Tema central: Métodos de biologia molecular em Medicina Veterinária para detecção de agentes infecciosos e análise de material genético. A questão contrasta uma técnica de amplificação específica de ácidos nucleicos com outra de separação de fragmentos de DNA em gel sob corrente elétrica.

Alternativa correta: C — PCR − eletroforese em gel de agarose.

Por quê? A PCR (polimerase chain reaction) amplifica regiões específicas de DNA; quando o alvo é RNA (ex.: vírus de RNA), usa-se RT-PCR (transcrição reversa seguida de PCR). Após a amplificação, os produtos (amplicons) são comumente visualizados por eletroforese em gel de agarose, que separa os fragmentos por tamanho sob um campo elétrico, permitindo confirmar o tamanho esperado do alvo e a presença/ausência do patógeno. Esses princípios são padrão em diagnósticos veterinários (ex.: parvovirose, leishmaniose, brucelose) conforme o OIE Terrestrial Manual e manuais laboratoriais clássicos.

Como interpretar rapidamente:

• “Amplificar sequências genéticas específicas” → pense em PCR/RT-PCR.
• “Separação em gel sob corrente elétrica” → remete a eletroforese em gel de agarose (para DNA/RNA).
• Se o enunciado mencionar “proteínas/anticorpos”, aí sim considere ELISA/Western blot; não é o caso.

Por que as outras estão incorretas?

A) Imunofluorescência − reação de precipitação: Ambas são imunoensaios para detecção de antígenos/anticorpos; não amplificam DNA/RNA nem realizam separação de fragmentos em gel.

B) Western blot − ELISA: O Western blot envolve eletroforese, mas de proteínas (SDS-PAGE), seguida de detecção por anticorpos; não é usado para separar DNA em gel de agarose. O ELISA mede antígenos/anticorpos em placa, sem gel ou corrente elétrica. Logo, não casam com “amplificação de DNA/RNA” e “separação de fragmentos de DNA”.

D) Hibridização in situ − cultura bacteriana: A hibridização in situ detecta ácidos nucleicos em tecido/células mantendo arquitetura celular, mas não amplifica. Cultura bacteriana é crescimento em meios; não separa fragmentos de DNA em gel.

Referências úteis: OIE (WOAH) Manual of Diagnostic Tests and Vaccines for Terrestrial Animals; Sambrook & Russell, Molecular Cloning: A Laboratory Manual; Mackay IM et al. Real-time PCR in virology, Clin Microbiol Rev.

Dica de prova: associe “amplificação” a PCR e “gel + corrente elétrica” a eletroforese em agarose. Palavras-chave economizam tempo e evitam confusão com imunoensaios.

Gabarito: C

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