Nos Serviços médicos oficiais, aconselha-se hoje usar como rotina o teste VDRL (Venereal Disease Research Laboratory test) ou o RPR (reagina plasmática rápida), ou outro equivalente. Os resultados positivos nesses testes de triagem devem ser confirmados pelo uso do FTA-ABS (absorção do anticorpo fluorescente treponêmico) ou do TPHA (microaglutinação para o Treponema pallidum), ou outro teste confirmatório, aplicável ao soro e não ao líquor.

As provas com antígenos não treponêmicos podem se apresentar reativas na ausência total de sífilis, em várias afecções agudas ou crônicas. Os resultados reativos não indicam necessariamente que o paciente tenha sífilis, revelam apenas a presença de uma substância, a reagina, combinada ao antígeno, produzindo a floculação. 

O diagnóstico específico da sífilis é feito por provas com antígenos treponêmicos que demonstram anticorpos diretamente relacionado com o T. pallidum.

A sífilis do sistema nervoso central é melhor diagnosticada no líquor pelas técnicas que utilizam antígenos treponêmicos, não se recomendando o uso de testes não treponêmicos.

No período primário da sífilis, as reações sorológicas só se tornam reativas algum tempo depois do aparecimento da lesão inicial, isto é, após a formação dos anticorpos IgM.