A atividade de Cas9 exige motivo PAM e pareamento com o gRN...

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Ano: 2025 Banca: FACET Concursos Órgão: Prefeitura de Monteiro - PB Prova: FACET Concursos - 2025 - Prefeitura de Monteiro - PB - Bioquímico Plantonista |

Q3757343 Biomedicina - Análises Clínicas

A atividade de Cas9 exige motivo PAM e pareamento com o gRNA, gerando quebras duplas (DSBs) reparadas por NHEJ ou HDR. Estudos de Jinek et al., 2012; Doudna & Charpentier, 2014; Tsai & Joung, 2016 discutem janelas de tolerância a mismatches e viés por NHEJ em somáticas. Qual assertiva permanece correta?

A ausência de PAM compatível é irrelevante, uma vez que Cas9 usa processividade helicase para inserir o motivo no locus alvo antes da clivagem.

A HDR supera NHEJ em frequência em somáticas, prescindindo de template exógeno, pois copia a fita complementar por reparo basal intrínseco.

A especificidade absoluta decorre de pareamento perfeito em qualquer região, sendo mismatches invariavelmente proibitórios em toda a extensão do gRNA.

O complexo Cas9-gRNA reconhece PAM compatível, cliva o DNA e aciona NHEJ predominante em células somáticas, com risco de off-target por tolerância limitada a mismatches na seed.

O controle regulatório encontra-se pacificado, com aplicações clínicas rotineiras e sem dilemas éticos remanescentes em germline ou gene drive.

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