o hematócrito (Hct) é a razão entre eritrócitos centrifugados e plasma, refletindo o volume constituido pelos eritrócitos, cujo valor de referência em adultos depende do sexo do paciente.

índices hematológicos ou hematimétricos são determinados a partir da contagem global dos eritrócitos, taxa de hemoglobina e determinação do hematócrito.

as contagens de leucócitos referem-se ao relato numérico do total de leucócitos, bem como à descrição e classificação dos tipos de leucócitos: neutrófilos (Incluindo bastões), linfócitos, monócitos, eosinófilos e basófilos.

o teste de falcização de leucócitos foi desenvolvido para a pesquisa de anemia falclforme e, hoje, tem sido substituído pela eletroforese da hemoglobina, menos sujeita a Interferências técnicas.

reticulócitos são eritrócitos Imaturos recém liberados da medula óssea que ainda apresentam material genético, sendo necessário o uso do corante azul de cresil brilhante para sua contagem.

Os testes de aglutinação dependem da interação entre as partículas demarcadoras, os antígenos (Ags) e os anticorpos (Acs).

Nos testes de aglutinação, a ligação do Ac altera o estado físico do Ag e há formação de redes de complexos visíveis, em forma de grumos ou flocos.

Complexos Ag-Ac são especificamente detectados de forma indireta pela medição da reação dirigida ao Ac, como a fixação do complemento.

Complexos Ag-Ac podem ser detectados de forma direta por técnicas de precipitação ou então são marcados por uma sonda fluorescente.

Os procedimentos para identificar e detectar o Ac são usados, em sua maioria, para avaliar sorologicamente os níveis de Ag.

O antibiograma é extremamente útil para orientar o tratamento adequado para combater um patógeno especifico.

Os tipos de antimicrobianos utilizados no antibiograma não variam entre Gram-positivos e Gram-negativos.

A metodologia mais utilizada para antibiograma é o teste de disco-difusão, por ser rápido, econômico, reprodutível, de fácil execução e padronizado por comitês oficiais internacionais.

O teste de disco-difusão é realizado em placas de Petri contendo um meio sólido (geralmente o ágar Mueller Hinton).

A partir de uma colônia Isolada, deve-se fazer uma suspensão de bactérias até obter turbidez padrão McFarland 0.5, e, com auxilio de um swab, inocular de maneira uniforme em toda a superfície do âgar.

deve-se coletar o periférico, que é imediatamente transferido para os frascos de hemocultura para evitar/mitigar a contaminação do sangue.

manipular as amostras com extrema cautela, pois estão potencialmente contaminadas e podem causar graves doenças infectocontagiosas.

o frasco de hemocultura contendo amostra de sangue é incubado na temperatura de 35 a 37°C por até sete dias (14 dias para casos de suspeita de endocardite).

havendo crescimento no frasco, o material é repicado em placas de Petri contendo diferentes tipos de meio de cultura, que independem do agente etiológico.

na maioria dos equipamentos automatizados, as metodologias têm como principio tecnológico a detecção fluorimétrica ou colorimétrica.

As enterobactérias são a causa mais comum de Infecções do Trato Urinário (ITU), com a maioria dos episódios causada pela bactéria Staphylococcus saprophyticus.

Para o diagnóstico das Infecções do trato genital, são solicitados o exame qualitativo de urina e a urocultura com antibiograma.

Os meios de cultivo utilizados na semeadura da urina são o ágar cromogênico, ágar CLED, ágar-sangue e ágar-chocolate.

O diagnóstico de Infecções causadas por enterobactérias é baseado, principalmente, na presença ou ausência de diferentes enzimas.

Para o teste de motilidade, H₂S e indol, deve-se semear por picada até o fundo e incubar por 24h/35ºC.

A coloração de Gram é uma metodologia morfotintoríal complexa e de alto custo.

A sequência correta das substâncias utilizadas na coloração de Gram segue a seguinte ordem: adição de cristal violeta-álcool-lugol-safranina.

A coloração de Gram baseia-se na capacidade de alguns microrganismos reterem o cristal violeta no núcleo da célula bacteriana.

A coloração de Ziehl-Neelsen é utilizada quando há suspeita de bacilos álcool-ácido resistentes, como Mycobacterlum tuberculosis.

A diferença básica entre a coloração de Ziehl Neelsen e a de Gram é que está última necessita de uma etapa de aquecimento com emissão de vapores.

Para se estudar um microrganismo, o seu isolamento é desnecessário a partir da amostra biológica coletada.

Meios de enriquecimento são destinados a manter a viabilidade de uma cultura bacteriana.

Meios seletivos favorecem o desenvolvimento de determinados microrganismos em detrimento de outros.

O meio áger CLED é utilizado no cultivo de bactérias fastidiosas e na identificação das hemólises.

O meio ágar MacConkey é amplamente utilizado no isolamento de bactérias fastidiosas como Haemophilus spp. e Neisseria spp.

Hematozoários são agentes infecciosos que vivem parte do ciclo vital e/ou trafegam no sangue, seja com presença intra ou extracelular.

A malária é uma doença infecciosa causada por protozoários do gênero Plasmodium transmitidos pela picada da fêmea infectada do mosquito do gênero Anopheles.

Trypanosoma cruzi é transmitido pelo triatomídeo, vulgarmente chamado "barbeiro", sendo prevalente nas zonas rurais em todo o Brasil.

T. cruzi apresenta um ciclo de vida monoxênico, isto é, apresenta tanto um hospedeiro vertebrado, mamíferos em geral, incluindo o homem, quanto um hospedeiro invertebrado, insetos hemípteros da Família Reduviidae.

Na invasão aos eritrócitos, hã formação de merozoitos secundários que invadirão novos eritrócitos, formando o ciclo sanguíneo da malária.

O EPF é indicado para diagnóstico de parasitoses intestinais.

O método de Faust e de Willls está relacionado à busca de cistos e ovos leves de helminto.

O método de Hoffman é utilizado para pesquisa de proglotes de Taenia e de parasitas adultos.

O método kato-katz está relacionado à busca de ovos de helmintos.

A pesquisa de larvas de helmintos pode ser realizada pelo método de Beermann.

O que determina uma imagem acurada, com riqueza de detalhes, em um microscópio, é apenas a capacidade de ampliação de uma imagem.

Limite de resolução é a capacidade que um aparelho tem de "resolver" uma imagem, ou de deixá-la clara.

Utilizando uma objetiva de ampliação de 40 x, o aumento final da Imagem obtida é 4.000 x.

O condensador, que está situado na base do microscópio óptico, como o nome sugere, condensa um cone de luz que atravessa a amostra e penetra na objetiva.

As lentes oculares, que são os elementos de maior importância em um microscópio, promovem a primeira ampliação da Imagem.

Autoclave utiliza alta pressão e calor úmido para os procedimentos de esterilização, evitando a contaminação dos materiais analisados.

Algumas soluções químicas também são utilizadas com eficiência nos processos de desinfecção, como solução de hipoclorito de sódio e álcool 70%.

A solução de hipoclorito de sódio a 1 % é utilizada nos processos de descontaminação de pisos, vidrarias, jalecos e inativação química de material biológico.

Para a eficiência da solução álcool 70%, ela deve ser utilizada após a superfície ser lavada com água e sabão, com remoção do excesso de água.

No procedimento de preparo da solução álcool, para cada 50 ml de etanol a 95°, adiciona-se 100 ml de água destilada.

No descarte correto dos residuos sólidos, líquidos e gasosos provenientes de materiais, amostras e substâncias dos laboratórios, não há urna redução dos Impactos destes sobre o meio ambiente.

Resíduos perfurocortantes abrangem resíduos provenientes de materiais biológicos das coletas e utensílios laboratoriais utilizados nas coletas, armazenagem e manipulação.

Vidrarias, seringas, agulhas, bisturis, lâminas e pinças, que podem acarretar altos índices de riscos físicos e biológicos, são exemplos de resíduos infectantes.

Agulhas e seringas nunca devem ser reencapadas após o uso, pois aumentam os riscos de acidentes com os materiais biológicos Infectocontagiosos.

No caso dos produtos químicos, não há necessidade de tratamento antes do descarte em esgoto ou lixos orgânicos comuns.

Todos os anticoagulantes comercializados são identificados pela coloração da tampa da embalagem, de acordo com sua função.

O EDTA é indicado para exames ligados à área da hematologia e ti pagem sanguínea.

Frascos com tampa azul são indicativos do anticoagulante heparina, que é produzida pelo figado e age sobre a trombina.

Frascos de tampa cinza representam fluoretos, cuja utilização destina-se a exames de glicemia.

A heparina é o anticoagulante utilizado em exames de gasometria, hematologia, dosagens e imunologia.

os melhores reagentes analáticos apresentam reduzida pureza, embora sejam mais precisos em seus resultados.

nas técnicas de coloração simples, utiliza-se mais de um tipo de corante, sendo possível evidenciar a capacidade do microrganismo reter ou não o corante.

tampões são soluções utilizadas para a alteração do pH em um procedimento laboratorial, sendo compostos por ácidos conjugados e base conjugadas.

tem-se, como exemplo de solução tampão, o acetato, que é preparado a partir do ácido acético e um dos seus sais (acetato de sódio ou potássio).

o exemplo mais comum de corante, devido ao seu alto custo e baixa eficácia, utilizado nos procedimentos patológicos, é o método Gram.

Todas as coletas de amostras biológicas realizadas devem seguir os protocolos estabelecidos segundo as Normas de Biossegurança Brasileira, principalmente.

A técnica de coleta de plasma é um exemplo do que é realizado na coleta de material biológico com anticoagulante, logo, deve-se utilizar técnicas de coleta e homogeneização adequadas, promovendo a hemólise.

Antes de qualquer contato com o paciente ou com as amostras que chegam já coletadas, como, por exemplo, as de fezes e urina, o profissional deve organizar o material a ser utilizado, conferindo-os em conjunto com os dados da requisição do solicitante.

A técnica mais utilizada em um laboratório de análises clinicas é a coleta de sangue total, que se refere à técnica de coletar o material em conjunto com um anticoagulante, em seguida homogeneizar lentamente e, por fim, sempre Identificar os recipientes das amostras.

Amostras mal-conservadas, transportadas inadequadamente e recipientes sem identificação retratam não conformidades com normas e legislação, sendo considera.das irregulares.

Para o manuseio de equipamentos e instrumentos, deve-se verificar a disponibilidade e o funcionamento do equipamento, o protocolo de uso e limpeza do equipamento, manual do equipamento e o nome do responsável para solucionar dúvidas de operação ou para as situações de emergência.

Para o manuseio de vidraria e outros materiais, é necessário verificar o estado de limpeza, a presença de trincas e rachaduras, a resistência térmica, a resistência química e a compatibilidade com solventes e outros reagentes e a necessidade de tratamento prévio (esterilização, descontaminação química ou biológica).

Para o preparo de reagentes e soluções, deve-se observar que o reagente/solução deve ser feito apenas no momento do uso, seguindo os procedimentos adequados de manuseio e armazenamento dos produtos químicos e observando a compartibilidade entre os mesmos.

Na rotina laboratorial, os reagentes, materiais, equipamentos, resultados e sua interpretação não necessitam ser registrados, mas as recomendações de práticas seguras de laboratório devem ser conhecidas e cumpridas para evitar acidentes e reduzir a exposição aos riscos ambientais.

É importante elaborar e/ou ter disponíveis procedimentos operacionais escritos para realizar as atividades laboratoriais, uma vez que tais protocolos e fluxogramas auxiliam a otimização do trabalho e reduzem o tempo de execução e o risco de acidentes.

a cromatografia é um processo de separação de análise qualitativa, através do qual permite separar constituintes de uma mistura devido à sua distribuição por duas fases uma estacionária (fixa) e outra móvel.

na cromatografia de adsorção, a fase estacionária é sólida e a fase móvel pode ser líquida ou gasosa e baseia-se nas diferentes afinidades adsorventes da superfície da fase estacionária pelas moléculas da substância a separar.

o princípio físico-químico que norteia a eletroforese é a capacidade de moléculas carregadas migrarem sob influência de um campo elétrico.

dois componentes básicos são necessários para se realizar uma eletroforese: um campo elétrico (obtido através de uma fonte de corrente contínua) e a própria molécula carregada.

o método de eletroforese em gel de agarose baseia-se na separação de proteínas de acordo com a carga e o volume molecular e em uma das suas variantes (SDS-PAGE) pode ser utilizado na determinação da massa molecular relativa de proteínas.

De acordo com a classificação da CLSI GP40-A4-AMD dos tipos de água reagente, a do tipo 3 é indicada para a limpeza de vidrarias, para a produção de água de maiores graus de pureza e preparo de culturas bacteriológicas.

A destilação é um processo que busca remover substâncias presentes em um meio com base na diferença do ponto de ebulição entre elas. Para tanto, a água é aquecida até seu ponto de ebulição, o vapor resultante é direcionado para um recipiente, onde fica armazenado após a condensação.

Filtração é um procedimento simples de remoção física de partículas presentes na água. Nesse método, a água passa por algum material poroso de forma que as partículas fiquem retidas.

Microfiltração, ultrafiltração e nanofiltração são procedimentos de remoção física de partículas, que atuam no final do sistema de purificação, onde um filtro retém partículas superiores a determinado tamanho.

A osmose reversa visa a remoção de substâncias como compostos orgânicos e inorgânicos, bactérias e pirogênios, com tamanho inferior a 0,001 µm, portanto, anterior aos processos de micro, ultra e nanofiltração.

existem alguns tipos de centrífugas, dentre elas, a de micro hematócrito que é utilizada para centrifugação de microplacas de testes.

um leitor de placas ELISA necessita de cerca de 2 a 100 microlitros, ou seja, requer uma quantidade de amostra mínima para leitura do resultado.

um termociclador permite realizar os ciclos de temperaturas necessários para que ocorra a reação em cadeia da enzima polimerase ou amplificação do DNA.

a combinação de vários fluorocromos em citometria de fluxo permite a diferenciação de diferentes subpopulações numa determinada população, correspondentes a diferentes níveis de funcionalidade das células.

a citometria de fluxo é uma técnica consistente na detecção das verdadeiras percentagens de células viáveis e mortas em uma população de microrganismos.

Autoclaves são equipamentos que utilizam vapor saturado sob pressão, com 100% de umidade relativa, estando a água entre as formas líquida e gasosa. Esse vapor é o ideal para o processo de esterilização.

A qualificação do desempenho da autoclave pode ser realizada por monitorização química ou biológica, entendendo que os indicadores biológicos são os únicos que asseguram a qualidade efetiva da esterilização.

Potenciômetro é o equipamento utilizado para medição de pH (também chamado pHmetro, nesse caso, é um eletrodo sensível ao H+) ou de outros íons seletivos em variadas amostras.

O microscópio de contraste de fase utiliza luz ultravioleta para iluminar a amostra, permitindo que objetos corados com corantes fluorescentes sejam observados.

O espectrofotômetro registra dados de absorbância em função do comprimento de onda (λ). A característica mais importante do espectrofotômetro é a seleção de radiações monocromáticas.