Para o preparo do Ágar Chocolate, utilizado para o cultivo de microrganismos exigentes, embora cresçam neste meio quase todos os tipos de microrganismos. À base do meio, é adicionado sangue de cavalo, carneiro ou coelho em temperatura alta, o que faz com que as hemácias lisem, liberando hemina e hematina, compostos fundamentais para o crescimento dos microrganismos exigentes. O Ágar Chocolate é um meio de cultura extremamente útil para a análise, especificamente, de bactérias: