Equipamento de ponto crítico, ou secador de ponto crítico, é utilizado no preparo de materiais biológicos para análise em microscopia eletrônica de varredura, com o objetivo de obter amostras com estruturas superficiais preservadas. Dessa forma, a amostra deve ser fixada, desidratada e, em seguida, receber uma substância para a realização de substituição final ou transição.

Para realizar esse processo, devem ser seguidas etapas precisas, resumidamente descritas em:

Enquanto o microscópio óptico (MO) utiliza a luz visível para ampliar imagens, o microscópio eletrônico (ME) utiliza um feixe de elétrons para obter imagens de alta resolução.

Comparando o funcionamento e o preparo de materiais biológicos para observação nesses dois tipos de equipamentos, é correto afirmar que

A microscopia eletrônica tem uma preparação das amostras para análise muito mais complexa que a microscopia ótica devido a diversos fatores. Com relação à conservação (fixação) das amostras, essa complexidade existe principalmente porque:

Em relação à distinção morfológica entre os osteoclastos e demais tipos de células, é correto afirmar que os osteoclastos

Um trabalho acerca das concepções discentes sobre célula, a partir da pergunta de que se seriam todas microscópicas, levantou as seguintes afirmações:

E1 “Não, pois algumas algas são células macroscópicas que podem ser vistas sem microscópios”.
E2 “Não, pois não dá pra vê todas as estruturas a olho nu”.
E3 “Não. Há células que podem ser vistas sem o auxílio do microscópio como óvulos. Porém, as estruturas só podem ser reconhecidas com o auxílio destes”.
E4 “Sim, elas possuem tamanhos microscópicos sendo preciso o uso de microscópios ou lupas para ser visualizadas”.
E5 “Sim, pois são estruturas que não são observadas a olho nu”.
Fonte: SILVA, Deyvison Gabriel et al. Concepções de Discentes de Ciências Biológicas sobre o Conceito de Célula: Etapa 2 do Modelo de Reconstrução Educacional (MRE). In: ENCONTRO NACIONALDE PESQUISAEM EDUCAÇÃO EM CIÊNCIAS, 12., 2019, Natal. Anais... Natal: ABRAPEC, 2019.

A partir do contexto, avalie as asserções a seguir e a relação proposta entre elas.

I- Todas as respostas apresentam uma ideia simplista em relação a pergunta, embora algumas afirmações estejam mais próximas do conhecimento científico, tal como a E4 e outras mais distantes, como a E2.
PORQUE
II- Nas respostas apresentadas, o fato de visualizar ou não a olho nu, é a premissa para considerar o tamanho da célula como micro ou macroscópico.

A respeito dessas asserções, é CORRETO afirmar que: 

Os centríolos são organelas citoplasmáticas constituídas por trincas de microtúbulos ligados entre si, formando um tipo de cilindro.

Sobre os centríolos, marque a alternativa correta:

A compartimentalização membranosa representa um marco evolutivo que permite a ocorrência de processos metabólicos distintos em microambientes citoplasmáticos específicos das células. Considerando as características ultraestruturais que diferenciam os domínios biológicos em nível celular, assinale a alternativa CORRETA.

Micrografias eletrônicas revelaram a existência de uma rede de membranas interconectadas que se ramifica através do citoplasma de uma célula eucariótica. Esse conjunto de membranas é denominado de retículo endoplasmático. Sobre os tipos de retículo endoplasmático, marque a alternativa correta:

Além da degeneração gordurosa, outra característica da lesão celular reversível que pode ser reconhecida com a microscopia óptica é a:

Durante a avaliação funcional de células eucarióticas submetidas a diferentes condições fisiológicas e experimentais, observou-se que alterações específicas na disponibilidade de certos componentes químicos celulares resultaram em mudanças estruturais e metabólicas relevantes. Em um experimento hipotético, culturas celulares foram expostas: (i) à redução da concentração intracelular de água e íons essenciais; (ii) à modificação da composição lipídica das membranas; (iii) à inativação de cofatores vitamínicos; e (iv) à interferência na expressão gênica e na síntese proteica. Essas alterações impactaram diretamente processos como reconhecimento celular, transporte transmembranar, atividade enzimática, manutenção do potencial eletroquímico e regulação do metabolismo energético. 

Levando em consideração os conhecimentos sobre os componentes químicos da célula na perspectiva na relação indissociável entre estrutura molecular e função biológica, analise as afirmativas a seguir.

I. A diminuição da água intracelular compromete a solubilização de metabólitos e a cinética enzimática, uma vez que a estrutura tridimensional das proteínas e a eficiência das reações bioquímicas dependem do ambiente aquoso e das interações intermoleculares.

II. A alteração na composição de carboidratos de membrana afeta exclusivamente o metabolismo energético, não interferindo em processos de adesão, sinalização ou reconhecimento celular.

III. A modificação na proporção de lipídios saturados e insaturados nas membranas celulares influencia sua fluidez, permeabilidade e funcionalidade de proteínas integrais, evidenciando a relação entre estrutura química lipídica e função celular.

IV. A inativação de vitaminas hidrossolúveis e lipossolúveis pode comprometer reações metabólicas essenciais, pois muitas atuam como cofatores enzimáticos, afetando indiretamente a estrutura e a função de proteínas envolvidas no metabolismo celular.

V. A interferência na expressão gênica impacta apenas os ácidos nucleicos, sem repercussões sobre a síntese proteica ou sobre a organização estrutural da célula.

VI. A redução da disponibilidade de sais minerais pode alterar o potencial eletroquímico das membranas, a contração celular e a atividade enzimática, demonstrando seu papel estrutural e regulador no metabolismo celular.

Estão corretas as afirmativas: 

Ao fazer levantamento de microscópio para laboratório didático, o técnico teve que escolher, dentre outros requisitos mecânicos, o componente óptico: o tipo de lente objetiva de um microscópio de luz que possuísse correção da aberração para três cores e aberração esférica para duas cores, além de abertura numérica alta. Para atender a essa característica, a lente indicada é:

Na rotina de um laboratório que faz observações ao microscópio óptico, um dos métodos de obtenção de iluminação e de resolução máximas, é denominado de método de Koehler. Um técnico deve ajustar o equipamento que permite esse ajustamento, utilizando a sequência correta. Qual das alternativas apresenta esta sequência.

A menor ampliação típica de um estereomicroscópio, quando comparada ao microscópio óptico composto, está relacionada principalmente:

Considerando o microscópio eletrônico de transmissão, relacione a COLUNA I com a COLUNA II, associando as terminologias com as respectivas características.

COLUNA I
1. In Focus
2. Overfocus
3. Underfocus

COLUNA II
(  ) Ocorrência de franjas de Fresnel pretas e fundo granulado.
(  ) Ocorrência de franjas de Fresnel brancas, fundo granulado e contraste aumentado. 
(  ) Não se observam franjas de Fresnel, há pouca granulação e o contraste é mínimo.

Assinale a sequência correta.

Sobre a técnica de imunocitoquímica para microscopia eletrônica, é incorreto afirmar:

Sobre a obtenção de cortes ultrafinos para microscopia eletrônica de transmissão convencional, é incorreto afirmar:

Sabe-se que, em geral, as amostras biológicas possuem baixo contraste ao microscópio eletrônico de transmissão e que, para aumentar o contraste das imagens, é recomendada, na maioria dos casos, a utilização de substâncias contrastantes no preparo das amostras, geralmente sais de metais pesados, através do processo de contrastação.
Sobre as técnicas de contrastação de amostras biológicas, é incorreto afirmar: 

Sobre a técnica de metalização por pulverização (sputtering), assinale com V as afirmações verdadeiras e, com F, as falsas.
(  ) Após a inserção das amostras, a câmara de amostras deve ser evacuada para retirar traços de água e oxigênio, que podem ser quebrados em moléculas reativas capazes de oxidar e danificar a superfície das amostras.
(  ) Após evacuação da câmara, a atmosfera é substituída por um gás inerte, que não tem potencial de reagir com a superfície das amostras, como argônio.
(  ) O “alvo” é a peça que funciona como a fonte de metais para formação da camada metálica sobre as amostras e pode ter diversas composições, por exemplo: ouro; platina; ligas de ouro/paládio, entre outras.
(  ) Aplica-se um campo negativo de alta voltagem na área da câmara, em que o alvo está localizado e as moléculas de gás argônio são ionizadas em Ar+ e elétrons.
(  ) As moléculas de Ar+ atingem com força o alvo negativamente carregado, o que promove a ejeção de átomos de metal. Os átomos ejetados eventualmente atingem a superfície das amostras e se acumulam formando um revestimento metálico.
(  ) Assim como no processo de metalização por evaporação térmica, as partículas são arremessadas em linha reta sobre a superfície das amostras.
Assinale a sequência correta.

Ciente de que a metalização é uma etapa importante no preparo de amostras biológicas para microscopia eletrônica, assinale a alternativa correta.

Considerando a técnica de secagem em ponto crítico, analise as afirmativas a seguir.
I. É a única técnica de secagem de amostras biológicas em que é possível eliminar a interface líquido/ar, e, com isso, as forças de tensão superficial.
II. Baseia-se no princípio de que um fluido, em condições específicas de temperatura e pressão, apresenta suas fases líquida e de vapor indistinguíveis.
III. É a técnica de secagem mais utilizada, pois é considerada mais segura para a maioria das amostras, no entanto, é um processo longo, podendo levar dias para secagem.
IV. A substituição do solvente por líquido de transição é necessária quando se utiliza amostras que foram desidratadas em série crescente de solvente (geralmente etanol). Para secagem em ponto crítico de amostras hidratadas, essa etapa não é necessária.
V. Durante o processo de secagem, realizam-se as seguintes etapas: inserção das amostras na câmara preenchida com solvente, resfriamento da câmara, substituição completa do solvente por fluido de transição, aquecimento, despressurização até alcançar a pressão atmosférica, retirada das amostras.
VI. O fluido de transição mais utilizado atualmente é o dióxido de carbono; por esse motivo, a técnica é comumente chamada secagem em ponto crítico de CO₂ .
Está(ão) correta(s) a(s) afirmativa(s):