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Em um projeto de prospecção de fungos com o objetivo
de produção enzimática, obteve-se uma condição de cultivo
adequada ao aumento de secreção da enzima de interesse. Foram
utilizados métodos de análise para identificação e quantificação
de tal enzima no meio de cultivo. A identificação foi feita por
digestão da enzima e sequenciamento dos peptídios, mediante
espectrometria de massa. A massa molecular média da enzima foi
determinada como 55 kDa.
Considerando essa situação hipotética, julgue o próximo item.
Apesar de nem sempre ser diretamente acoplada à cromatografia, a espectrometria de massa com ionização por desorção a laser é suficiente para a determinação de massa molecular da enzima, como a descrita na situação em análise.
Em um projeto de prospecção de fungos com o objetivo
de produção enzimática, obteve-se uma condição de cultivo
adequada ao aumento de secreção da enzima de interesse. Foram
utilizados métodos de análise para identificação e quantificação
de tal enzima no meio de cultivo. A identificação foi feita por
digestão da enzima e sequenciamento dos peptídios, mediante
espectrometria de massa. A massa molecular média da enzima foi
determinada como 55 kDa.
Considerando essa situação hipotética, julgue o próximo item.
A digestão da enzima para identificação por LCMS deve ser feita utilizando-se aminopeptidase, que é vantajosa em relação a outras proteases por produzir a grande maioria dos peptídios com radicais polares no C-terminal.
Em um projeto de prospecção de fungos com o objetivo
de produção enzimática, obteve-se uma condição de cultivo
adequada ao aumento de secreção da enzima de interesse. Foram
utilizados métodos de análise para identificação e quantificação
de tal enzima no meio de cultivo. A identificação foi feita por
digestão da enzima e sequenciamento dos peptídios, mediante
espectrometria de massa. A massa molecular média da enzima foi
determinada como 55 kDa.
Considerando essa situação hipotética, julgue o próximo item.
O preparo de 100 mL de um solvente cromatográfico composto por 20% de acetonitrila e 1% de ácido fórmico em água deve ser feito em capela de exaustão, adicionando-se 20 mL de acetonitrila e 1 mL de ácido fórmico a 70 mL água e, depois, ajustando-se o volume para 100 mL com água.
Em um projeto de prospecção de fungos com o objetivo
de produção enzimática, obteve-se uma condição de cultivo
adequada ao aumento de secreção da enzima de interesse. Foram
utilizados métodos de análise para identificação e quantificação
de tal enzima no meio de cultivo. A identificação foi feita por
digestão da enzima e sequenciamento dos peptídios, mediante
espectrometria de massa. A massa molecular média da enzima foi
determinada como 55 kDa.
Considerando essa situação hipotética, julgue o próximo item.
A espectrometria de massa do meio de cultivo, em sistema de ionização por eletropulverização e analisador do tipo armadilha de íons, permite a análise elementar do meio de cultivo, com determinação da proporção entre carbono, nitrogênio e enxofre.
Um projeto de pesquisa visa à extração e à purificação de
uma enzima com atividade proteolítica a partir de 20 kg de um
extrato vegetal, de forma a preservar a atividade enzimática até o
final do processo, pois a enzima se desnatura facilmente.
Espera-se, com isso, extrair cerca de 20 microgramas da enzima
purificada e ativa em cada lote de material processado, que tenha
sido
considerado
material
suficiente
para
posteriores
caracterizações estruturais e funcionais da enzima.
Considerando essa situação hipotética, julgue o item a seguir.
É recomendado o uso de inibidores reversíveis de proteases durante o processo de extração e purificação.
Um projeto de pesquisa visa à extração e à purificação de
uma enzima com atividade proteolítica a partir de 20 kg de um
extrato vegetal, de forma a preservar a atividade enzimática até o
final do processo, pois a enzima se desnatura facilmente.
Espera-se, com isso, extrair cerca de 20 microgramas da enzima
purificada e ativa em cada lote de material processado, que tenha
sido
considerado
material
suficiente
para
posteriores
caracterizações estruturais e funcionais da enzima.
Considerando essa situação hipotética, julgue o item a seguir.
O uso de eletroforese em gel de poliacrilamida e dodecil sulfato de sódio é adequado à purificação desejada.
Um projeto de pesquisa visa à extração e à purificação de
uma enzima com atividade proteolítica a partir de 20 kg de um
extrato vegetal, de forma a preservar a atividade enzimática até o
final do processo, pois a enzima se desnatura facilmente.
Espera-se, com isso, extrair cerca de 20 microgramas da enzima
purificada e ativa em cada lote de material processado, que tenha
sido
considerado
material
suficiente
para
posteriores
caracterizações estruturais e funcionais da enzima.
Considerando essa situação hipotética, julgue o item a seguir.
Se for usada cromatografia de exclusão molecular, deve-se separar o extrato da resina por centrifugação branda, mantendo-se a fração ativa no sobrenadante.
Um projeto de pesquisa visa à extração e à purificação de
uma enzima com atividade proteolítica a partir de 20 kg de um
extrato vegetal, de forma a preservar a atividade enzimática até o
final do processo, pois a enzima se desnatura facilmente.
Espera-se, com isso, extrair cerca de 20 microgramas da enzima
purificada e ativa em cada lote de material processado, que tenha
sido
considerado
material
suficiente
para
posteriores
caracterizações estruturais e funcionais da enzima.
Considerando essa situação hipotética, julgue o item a seguir.
Por se tratar de um extrato vegetal natural, é dispensável o uso de equipamento de proteção individual (EPI) em sua manipulação inicial.
Um projeto de pesquisa visa à extração e à purificação de
uma enzima com atividade proteolítica a partir de 20 kg de um
extrato vegetal, de forma a preservar a atividade enzimática até o
final do processo, pois a enzima se desnatura facilmente.
Espera-se, com isso, extrair cerca de 20 microgramas da enzima
purificada e ativa em cada lote de material processado, que tenha
sido
considerado
material
suficiente
para
posteriores
caracterizações estruturais e funcionais da enzima.
Considerando essa situação hipotética, julgue o item a seguir.
A cromatografia de troca iônica é adequada ao processo de purificação e separará a enzima de outros componentes com base em sua carga líquida em uma solução.
Um projeto de pesquisa visa à extração e à purificação de
uma enzima com atividade proteolítica a partir de 20 kg de um
extrato vegetal, de forma a preservar a atividade enzimática até o
final do processo, pois a enzima se desnatura facilmente.
Espera-se, com isso, extrair cerca de 20 microgramas da enzima
purificada e ativa em cada lote de material processado, que tenha
sido
considerado
material
suficiente
para
posteriores
caracterizações estruturais e funcionais da enzima.
Considerando essa situação hipotética, julgue o item a seguir.
Se for usada a precipitação com sulfato de amônio seguida por uma etapa cromatográfica em fase reversa, a concentração final de sal da precipitação deve ser mantida constante até o final da cromatografia.
Um projeto de pesquisa visa à extração e à purificação de
uma enzima com atividade proteolítica a partir de 20 kg de um
extrato vegetal, de forma a preservar a atividade enzimática até o
final do processo, pois a enzima se desnatura facilmente.
Espera-se, com isso, extrair cerca de 20 microgramas da enzima
purificada e ativa em cada lote de material processado, que tenha
sido
considerado
material
suficiente
para
posteriores
caracterizações estruturais e funcionais da enzima.
Considerando essa situação hipotética, julgue o item a seguir.
A pesagem do material, desde a etapa inicial até o produto final, deve ser feita na mesma balança analítica, devidamente limpa e protegida a cada etapa.
Julgue o item subsecutivo, em relação às técnicas ômicas aplicadas na avaliação da regulação de expressão gênica e ao fluxo da informação genética.
Fatores sigma, sistema dois componentes, proteína ativadora de quorum sensing e riboswitches são elementos que atuam na regulação da expressão gênica transcricional em bactérias.
Julgue o item subsecutivo, em relação às técnicas ômicas aplicadas na avaliação da regulação de expressão gênica e ao fluxo da informação genética.
Além das avaliações globais da expressão gênica, é possível, também, avaliar os níveis de metabólitos totais e específicos, bem como rastreá-los em seus diferentes caminhos por meio da utilização de substratos marcados com carbono-13 (¹³C) e nitrogênio-15 (¹⁵N).
Julgue o item subsecutivo, em relação às técnicas ômicas aplicadas na avaliação da regulação de expressão gênica e ao fluxo da informação genética.
A especificidade das técnicas transcriptômicas é aumentada pela possibilidade de amplificação do material presente na amostra, com a consequente redução da sensibilidade proveniente dos erros inseridos no processo.
Julgue o item subsecutivo, em relação às técnicas ômicas aplicadas na avaliação da regulação de expressão gênica e ao fluxo da informação genética.
É possível proceder a análises de expressão gênica em metatranscriptomas microbianos, por RNAseq, sem genomas previamente montados.
Julgue o item subsecutivo, em relação às técnicas ômicas aplicadas na avaliação da regulação de expressão gênica e ao fluxo da informação genética.
Interatoma é um termo que designa especificamente as interações entre proteínas catalíticas e estruturais, estendendo-se às análises dessas associações pelas metodologias de metabolômica, proteômica e cristalografia.
Julgue o item subsequente, relacionados às metodologias de sequenciamento e análises de ácidos nucleicos.
A abordagem metagenômica contribui para a análise de microbiomas e para a prospecção de genes em diversos ambient es, ain da que sem a montagem completa dos genomas detectados, e, por ser a metagenômica uma abordagem independente de amplificação, a abundância microbiana não afeta a análise de diversidade.
Julgue o item subsequente, relacionados às metodologias de sequenciamento e análises de ácidos nucleicos.
A identificação de RNA não codificador, excetuando-se rRNA e tRNA, dificulta a análise e anotação de genomas, devido à baixa homologia na sequência linear, a exemplo dos RNAs reguladores, que preservam a estrutura tridimensional sem homologia na sequência primária.
Julgue o item subsequente, relacionados às metodologias de sequenciamento e análises de ácidos nucleicos.
Com a evolução dos métodos de sequenciamento de ácidos nucleicos, as leituras de fragmentos curtos, de 700 pb a 900pb, caraterísticas da metodologia de Sanger, tornaram-se obsoletas, tendo sido substituídas pelas leituras de fragmentos longos, de 10 kb a 50 kb, próprias da metodologia de nanoporos.
Julgue o item subsequente, relacionados às metodologias de sequenciamento e análises de ácidos nucleicos.
Na análise de genes parálogos, a identidade das sequências, ou similaridade funcional, é alta, devido à especiação, ao passo que, em genes ortólogos, a similaridade é menor, em razão das duplicações gênicas no processo evolutivo.
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