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Gabarito comentado
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Tema central: contagem de células CD34+ por citometria de fluxo para decidir o momento ideal de coleta/infusão no TCTH. A precisão depende do anticorpo anti-CD34 correto, do gating CD45/SSC, do uso de corante de viabilidade e, preferencialmente, de método single-platform com beads.
Alternativa correta: C – classe III
Os protocolos ISHAGE/ICCS/EuroFlow recomendam anticorpos anti-CD34 de classe III (ex.: clone 8G12/HPCA-2) para enumeração clínica, pois reconhecem epítopo estável em progenitores hematopoéticos imaturos, com menor influência de variações de glicosilação e de procedimentos de preparação celular. Isso reduz subcontagem e melhora reprodutibilidade e acurácia, essenciais para decisões como coletar ≥2,0–2,5 x106 CD34+/kg no TCTH autólogo.
Justificativa técnica: epítopos alvo dos anticorpos de classe III são menos sensíveis a fixação/enzimas e à heterogeneidade do CD34 (sialomucina altamente glicosilada), o que mantém a detecção em toda a hierarquia progenitora. Diretrizes clássicas do ISHAGE (Br J Haematol 1996;97: 1998 update), recomendações da ICCS e esquemas EuroFlow adotam anti-CD34 classe III associado a CD45 e 7-AAD/viabilidade, com estratégia de gating CD45dim/SSClow e contagem absoluta por beads. Ver também UpToDate (hematopoietic stem cell mobilization and collection) e Hoffman – Hematology.
Análise das alternativas incorretas
- A – classe I: reconhece epítopos mais sensíveis à glicosilação/neuraminidase e a algumas preparações, podendo subestimar CD34+ imaturos. Não é o padrão recomendado para enumeração clínica.
- B – classe VII: não há classificação reconhecida para CD34 nessa “classe”. É um distrator sem base em ISHAGE/ICCS.
- D – classe IV: igualmente não utilizada na taxonomia funcional dos anticorpos anti-CD34 para contagem; os grupos validados são I, II e III, sendo a III a indicada.
- E – classe VI: inexistente para a prática de enumeração de CD34 conforme diretrizes; não consta nos protocolos clínicos.
Dica de prova: ao ver “classe do anticorpo para quantificação de CD34”, associe imediatamente a classe III e ao protocolo ISHAGE. Cuidado para não confundir com HLA classe I/II ou subclasses de IgG, que não se aplicam aqui.
Referências essenciais: ISHAGE guidelines para contagem de CD34+ (Br J Haematol); ICCS/ESCCA consensos de contagem de CD34; EuroFlow; UpToDate (Hematopoietic stem cell collection); Hoffman – Hematology; Shapiro – Practical Flow Cytometry.
Gabarito: C – classe III.
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