Na caracterização cinética de enzimas utilizadas em processos biotecnológicos, como as envolvidas na hidrólise enzimática de biomassa lignocelulósica para produção de etanol 2G, o parâmetro K_m (constante de Michaelis) é determinado experimentalmente a partir de ensaios de velocidade de reação em diferentes concentrações de substrato.
O parâmetro K_m pode ser estimado como a concentração de substrato para a qual a velocidade inicial da reação corresponde a: