O meio HAT (H, hipoxantina. A, aminopterina. T, timidina) am...

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Q573913 Técnicas em Laboratório
O meio HAT (H, hipoxantina. A, aminopterina. T, timidina) amplamente usado na preparação de hibridomas tem como racional de seu funcionamento as alternativas a seguir exceto:
Alternativas

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O tema central da questão é o funcionamento do meio HAT, que é amplamente utilizado na preparação de hibridomas. Os hibridomas são células híbridas formadas pela fusão de uma célula de mieloma com uma célula B produtora de anticorpos. O meio HAT é um meio seletivo que permite a sobrevivência apenas das células fusionadas corretamente.

As substâncias presentes no meio HAT são:

  • Hipoxantina: Um precursor de nucleotídeos que pode ser utilizado em vias de resgate de nucleotídeos.
  • Aminopterina: Um inibidor da via de novo de síntese de nucleotídeos.
  • Timidina: Utilizada na via de resgate para a síntese de DNA.

Para sobreviver no meio HAT, as células devem ser capazes de utilizar as vias de resgate de nucleotídeos, já que a síntese de novo é bloqueada pela aminopterina.

Justificativa da alternativa correta (C): A alternativa correta é a C, pois afirma que "o uso da aminopterina se deve pelo fato desse composto acelerar a síntese de novo de nucleosídeos nas células não fusionadas". Isso está incorreto. Na verdade, a aminopterina inibe a síntese de novo de nucleotídeos, obrigando as células a dependerem das vias de resgate. Assim, apenas células que são capazes de realizar essa via de resgate, como os hibridomas corretamente fusionados, sobrevivem.

Análise das alternativas incorretas:

A) "Para sobreviver no meio HAT, os hibridomas corretamente fusionados devem apresentar a atividade da hipoxantina fosforibosiltranferase." - Essa afirmação é verdadeira. A enzima hipoxantina fosforibosiltranferase (HPRT) é essencial para a via de resgate e permite o uso da hipoxantina para a síntese de nucleotídeos.

B) "Para sobreviver no meio HAT, os hibridomas corretamente fusionados devem apresentar a atividade da timidina quinase." - Esta afirmação também é verdadeira. A timidina quinase é necessária para a utilização da timidina na via de resgate.

D) "A hipoxantina ribosil transferase catalisa a formação de inosina monofosfato a partir de hipoxantina." - Esta afirmação é correta. A HPRT converte hipoxantina em inosina monofosfato (IMP), que é um passo crucial na via de resgate.

E) "A hipoxantina ribosil transferase catalisa a formação de guanosina monofosfato a partir de guanina." - Esta afirmação também é correta. A HPRT converte guanina em guanosina monofosfato (GMP), sendo parte da via de resgate para purinas.

As alternativas A, B, D e E descrevem corretamente aspectos do funcionamento do meio HAT e o papel das enzimas nas vias de resgate de nucleotídeos, enquanto a alternativa C descreve incorretamente a ação da aminopterina.

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