Tema central: Citometria de fluxo é um método que analisa, de forma rápida e objetiva, partículas/células em suspensão individualmente, quando passam por um fluxo laminar e são interceptadas por um ou mais lasers, mensurando múltiplos parâmetros (dispersão de luz e fluorescência de marcadores).

Alternativa correta: E (todas estão corretas)

Justificativa das afirmativas:

I. Correta. A técnica é multivariada e de alta vazão, permitindo medir simultaneamente tamanho, complexidade interna e expressão de antígenos (via anticorpos fluorescentes) em milhares de células/segundo. Base conceitual em Shapiro, Practical Flow Cytometry, 4ª ed.; UpToDate (Princípios de citometria de fluxo).

II. Correta. As células são hidrodinamicamente focalizadas em fluxo laminar e atravessam a região de interação do(s) laser(es) uma a uma, garantindo medidas individuais e reprodutíveis (Current Protocols in Cytometry).

III. Correta. A luz dispersa é coletada por detectores: FSC (Forward Scatter) correlaciona-se com tamanho celular e SSC (Side Scatter) com granulosidade/complexidade interna. Esses sinais ajudam a distinguir subpopulações; a fluorescência adiciona especificidade imunofenotípica (e.g., CD markers). Apesar de “identificar” poder soar absoluto, no contexto de prova refere-se à discriminação por tamanho/complexidade, o que é aceito.

Estratégia para a prova: Palavras-chave que confirmam a citometria de fluxo: “múltiplos parâmetros”, “fluxo laminar”, “lasers”, “uma a uma” e “luz dispersa → tamanho/complexidade (FSC/SSC)”. Se todas aparecem sem contradições, a tendência é “todas corretas”.

Análise das alternativas incorretas:

A (apenas I): Errada porque II e III também descrevem princípios essenciais (hidrofocalização/laser e FSC/SSC).

B (apenas II): Errada porque desconsidera a natureza multiparamétrica (I) e o uso da luz dispersa para inferir tamanho/complexidade (III).

C (apenas I e III): Errada por excluir o fluxo laminar e a interceptação por laser, que são centrais (II).

D (apenas II e III): Errada por omitir a característica de análise simultânea de múltiplos parâmetros, diferencial da técnica (I).

Aplicação prática: Na Medicina e Medicina Veterinária, é usada para hemogramas avançados, imunofenotipagem (linfomas/leucemias), avaliação de ploidia/ciclo celular e viabilidade/apoptose.

Referências essenciais: Shapiro HM. Practical Flow Cytometry (4ª ed.); UpToDate – Principles of flow cytometry and cell sorting (acesso 2024); Current Protocols in Cytometry; OMS/WHO e classificações hematológicas que incorporam imunofenotipagem por citometria.

Gabarito: E

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