: Clostridium tertium é catalase negativo, enquanto as espécies do gênero Bacillus costumam ser catalase positivas (Murray PR et al.). Essa inversão compromete a confiabilidade da alternativa.
III. O teste do indol baseia-se na formação do composto vermelho com reagentes como de Kovacs ou Ehrlich frente ao indol produzido da degradação do triptofano. Porém, há um equívoco nos controles citados: Escherichia coli deve ser controle positivo (pois é produtora de indol), enquanto Klebsiella pneumoniae é tipicamente controle negativo (não produtora de indol). Essa inversão torna a alternativa incorreta (Murray PR et al., UpToDate).
Estratégia para provas: Sempre confira associações entre bactérias e características bioquímicas nos livros referência (Manual of Clinical Microbiology, Murray PR et al.)—erros nesses detalhes são recorrentes em provas.
Dica prática: Em exames, atenção redobrada à ordem das bactérias e sua relação correta com os resultados dos testes!
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