Questões de Técnicas em Laboratório - Microbiologia nas Técnicas em Laboratório para Concurso - Página 42

Q575517

Ano: 2010 Banca: FGV Órgão: FIOCRUZ Prova: FGV - 2010 - FIOCRUZ - Tecnologista em Saúde - Biologia Molecular de Microorganismos |

Q575517 Técnicas em Laboratório

Para visualização e análise da expressão do gene toxH de uma bactéria, tem-se em mãos um fragmento de DNA com a região codificante de toxH e um outro fragmento do gene gfp para uma proteína fluorescente verde, como apresentado abaixo.

As sequências relativas aos códons de cada gene estão sublinhadas.

Fita + do fragmento com toxH: 5' CCT ATG CCA AAT ... CCT TGA CCC

Fita + do fragmento com gfp: 5' GGG ATG AGT AAA ... GTT TAA TTC

Para criar um gene bacteriano capaz de codificar uma proteína híbrida ToxH verde fluorescente e ter o Gfp na porção NH₂ desta proteína híbrida, a sequência da região codificante deste gene híbrido, deve ser:

A

5'GGG ATG AGT AAA ... GTT TAA TTC CCT ATG CCA AAT...CCT TGA CCC

B

5'GGG ATG AGT AAA ... GTT ATG CCA AAT ... CCT TGA CCC

C

5'GGG ATG AGT AAA ... GTT TAA ATG CCA AAT...CCT TGA CCC

D

5'CCT ATG CCA AAT...CCT TGA ATG AGT AAA ... GTT TAA TTC

E

5'CCT ATG CCA AAT...CCT ATG AGT AAA ... GTT TAA TTC

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Q575379

Ano: 2010 Banca: FGV Órgão: FIOCRUZ Prova: FGV - 2010 - FIOCRUZ - Tecnologista em Saúde - Biotecnologia em Animais de Laboratório II |

Q575379 Técnicas em Laboratório

Analise as afirmativas a seguir que tratam do método de criopreservação denominado de vitrificação.

I. A vitrificação é um processo ultra-rápido, porém também envolve a passagem por várias temperaturas de congelamento, como no método de congelamento lento, mas sem a ocorrência de cristalização dos meios.

II. A vitrificação está baseada na geração de uma rápida desidratação celular com a utilização de uma solução com concentração de crioprotetor por volta de 40% e o crioprotetor mais utilizado neste método é o etilenoglicol.

III. A permeação dos crioprotetores é considerada essencial na vitrificação, pois podem levar à toxicidade celular dependendo do tempo de exposição e da temperatura.

Assinale:

A

se somente a afirmativa I estiver correta.

B

se somente a afirmativa II estiver correta.

C

se somente a afirmativa III estiver correta.

D

se somente as afirmativas II e III estiverem corretas.

E

se todas as afirmativas estiverem corretas.

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Q575375

Ano: 2010 Banca: FGV Órgão: FIOCRUZ Prova: FGV - 2010 - FIOCRUZ - Tecnologista em Saúde - Biotecnologia em Animais de Laboratório II |

Q575375 Técnicas em Laboratório

Com relação aos princípios básicos da criopreservação, analise as afirmativas a seguir. I. A criopreservação consiste na manutenção do material biológico a baixas temperaturas, basicamente em nitrogênio líquido a –196 °C. II. A capacidade do material biológico de sobreviver ao processo de criopreservação depende de sua tolerância aos agentes crioproterores, desidratação, resfriamento e reaquecimento. III. Embora os recentes avanços tenham levado a altas taxas de desenvolvimento embrionário pós-criopreservação, o comportamento das células submetidas a essas variáveis ainda é fonte de investigação na área da criobiologia. Assinale:

A

se somente a afirmativa I estiver correta.

B

se somente a afirmativa II estiver correta.

C

se somente a afirmativa III estiver correta.

D

se somente as afirmativas I e II estiverem corretas.

E

se todas as afirmativas estiverem corretas.

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Q575362

Ano: 2010 Banca: FGV Órgão: FIOCRUZ Prova: FGV - 2010 - FIOCRUZ - Tecnologista em Saúde - Biotecnologia em Animais de Laboratório II |

Q575362 Técnicas em Laboratório

Sobre crioprotetores, assinale a alternativa incorreta.

A

Para otimizar a sobrevivência das células ao processo de criopreservação, são utilizadas substâncias crioprotetoras. Estas substituem a água do interior das células, baixam o ponto de fusão da solução e protegem as membranas e a integridade relativa da célula.

B

Os crioprotetores não permeáveis ou extracelulares, podem ser de baixo peso molecular como a sacarose, rafinose e galactose, ou de alto peso molecular como a albumina sérica bovina e o ficoll.

C

Com relação aos crioprotetores permeáveis ou intracelulares, são conhecidos o dimetilsulfóxido (DMSO), o glicerol, o propilenoglicol e o etilenoglicol.

D

A permeabilidade da membrana plasmática é uma propriedade de grande importância, porque a entrada na célula dos crioprotetores é fundamental para o sucesso da criopreservação de embriões e gametas.

E

A característica mais importante e que deve ser considerada para os crioprotetores, refere-se à sua toxicidade, pois esta característica limita a concentração em que este pode ser utilizado antes do resfriamento. Com relação à produção de injúrias, como, por exemplo, a lesão das membranas, os crioprotetores não interferem, sendo o método de criopreservação diretamente responsável por este aspecto.

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Q573915

Ano: 2010 Banca: FGV Órgão: FIOCRUZ Prova: FGV - 2010 - FIOCRUZ - Tecnologista em Saúde - Desenvolvimento de Insumos Biológicos para a Saúde |

Q573915 Técnicas em Laboratório

O ibritumomabe é um anticorpo monoclonal utilizado no tratamento do Linfoma não-Hodgkin. Tal anticorpo se liga a um antígeno da superfície de linfócitos B, o CD-20. Após se ligar à célula transformada, o anticorpo dispara uma resposta citotóxica e apoptótica que acaba por matar tais células. Em relação ao protocolo de preparo desse anticorpo é importante destacar que é essencial a presença de uma molécula conjugada chamada de tiuxetana que na verdade é um quelante com alta afinidade pelo radioisótopo.

A

Indium.

B

Trítio.

C

Carbono.

D

Chumbo.

E

Iodo.

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Q573914

Ano: 2010 Banca: FGV Órgão: FIOCRUZ Prova: FGV - 2010 - FIOCRUZ - Tecnologista em Saúde - Desenvolvimento de Insumos Biológicos para a Saúde |

Q573914 Técnicas em Laboratório

De forma que os anticorpos possam ser utilizados como ferramentas de detecção de antígenos específicos em métodos de análise em laboratório, se faz necessária a sua conjugação à grupamentos que permitam, através de um sistema acoplado, a sua detecção por métodos normalmente químicos. Em alguns casos, pode-se conjugar o anticorpo monoclonal a uma molécula que possa ser detectada por microscopia de florescência. Esse é o caso do isotiocianato de fluoresceína (FITC). O FITC ligado a imunogloblulina pode ser separado do FITC não ligado por um método cromatográfico. Sobre o tema, assinale a alternativa correta.

A

Em geral, o FITC se ligará durante a reação de conjugação ao aminoácido valina presente na imunoglobulina.

B

Em geral, o FITC se ligará durante a reação de conjugação ao aminoácido lisina presente na imunoglobulina.

C

Em geral, o FITC se ligará durante a reação de conjugação ao aminoácido glutamato presente na imunoglobulina.

D

Em geral, o FITC se ligará durante a reação de conjugação ao aminoácido aspartato presente na imunoglobulina.

E

Em geral, o FITC se ligará durante a reação de conjugação ao aminoácido glicina presente na imunoglobulina.

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Q573913

Ano: 2010 Banca: FGV Órgão: FIOCRUZ Prova: FGV - 2010 - FIOCRUZ - Tecnologista em Saúde - Desenvolvimento de Insumos Biológicos para a Saúde |

Q573913 Técnicas em Laboratório

O meio HAT (H, hipoxantina. A, aminopterina. T, timidina) amplamente usado na preparação de hibridomas tem como racional de seu funcionamento as alternativas a seguir exceto:

A

para sobreviver no meio HAT, os hibridomas corretamente fusionados devem apresentar a atividade da hipoxantina fosforibosiltranferase.

B

para sobreviver no meio HAT, os hibridomas corretamente fusionados devem apresentar a atividade da timidina quinase.

C

o uso da aminopterina se deve pelo fato desse composto acelerar a síntese de novo de nucleosídeos nas células não fusionadas.

D

a hipoxantina ribosil transferase catalisa a formação de inosina monofosfato a partir de hipoxantina.

E

a hipoxantina ribosil transferase catalisa a formação de guanosina monofosfato a partir de guanina.

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Q573912

Ano: 2010 Banca: FGV Órgão: FIOCRUZ Prova: FGV - 2010 - FIOCRUZ - Tecnologista em Saúde - Desenvolvimento de Insumos Biológicos para a Saúde |

Q573912 Técnicas em Laboratório

Proteína A e Proteína G são proteínas de bactérias com grande aplicação em pesquisa básica e largamente utilizadas em experimentos de imunoprecipitação. No entanto, cada uma dessas proteínas possui afinidades diferentes por categorias de anticorpos diferentes e obtidos de diferentes espécies animais. Sobre o uso experimental de tais proteínas em imunologia, assinale a alternativa incorreta.

A

O uso de proteína G ao invés de proteína A é recomendado quando se lida com anticorpos de camundongo do tipo IgG₁.

B

A proteína A não se liga à algumas subclasses de IgG, por exemplo a IgG₃ humana.

C

A proteína G possui um número maior de sítios de ligação para a porção Fc dos anticorpos do que a proteína A.

D

A proteína A é produzida pela bacéria Staphylococcus aureus.

E

Uma outra proteína ligadora de IgGs é a proteína L produzida por Peptostreptococcus magnus.

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Q573911

Ano: 2010 Banca: FGV Órgão: FIOCRUZ Prova: FGV - 2010 - FIOCRUZ - Tecnologista em Saúde - Desenvolvimento de Insumos Biológicos para a Saúde |

Q573911 Técnicas em Laboratório

Anticorpos são ferramentas poderosas em uma série de estudos em biotecnologia. Frequentemente, o pesquisador se depara com o dilema de preparar ou adquirir anticorpos para seus estudos. Nesse caso, o dilema reside na escolha entre anticorpos monoclonais ou anticorpos policlonais. Sobre as características gerais desses anticorpos, assinale a alternativa incorreta.

A

Anticorpos policlonais podem ser gerados muito mais rapidamente, com menos custo operacional e dispondo-se de menores habilidades técnicas do que monoclonais.

B

A principal vantagem dos anticorpos monoclonais está em sua monoespecificidade. Tais anticorpos são capazes de discriminar entre estados conformacionais, níveis de fosforilação ou interações proteína-proteína.

C

A capacidade de reconhecimento de vários epítopos diferentes por um anticorpo policlonal é uma desvantagem para aqueles casos em que os antígenos podem sofrer pequenas variações estruturais ao longo do tempo.

D

Uma vez que um determinado hibridoma for estabelecido, um anticorpo monoclonal específico pode ser continuamente gerado de forma praticamente constante e renovável.

E

Algumas das desvantagens de anticorpos monoclonais podem ser superadas utilizando-se múltiplos anticorpos monoclonais para o mesmo antígeno.

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Q573907

Ano: 2010 Banca: FGV Órgão: FIOCRUZ Prova: FGV - 2010 - FIOCRUZ - Tecnologista em Saúde - Desenvolvimento de Insumos Biológicos para a Saúde |

Q573907 Técnicas em Laboratório

Sobre a conjugação do composto fluorescente, Texas Red, a um anticorpo, assinale a alternativa incorreta.

A

A conjugação do composto fluorescente ao Texas Red ocorre inicialmente.

B

A imunoglobulina sofre um tratamento com DTT para expor os grupamentos sulfidrila.

C

A imunoglobulina precisa ser separada do DTT livre após a reação de exposição dos grupamentos sulfidrila.

D

É necessário conjugar a proteína fluorescente à imunoglobulina.

E

O reagente n-etilmaleimida é usado após a conjugação da proteína fluorescente à imunoglobulina para clivar os grupamentos metil ainda disponíveis no anticorpo.

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Q573902

Ano: 2010 Banca: FGV Órgão: FIOCRUZ Prova: FGV - 2010 - FIOCRUZ - Tecnologista em Saúde - Desenvolvimento de Insumos Biológicos para a Saúde |

Q573902 Técnicas em Laboratório

A fusão de proteínas com uma cauda de histidina é comumente empregada na tecnologia recombinante para facilitar a produção, a purificação, e a detecção de uma proteína de interesse. O primeiro passo neste processo é a inserção de uma seqüência que codifica de quatro a dez histidinas consecutivas na região N- ou C-terminal do gene da proteína a ser expressa. A proteína então passa a ter um tag de histidina fusionada a ela e esta proteína de fusão pode ser facilmente purificada usando uma cromatografia de afinidade cuja resina é imobilizada com metal.
Com base nessa informação, assinale alternativa correta.

A

Após a clarificação, o produto só deve ser aplicado numa coluna de afinidade contendo resina imobilizada com níquel, em tampão contendo imidazol.

B

Após a clarificação, o produto pode ser aplicado numa cromatografia em coluna de afinidade contendo resina imobilizada com níquel ou cobalto.

C

A interação da histidina com o metal é tão eficiente que a clarificação é um passo dispensável.

D

A poli-histidina interage com os íons de cobre e enxofre com afinidade de micromolar.

E

Tampões contendo imidazol são usados para estabilizar a coluna.

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Q573898

Ano: 2010 Banca: FGV Órgão: FIOCRUZ Prova: FGV - 2010 - FIOCRUZ - Tecnologista em Saúde - Desenvolvimento de Insumos Biológicos para a Saúde |

Q573898 Técnicas em Laboratório

O gene da proteína KLM04 foi inserido no plasmídeo de expressão pGEX-2T, que expressa a proteína recombinante em fusão com a GST (Glutationa-S-Transferase) uma enzima de 25,8 kDa. Essas proteínas de fusão são normalmente produzidas em quantidade apreciável por Escherichia coli e são facilmente purificáveis, por cromatografia em coluna de afinidade. Com bases nestas informações, assinale a alternativa correta.

A

O vetor pGEX-2T tem o promotor tac, um promotor forte induzido com IPTG, e que, portanto, produz níveis elevados da proteína de fusão KLM04/GST.

B

A coluna de afinidade contém resina conjugada à trombina.

C

A proteína de KLM04 não pode ser isolada da GST por meio da clivagem por trombina

D

A fusão com KLM04 favorece a interação da GST com glutationa

E

O vetor pGEX-2T tem o promotor bac, um promotor forte induzido com IPTG e que, portanto, produz níveis elevados da proteína de fusão KLM04/GST.

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Q573892

Ano: 2010 Banca: FGV Órgão: FIOCRUZ Prova: FGV - 2010 - FIOCRUZ - Tecnologista em Saúde - Desenvolvimento de Insumos Biológicos para a Saúde |

Q573892 Técnicas em Laboratório

Considerando que a proteína de interesse é expressa em levedura Pichia pastoris e que o vetor de expressão usado é pPIC9K, o indutor da expressão é:

A

o metanol, adicionado a cada 12 horas, com ampicilina como marcador de seleção.

B

o butanol, adicionado a cada 24 horas, com kananmicina como marcador de seleção.

C

o etanol, adicionado a cada 12 horas, com ampicilina como marcador de seleção.

D

o metanol, adicionado a cada 24 horas, com kanamicina como marcador de seleção

E

o butanol, adicionado a cada 12 horas, com ampicilina como marcador de seleção.

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Q573891

Ano: 2010 Banca: FGV Órgão: FIOCRUZ Prova: FGV - 2010 - FIOCRUZ - Tecnologista em Saúde - Desenvolvimento de Insumos Biológicos para a Saúde |

Q573891 Técnicas em Laboratório

Considerando que a proteína é XK14 é secretada para o meio de cultura e que a expressão máxima é obtida após 70 horas, é correto afirmar que os passos de purificação iniciais serão:

A

lise celular, clarificação. purificação em coluna de afinidade, análise em SDS-PAGE.

B

lise celular, ajuste de pH da amostra para pH 6,0, purificação em coluna de troca aniônica, análise em SDS-PAGE.

C

clarificação, ajuste de pH da amostra para pH 6,0, purificação em coluna de troca catiônica, análise em SDS-PAGE.

D

clarificação, ajuste do pH da amostra para pH 8,0, purificação em coluna de troca aniônica, análise em SDS-PAGE.

E

lise celular, ajuste de pH da amostra para pH 6,0, purificação em coluna de troca catiônica, análise em SDS-PAGE.

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Q573633

Ano: 2010 Banca: FGV Órgão: FIOCRUZ Prova: FGV - 2010 - FIOCRUZ - Tecnologista em Saúde - Desenvolvimento de Vacinas Bacterianas |

Q573633 Técnicas em Laboratório

Texto associado

O desenvolvimento de vacinas efetivas baseadas no sorogrupo B de Neisseria meningitidis é complicado devido à baixa imunogenicidade dos polissacarídeos. Consequentemente, a pesquisa de vacinas contra o sorogrupo B tem sido focada principalmente em proteínas subcapsulares contidas em vesículas da membrana externa (VME). A proteína porA da membrana externa foi identificada com o maior indutor e alvo de anticorpos bactericidas no sangue e é expressa em quase todos os meningococos, sendo uma grande candidata para o desenvolvimento de vacinas. Contudo, porA parece ser heterogênea, necessitando do desenvolvimento de uma vacina multivalente em que vários subtipos de porA estão presentes para que se possa conseguir proteção suficiente. No Instituto de vacinas da Holanda, uma vacina baseada em diferentes subtipos de porA contidas em VMEs está em estágio avançado de desenvolvimento e vai passar para a fase I de estudos de testes clínicos. Para conseguir alcançar a demanda esperada para o produto, o processo biofarmacêutico de produção está sendo escalonado.

Sabendo-se da importância da padronização da transferência de escala de um processo, assinale a alternativa correta.

A

A informação sobre a cinética relacionada ao metabolismo do microrganismo é independente da escala (para um dado pH, concentração de oxigênio dissolvido, temperatura, composição do meio e qualidade do material presente no meio) e não precisa ser levada em consideração.

B

A transferência de escala é um procedimento para o desenho e construção de um sistema em pequena escala com base nos resultados de experimentos em larga escala.

C

Para minimizar problemas durante a transferência de escala na produção de vacinas, é necessário existir um processo em pequena escala com condições de cultura estabelecidas em meio complexo.

D

A regra para escalonamento em biorreatores é diferente das regras para transferência de escala em reatores químicos, sendo baseada em parâmetros que podem ser mantidos constantes entre escalas.

E

Aumentando-se a escala, o tempo de um processo de cultivo aeróbico diminui e pode levar, por exemplo a baixas concentrações de oxigênio dissolvido ou a altas concentrações do agente controlador do pH em certas regiões do biorreator e, por isso, deve ser levados em consideração.

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Q573632

Ano: 2010 Banca: FGV Órgão: FIOCRUZ Prova: FGV - 2010 - FIOCRUZ - Tecnologista em Saúde - Desenvolvimento de Vacinas Bacterianas |

Q573632 Técnicas em Laboratório

Texto associado

Um experimento típico de imunoblote consiste de cinco passos inter-relacionados. Analise as seguintes afirmativas que enumeram os passos que fazem parte do procedimento.

I. Imobilização de proteínas na superfície de uma membrana de nylon.

II. Visualização das proteínas de interesse na membrana utilizando anticorpos secundários específicos para as mesmas.

III. Saturação de sítios de ligação de proteínas não ocupados na membrana.

Assinale:

A

se somente a afirmativa III estiver correta.

B

se somente a afirmativa I estiver correta.

C

se somente a afirmativa II estiver correta.

D

se somente as afirmativas I e III estiverem corretas.

E

se somente as afirmativas II e III estiverem corretas.

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Q573605

Ano: 2010 Banca: FGV Órgão: FIOCRUZ Prova: FGV - 2010 - FIOCRUZ - Tecnologista em Saúde - Diagnóstico Bacteriológico |

Q573605 Técnicas em Laboratório

Yersinia pestis possui uma série de fatores de virulência com propriedades anti-fagocíticas, dentre os quais não está:

A

Yops (Yersinia outer proteins).

B

antígeno LcrV (Low-calcium-response V).

C

Pla (Plasminogen activator).

D

antígeno F1.

E

antígeno W.

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Q573602

Ano: 2010 Banca: FGV Órgão: FIOCRUZ Prova: FGV - 2010 - FIOCRUZ - Tecnologista em Saúde - Diagnóstico Bacteriológico |

Q573602 Técnicas em Laboratório

As proteínas das famílias Cry e Cyt com atividade inseticida, produzidas por Bacillus thuringiensis, são denominadas:

A

α-exotoxinas.

B

VIPs (Vegetative insecticidal proteins).

C

δ-endotoxinas.

D

Thuringiensinas.

E

β- exotoxinas.

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Q573595

Ano: 2010 Banca: FGV Órgão: FIOCRUZ Prova: FGV - 2010 - FIOCRUZ - Tecnologista em Saúde - Diagnóstico Bacteriológico |

Q573595 Técnicas em Laboratório

Os plasmídios de virulência pXO1 e pXO2, encontrados principalmente em Bacillus anthracis, carreiam genes responsáveis pela expressão de:

A

cápsula e toxinas, em ambos.

B

cápsula, em ambos.

C

toxinas, em ambos.

D

cápsula e toxina, respectivamente.

E

toxinas e cápsula, respectivamente.

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Q573594

Ano: 2010 Banca: FGV Órgão: FIOCRUZ Prova: FGV - 2010 - FIOCRUZ - Tecnologista em Saúde - Diagnóstico Bacteriológico |

Q573594 Técnicas em Laboratório

Na metodologia de PCR em tempo real (Real Time - Polymerase Chain Reaction), o sistema de detecção que permite a medição da fluorescência em qualquer etapa do ciclo de amplificação emprega:

A

SYBR Green I,

B

Sondas de Hibridização FRET (Fluorescence Resonance Energy Transfer),

C

Sonda TaqMan,

D

Molecular Beacon,

E

Sondas LightCycler,

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