Tema central: métodos de biologia molecular no diagnóstico de doenças infecciosas veterinárias, com foco na detecção direta do agente por PCR em surtos de diarreia por PEDV.

Alternativa correta: B — PCR (Reação em Cadeia da Polimerase)

A PCR, no contexto de vírus de RNA como o PEDV, é aplicada como RT-PCR/RT-qPCR (transcrição reversa seguida de PCR), permitindo amplificar segmentos específicos do genoma viral diretamente de fezes, conteúdo intestinal ou swabs retais. Vantagens: alta sensibilidade (detecta baixa carga viral), alta especificidade (alvos como genes N/S), e rapidez, essenciais em surtos. Diretrizes do WOAH/OIE – Manual de Testes Terrestres recomendam RT-PCR em tempo real como método de escolha para PEDV. Referências: WOAH Manual (PEDV); Fenner’s Veterinary Virology; revisões laboratoriais em saúde suína.

Raciocínio clínico: em leitões com diarreia aquosa intensa e alta mortalidade, é crucial identificar rapidamente o agente etiológico. Métodos que detectam o vírus diretamente (RT-PCR) superam os que dependem de resposta imune (sorologia), especialmente no início do surto, quando anticorpos ainda não estão detectáveis.

Análise das alternativas incorretas

A — Cultura viral: embora isole o vírus, é lenta, tecnicamente exigente (ex.: Vero com tripsina) e menos sensível em amostras clínicas com baixa carga ou inibidores. Em surto, não é o método mais ágil para confirmação etiológica. Usada mais para pesquisa/isolamento e não para triagem rápida.

C — Teste de aglutinação: detecta geralmente anticorpos/antígenos por aglutinação, mais comum para bactérias (ex.: Brucella). Não amplifica material genético e não é padrão para PEDV. Baixa sensibilidade/especificidade para esse contexto.

D — ELISA: pode detectar anticorpos (sorologia) ou antígenos, mas na prática para PEDV é mais utilizado para triagem sorológica e monitoramento de exposição. Em fase aguda inicial, anticorpos podem estar ausentes, levando a falso-negativos. Não oferece a mesma sensibilidade e rapidez da RT-qPCR para confirmação do agente.

Dicas de prova

• Se o enunciado enfatiza amplificação do material genético e “alta sensibilidade/especificidade”, pense em PCR/RT-qPCR.
• Sorologia (ELISA/aglutinação) indica exposição/imunidade, não confirma o agente na fase muito inicial.
• Cultura viral é confirmatória, porém lenta e menos prática em surtos.

Referências essenciais: WOAH (OIE) Manual of Diagnostic Tests for Terrestrial Animals – PEDV: RT-qPCR recomendado; Fenner’s Veterinary Virology (coronavírus entéricos suínos); revisões técnicas de laboratórios de sanidade suína sobre PADRÃO RT-qPCR para PEDV.

Gabarito: B

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