Gabarito: B — Cristal violeta

Tema central: A coloração de Gram separa bactérias em Gram-positivas e Gram-negativas pela estrutura da parede celular e pela capacidade de reter o corante primário.

Por que a alternativa B está correta?
Na técnica de Gram, o cristal violeta é o corante primário. Em seguida, o iodo (mordente) forma o complexo cristal violeta–iodo (CV-I). Durante a descoloração (álcool/acetona), bactérias Gram-positivas, por terem espessa camada de peptidoglicano e baixo teor de lipídios, retêm o complexo CV-I e permanecem roxo-violáceas. As Gram-negativas, com membrana externa rica em lipídios e fino peptidoglicano, perdem o CV-I e, ao receber o contracorante, tornam-se rosadas. Referências clássicas: Koneman’s Color Atlas and Textbook of Diagnostic Microbiology, Bailey & Scott’s Diagnostic Microbiology, e sumários do UpToDate.

Análise das alternativas incorretas

• A — Fucsina fenicada (carbol fuchsina): Corante típico da Ziehl–Neelsen (BAAR/ácido-álcool resistentes), não é o corante determinante na classificação Gram. Em alguns protocolos não padrão, fucsina pode ser contracorante, mas não é o corante cuja retenção define Gram-positividade.
• C — Safranina: É o contracorante na Gram. Colore as Gram-negativas de rosa após a descoloração. Não é o corante “impregnado” que define a positividade; essa propriedade é do cristal violeta retido pelas Gram-positivas.
• D — Eosina: Corante ácido usado principalmente em histologia (H&E), não faz parte do protocolo da coloração de Gram e não distingue Gram-positivas de Gram-negativas.

Estratégia de prova: Memorize a sequência clássica “C I A S”: Cristal violeta → Iodo (mordente) → Alcoól/acetona (descoloração) → Safranina (contracorante). A cor final roxa nas Gram-positivas decorre da retenção do cristal violeta complexado ao iodo no peptidoglicano espesso.

Pegadinha comum: confundir fucsina fenicada (Ziehl–Neelsen) ou safranina (contracorante) com o corante que define a Gram-positividade. O definidor é o cristal violeta.

Fontes: Koneman (Microbiologia Diagnóstica), Bailey & Scott (Microbiologia Diagnóstica), UpToDate – Principles of Gram staining.

Gostou do comentário? Deixe sua avaliação aqui embaixo!