Uma amostra de swab de nasofaringe foi submetida a um RT-PCR
para pesquisa de SARS-Cov-2, o agente etiológico da Covid-19.
A reação resultou inválida.
Sobre a interpretação de um resultado inválido em um teste de
PCR, analise as afirmativas a seguir.
I. A presença de inibidores na amostra pode ter bloqueado a
reação de amplificação, tanto para o controle interno da
reação como para o alvo pesquisado.
II. A concentração de RNA está em uma faixa limítrofe ou zona
cinzenta, não permitindo diferenciar com acurácia o negativo
e o positivo.
III. Provavelmente decorre de uma infecção recente, onde a
presença de baixos níveis de ácidos nucléicos não permite
excluir a ausência de infecção.
Está correto o que se afirma em

Question

Uma amostra de swab de nasofaringe foi submetida a um RT-PCR
para pesquisa de SARS-Cov-2, o agente etiológico da Covid-19.
A reação resultou inválida.
Sobre a interpretação de um resultado inválido em um teste de
PCR, analise as afirmativas a seguir.
I. A presença de inibidores na amostra pode ter bloqueado a
reação de amplificação, tanto para o controle interno da
reação como para o alvo pesquisado.
II. A concentração de RNA está em uma faixa limítrofe ou zona
cinzenta, não permitindo diferenciar com acurácia o negativo
e o positivo.
III. Provavelmente decorre de uma infecção recente, onde a
presença de baixos níveis de ácidos nucléicos não permite
excluir a ausência de infecção.
Está correto o que se afirma em  Alternativa A: I, apenas. Ou Alternativa B: II, apenas. Ou Alternativa C: I e II, apenas.  Ou Alternativa D: I e III, apenas.  Ou Alternativa E: I, II e III.

Qconcursos · Accepted Answer

Alternativa [A] I, apenas. Tema central: 
A questão aborda interpretação de resultados inválidos em RT-PCR, exame crucial para o diagnóstico de SARS-CoV-2. Compreender as possíveis causas desse resultado é essencial para assegurar a qualidade e a confiabilidade diagnóstica nos laboratórios de patologia clínica.

Justificativa da alternativa correta — Letra A (Apenas I): 
A alternativa correta reconhece que a presença de inibidores na amostra pode impedir tanto a amplificação do controle interno quanto do alvo viral. Substâncias como hemoglobina, muco, ou resíduos químicos da coleta/armazenamento interferem na reação de PCR, bloqueando a polimerase ou degradando o RNA, como destacado pela literatura (UpToDate; Manual de Biossegurança em Laboratórios, OMS, 4ª ed., p. 52-53). 
Segundo protocolos laboratoriais, “Resultados inválidos sugerem falha técnica, frequentemente por inibição da reação, devendo-se repetir o exame com nova amostra” (Ministério da Saúde, Nota Técnica 97/2020).

Análise das alternativas incorretas:

II. Incorreta: 
A faixa limítrofe (“zona cinzenta”) na concentração de RNA (carga viral baixa) pode gerar resultados indeterminados ou inconclusivos, mas não inválidos. Em um resultado inválido, ocorre falha técnica na amplificação (controles e alvo), o que difere do simples resultado duvidoso.

III. Incorreta: 
A baixa presença de ácidos nucleicos em um quadro inicial de infecção pode produzir resultado falso-negativo, mas ainda assim o controle interno deveria amplificar. Um resultado realmente inválido é aquele no qual nenhum controle amplifica, apontando para problemas metodológicos ou inibidores, não pela fase precoce da doença.

Estratégia para provas:
Fique atento a termos técnicos precisos (“inválido” x “indeterminado” x “negativo/falso-negativo”), que frequentemente diferenciam as alternativas. Em concursos, muitos erram por não distinguir falha técnica (RT-PCR inválido) de limitações biológicas do teste.

Resumo: Apenas a alternativa I está correta, e as opções II e III confundem conceitos laboratoriais importantes segundo normas e obras de referência como Harrison’s Principles of Internal Medicine (20ª ed.).

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