Questões de Concurso
Sobre imunologia básica e clínica em farmácia
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A técnica de western blotting (Towbin et al. 1979; Burnette 1981; Towbin and Gordon 1984) também pode ser denominada protei n immunoblot e consiste na detecção de proteínas específicas em amostras de lisados celulares ou amostras de tecidos. Com base nessa técnica, julgue as afirmativas e marque a alternativa CORRETA.
I- Os passos para a elaboração dessa técnica podem ser resumidos em cinco etapas: (1) extração e quantificação das proteínas; (2) fracionamento das proteínas da amostra em um gel de poliacrilamida; (3) transferências dessas proteínas para uma membrana; (4) incubação da membrana com um anticorpo para detectar a proteína específica a ser analisada; e (5) revelação dessa membrana para análise dos dados.
II- Diversos métodos espectroscópicos são utilizados para quantificar proteínas em uma solução. O ensaio de Bradford é o mais utilizado e apresenta diversas vantagens em relação aos demais, como a rapidez, a não exigência de aquecimento e a alta sensibilidade para baixas concentrações de proteínas. O método de Bradford se baseia na mudança de cor do corante Coomassie Blue G-250, em solução ácida (cor azulada) para cor avermelhada na presença de proteínas. As interações hidrofóbicas e iônicas estabilizam o complexo proteína-corante.
III- Para separar as proteínas de uma amostra homogênea, a técnica mais utilizada é a eletroforese em gel de SDS-poliacrilamida (SDS-PAGE). Inicialmente prepara-se o gel de SDS-poliacrilamida, que será uma matriz inerte através da qual as proteínas poderão migrar. O gel é preparado pela polimerização de monômeros de acrilamida e o tamanho dos poros do gel pode ser ajustado variando a concentração da acrilamida adicionada para retardar a migração da sua proteína de interesse. As proteínas podem possuir cargas positivas ou negativas, dependendo das cargas dos aminoácidos que as compõem.
IV- Para visualizar uma proteína de interesse, é utilizado um anticorpo específico que vai reagir com um epítopo da proteína, formando um complexo anticorpoantígeno. Esse anticorpo é denominado anticorpo primário, que pode ser policlonal (reconhece mais de um epítopo) ou monoclonal (reconhece apenas um epítopo da proteína de interesse) e é geralmente obtido apenas em camundongo ou em coelho.
A propósito dos aspectos hematológicos nas infecções virais, julgue o próximo item.
Durante a primeira semana da infecção primária, os anticorpos
IgM específicos são encontrados no sangue e, no período de
um a três meses, tornam-se tipicamente indetectáveis.
Julgue o próximo item, relativo à infecção pelo vírus da dengue e às metodologias de prevenção e diagnóstico da doença.
A Dengvaxia, vacina para a dengue recentemente autorizada
para uso no Brasil, é resultante da combinação de alguns genes
dos diferentes sorotipos do vírus da dengue com o vírus
atenuado da febre amarela.
Julgue o próximo item, relativo à infecção pelo vírus da dengue e às metodologias de prevenção e diagnóstico da doença.
Os testes de diagnóstico rápido para a dengue detectam a
presença de anticorpos do tipo IgM no sangue do paciente e,
devido à baixa sensibilidade desses testes, é necessária
confirmação por métodos moleculares de amplificação de
ácidos nucleicos do vírus.
Julgue o próximo item, relativo à infecção pelo vírus da dengue e às metodologias de prevenção e diagnóstico da doença.
Ao contrário de outras viroses em que o paciente infectado
desenvolve memória imunológica e anticorpos protetores que
o protegem pelo resto da vida, na dengue não há geração de
anticorpos suficientes para a proteção do paciente, que poderá
ser infectado várias vezes durante sua vida.
Nos últimos cinco anos, os casos de sífilis no Brasil dispararam de 1,2 mil para mais de 65 mil. A epidemia dessa doença infecciosa transmitida pela bactéria Treponema pallidum durante a relação sexual ou de mãe para filho durante a gravidez, conta com dois grandes fatores: a falta de uso do preservativo na relação sexual, e a dificuldade do tratamento, uma vez que o medicamento está em falta no mundo inteiro. Para o diagnóstico dessa doença, são utilizados dois exames principais: não-treponemico, Venereal Disease Research Laboratory (VDRL) e teste de absorção de anticorpos treponêmico fuorescente (FTA-ABS). De acordo com os resultados dos exames abaixo, preencha as colunas com a interpretação correta de cada caso.

Assinale a alternativa que apresenta a sequência correta
de cima para baixo:
Paciente E.M.P, sexo masculino, 22 anos, compareceu ao laboratório para realização de exames anti HIV devido a uma relação sexual sem proteção há 45 dias.
O laboratório realizou um teste de triagem para HIV utilizando metodologia ELISA de 3ª geração, o resultado foi indeterminado.
Nesse caso, deve ser conduta do laboratório: