Alternativa correta: B - BrdU.

Tema central da questão: Esta questão aborda o método de identificação de células em fase de síntese (S) do ciclo celular, utilizando a citometria de fluxo. O foco está em reconhecer qual marcador é utilizado para detectar a síntese de DNA, uma etapa fundamental na proliferação celular.

Resumo teórico: Durante a fase S do ciclo celular, as células replicam seu DNA. Para estudar quais células estão neste processo, pesquisadores utilizam técnicas como a citometria de fluxo, que permite analisar características físicas e químicas de milhares de células simultaneamente. Marcadores específicos são essenciais para identificar eventos como a síntese de DNA.

Um dos métodos mais clássicos e confiáveis é o uso do BrdU (5-bromo-2'-desoxiuridina), um análogo sintético da timidina. Quando adicionado à cultura celular, o BrdU é incorporado ao DNA durante sua replicação. Posteriormente, pode ser detectado por anticorpos específicos, revelando quais células estavam sintetizando DNA no momento da exposição ao marcador. (Referências: Alberts et al., Biologia Molecular da Célula, 6ª ed.; Current Protocols in Cytometry).

Justificativa da alternativa correta:

B - BrdU é a resposta correta porque:

• O BrdU é amplamente usado para identificar células em replicação de DNA, pois se incorpora ao DNA novo durante a fase S.
• Após a marcação, é possível detectar o BrdU por citometria de fluxo utilizando anticorpos anti-BrdU, distinguindo assim as células que estavam em síntese ativa de DNA.
• Esta técnica é padrão-ouro em laboratórios de biologia celular para estudos de proliferação.

Análise das alternativas incorretas:

• A - CD71: Apesar de ser um marcador de células proliferativas (receptor de transferrina), não é específico para detecção da síntese de DNA e sim para identificar células em estado de ativação e proliferação, sendo pouco sensível para marcar a fase S isoladamente.
• C - triton X-100: É um detergente utilizado para permeabilizar células em protocolos laboratoriais. Não é um marcador nem um indicador de síntese de DNA.
• D - tripan blue: É um corante utilizado para verificar viabilidade celular (células mortas absorvem o corante). Não está relacionado à síntese de DNA nem à detecção de células em fase S.
• E - CD61: É um marcador típico de plaquetas e megacariócitos, não sendo utilizado para identificar síntese de DNA ou proliferação celular.

Estrategias de interpretação:

Ao analisar questões desse tipo, atente-se à especificidade do marcador citado. A banca pode trazer alternativas com marcadores de proliferação geral, de membrana, ou reagentes de laboratório, mas apenas o BrdU é diretamente incorporado ao DNA na fase S. Palavras-chave como “replicação de DNA” ou “síntese de DNA” direcionam para marcadores de incorporação, e não apenas de proliferação ou viabilidade.

Dica: Sempre relembre a função e o uso laboratorial de cada alternativa apresentada para evitar pegadinhas!

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