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Q3949216
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Ano: 2026 Banca: IGEDUC Órgão: Prefeitura de Serraria - PB Prova: IGEDUC - 2026 - Prefeitura de Serraria - PB - Biomédico |
Q3949216 Biomedicina - Análises Clínicas
A análise de ácidos nucleicos por meio da técnica de PCR (Reação em Cadeia da Polimerase) exige precisão nas etapas de ciclagem térmica. Sobre os fundamentos da PCR, assinale a alternativa CORRETA. 
Alternativas

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Gabarito: B

Fundamento decisivo: O ponto técnico cobrado é a relação entre a temperatura de anelamento e a Tm dos primers na PCR: o annealing é escolhido com base nessa Tm, geralmente ligeiramente abaixo dela, para garantir hibridização específica. Isso valida a alternativa B e torna as demais incompatíveis com os princípios básicos da reação.

Tema central: Fundamentos da PCR
Análise das alternativas
A
Errada
Está errada porque o Mg2+ não é inibidor competitivo da DNA polimerase; ele é cofator essencial para a atividade catalítica da enzima na PCR. Retirá-lo da reação compromete a amplificação. A confusão possível é que excesso de Mg2+ pode reduzir especificidade e favorecer amplificação inespecífica, mas isso não muda seu papel bioquímico de cofator indispensável.
B
Certa
A alternativa B está correta porque a etapa de anelamento depende da hibridização entre primer e fita molde, e a estabilidade dessa ligação é expressa pela temperatura de fusão (Tm) dos primers. Por isso, a temperatura de annealing não é arbitrária: ela é estimada com base na Tm dos iniciadores, em faixa ligeiramente inferior, para equilibrar especificidade e rendimento da amplificação.
C
Errada
Está errada porque a Taq polimerase sintetiza a nova fita de DNA no sentido 5'→3', adicionando nucleotídeos à extremidade 3'OH da cadeia nascente. O erro da alternativa é trocar o sentido de síntese da nova fita pelo sentido de leitura da fita molde, que é 3'→5'.
D
Errada
Está errada porque, na eletroforese em gel de agarose, os fragmentos de DNA são separados principalmente por tamanho/peso molecular na matriz porosa. Embora o DNA migre por ter carga negativa sob campo elétrico, a discriminação entre fragmentos não ocorre apenas pela carga, já que a razão carga/massa do DNA é relativamente uniforme.
Pegadinha da questão
A banca explorou confusões clássicas: tratar o Mg2+ como inibidor por lembrar que seu excesso piora a especificidade, inverter o sentido de síntese da DNA polimerase com o sentido de leitura da fita molde e reduzir a eletroforese em agarose a um fenômeno dependente apenas de carga. A alternativa correta exige reconhecer que o annealing é definido a partir da Tm dos primers.
Dica para questões semelhantes
  • Em PCR, relacione imediatamente annealing com Tm dos primers; a temperatura de anelamento é ajustada a partir dela, não escolhida ao acaso.
  • Lembre que DNA polimerase sempre sintetiza a fita nova em 5'→3'; se a alternativa disser 3'→5', está errada.
  • Mg2+ em PCR deve ser pensado como cofator enzimático essencial; alteração de concentração afeta especificidade, mas não o transforma em inibidor.
  • Na eletroforese em agarose, a migração depende do campo elétrico, mas a separação entre fragmentos ocorre principalmente por tamanho na matriz.

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